潰瘍性結腸炎大鼠血清消褪素及白介素-6的含量及意義①

李 璇，苗秋實，韓宇鵬，鮑秀琦

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

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潰瘍性結腸炎大鼠血清消褪素及白介素-6的含量及意義①

李 璇，苗秋實，韓宇鵬，鮑秀琦

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：研究和探討大鼠潰瘍性結腸炎血清消褪素和白介素-6 的變化及相關性。方法：健康清潔級6～8周齡雄性SD大鼠40只，隨機分為UC組和正常對照組，每組20只，采用免疫學方法，刺激結腸制備成潰瘍性結腸炎大鼠模型，標記為實驗組20只，對照組不做任何操作，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測出血清RvD1、白介素-6(IL-6)含量。結果：潰瘍性結腸炎的大鼠白介素-6平均含量為(94.84±6.43)ng/L，消褪素含量為(63.59±5.93)ng/L，正常對照組的大鼠白介素-6平均含量為(58.49±8.08)ng/L，消褪素含量為(44.85±3.55)ng/L。實驗組大鼠白介素-6與消褪素呈正相關(r=0.444，P=0.006)，對照組大鼠白介素-6與消退素無相關性(r=-0.011，P=0.948)。結論：血清消退素與白介素-6具有相關性，前者具有治療潰瘍性結腸炎的潛在作用。

潰瘍性結腸炎；血清消褪素；白介素-6

潰瘍性結腸炎(ulcerativecolitis,UC)是由多種病因引起的、異常免疫機制介導的慢性腸道非特異性炎癥。目對于UC的病因及發生機制研究并不明確,但多項研究認為免疫因素在UC中具有重要作用[1]。研究認為促炎細胞因子與抗炎細胞因子之間的免疫表達相互影響，通常是UC的重要發病機制。因此，對于潰瘍性結腸炎發病原因及發生機制的研究，從而指導對該疾病的治療，具有顯著意義。血清消退素D1(RvD1)是一種具有抗炎作用的多不飽和脂肪酸衍生物。白介素-6(IL-6)是由巨噬細胞產生的的多向性細胞因子。本實驗通過對造模大鼠體內消退素、白介素-6的測定，以健康鼠為參照，進一步研究大鼠潰瘍性結腸炎體內消退素、白介素-6的含量及意義。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康清潔級6～8周齡雄性SD大鼠40只體質量(200±20)g，清潔級，由佳木斯大學動物實驗中心提供，隨機分為UC組和正常對照組，每組20只。

1.2 模型制備

采用免疫學方法，刺激結腸制備成潰瘍性結腸炎大鼠模型，標記為UC組，UC組和對照組禁食不禁水7d。

1.3RvD1白介素-6(IL-6)測定

各組大鼠稱質量后，按6mL/kg腹腔內注射10%水合氯醛30min后分離腹腔，采取腹主動脈血，常溫靜置1h后以3000r/min離心30min，取血清，置于-60℃低溫冰箱中保存，采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測出血清RvD1、白介素-6(IL-6)含量，具體步驟并嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.4 主要儀器

5804R低溫離心機(EPPENDORF公司)、海爾低溫冰箱、白介素6(IL-6)檢測試劑盒MERCODIA、血清素ELISA試劑盒(上海瓦蘭生物科技有限公司)。

1.5 統計學方法

2 實驗結果

2.1 實驗組與對照組血清白介素-6、消退素含量比較

實驗組與對照組血清白介素-6含量的比較：實驗組(94.84±6.43)ng/mL明顯高于對照組(58.49±8.08)ng/mL，差異有極顯著統計學差異(P<0.01)。實驗組與對照組血清消退素含量的比較：實驗組(63.59±5.93)ng/mL明顯高于對照組(44.85±3.55)ng/mL，差異有極顯著統計學差異(P<0.01)。，見表1。

表1 實驗組與對照組白介素-6、消退素水平比較

注：與對照組比較，實驗組白介素-6及消退素水平明顯升高，差異有極顯著統計學差異(P<0.01)。

2.2 實驗組與對照組血清白介素、消退素相關性分析

潰瘍性結腸炎組大鼠血清白介素-6與消退素呈顯著正相關性(P<0.05)，而正常對照組二者未得出相關性(P>0.05)。見表2。

表2 血清白介素、消退素相關性分析

注：實驗組白介素-6與消退素呈顯著正相關性(r=0.444,P<0.01)。

4 討論

潰瘍性結腸炎是以結腸黏膜慢性炎性反應和潰瘍形成為病理特點的一種非特異性炎癥性腸病，系多病因引起、異常免疫介導的腸道慢性炎癥性疾病，目前認為各種微生物抗原的刺激,激活機體免疫反應，導致多種細胞因子參與的腸道組織的慢性非特異性炎癥[2]。UC被普遍認為系癌前病變，對健康具有潛在的威脅[3]。 血清消褪素(resolvin，Rv)是由ω-3多不飽和脂肪酸(EPA和DHA)衍生的脂質分子，研究顯示Rv具有抗炎作用。EPA和DHA可分別產生E-系列和D-系列的消退素[4]。消退素具有多種抗炎作用，有研究報道，血清消退素的含量可能與急性胰腺炎嚴重程度相關，在急性胰腺炎中起抗炎及促進炎性反應消退作用。目前國內未見到消退素對潰瘍性結腸炎的相關研究。已研究的結果提示，血清消退素是通過調節多種細胞因子和降低氧化應激，發揮抗炎和免疫調節的作用。白介素-6具有促進巨噬細胞、中性粒細胞釋放的作用，白介素-6的過度表達是機體多種疾病的主要因素之一[5]。白介素-6可在急性炎癥、機體免疫反應中對多種細胞產生促炎作用和誘導肝組織產生急性反應蛋白，多項數據表明，血清IL-6水平在活動期UC患者與健康人比較，明顯高于后者，所以研究白介素-6 對UC的病因診斷具有重要的臨床意義。本文通過對患有潰瘍性結腸炎的大鼠進行抽血化驗，測定其血清消褪素及白介素-6的含量，通過以上實驗數據可以看出，潰瘍性結腸炎的大鼠白介素-6平均含量為(94.84±6.43)ng/L，消褪素含量為(63.59±5.93)ng/L，正常對照組的大鼠白介素-6平均含量為(58.49±8.08)ng/L，消褪素含量為(44.85±3.55)ng/L。由此可見，白介素-6和消褪素D1與潰瘍性結腸炎密切相關。從表2可以得出，實驗組潰瘍性結腸炎的大鼠血清消褪素含量與白介素-6含量相比，存在相關性，P<0.05差異有統計學意義，相反對照組正常大鼠，血清消褪素含量與白介素-6含量相比，差異無統計學意義(P>0.05。) 本研究提示，血清消退素能夠抑制促炎性細胞因子IL-6的產生，從而減少炎癥細胞浸潤，改善腸組織的病理變化，減輕組織氧化損傷，調節促炎抗炎系統的平衡，從而抑制潰瘍性結腸炎的發生與發展。通過以上研究可以推論：消退素可能具有治療潰瘍性結腸炎的潛在作用。

[1]胡仁偉.細胞因子與炎癥性腸病[J].國外醫學·消化系疾病分冊，1998，18(3)：146

[2]宋愛玲.TNF-A、IL-6、IL-8與潰瘍性結腸炎嚴重程度相關研究[J]. 中國實用醫藥，2008，12(3)：3-4

[3]姜威，顏玉. 潰瘍性結腸炎Toll樣受體表達和NF-κB變化及益生菌的作用研究[J].黑龍江醫藥科學，2013,36(5)：34-35

[4]SchwabJM,ChiangN,AritaM,etal.ResolvinE1andprotectinD1activateinflammation-resolutionprogrammes[J].Nature,2007,447,869-874

[5]IsaacsKL,SartorRB,HaskillS.CytokinemessengerRNAprofilesininflammatoryboweldiseasemucosadetectedbypolymerasechainreactionamplification[J].Gastroenterology, 1992, 103:1587-1595

李璇(1988～)女，黑龍江佳木斯人，在讀碩士研究生。

鮑秀琦(1963～)女，黑龍江佳木斯人，碩士，教授，主任醫師，碩士研究生導師。E-mail:506964552@qq.com。

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