抗支口服液對哮喘大鼠IFN-γ與IL-6含量的影響

李志軍，王有鵬

(黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院，黑龍江 哈爾濱 150001)

哮喘是一種嚴重威脅人類健康的由嗜酸性粒細胞、肥大細胞和T淋巴細胞等多種細胞參與的慢性呼吸道疾病，其詳盡發病機制尚不清楚。中藥抗支口服液在臨床治療哮喘取得了顯著療效，但其療效機理研究尚不深入。本實通過觀察抗支口服液對哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-6的影響，來探討抗支口服液治療哮喘的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

成年Wistar大鼠40只，體質量(180±20)g，由黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供，符合一級實驗動物標準。

抗支口服液(組成:麻黃、石膏、杏仁、黃芩、射干、僵蠶、地龍、炙百部、川貝母、桑白皮、虎杖、蘆根、甘草)由黑龍江中醫藥大學附屬二院制劑室生產;大鼠IFN-γ試劑盒(武漢博士德生物工程有限公司);IL-6試劑盒(南京凱基生物科技發展有限公司)。

1.2 造模與分組

將40只大鼠隨機分為4組(空白組、模型組、西藥組、抗支口服液組)每組10只，除空白組外，其余三組大鼠適應性飼養后參考Palmans方法［1］進行造模，首次接受致敏注射為實驗第1天，于第1天和第8天給予各組大鼠腹腔注射10%卵蛋白、氫氧化鋁混合液1m l，使大鼠致敏，空白組則給予等量生理鹽水。從第3周天起于密閉空間內用3%卵蛋白對大鼠進行噴霧激發，霧化流量控制在5ml/min，每次15min，隔日1次，共激發4周。以大鼠出現呼吸加快、口唇發紺、點頭呼吸及站立不穩等表現為激發成功。空白對照組以生理鹽水代替卵蛋白進行腹腔注射及霧化吸入。

1.3 給藥

除空白組外，其余3組分別均從第1次哮喘激發開始(造模第3周)至處死前每天給予生理鹽水、地塞米松及抗支口服液灌胃治療，連續4周，各組均每7天復查動物體質量。

1.4 統計學處理

數據均采用SPSS 19.0統計軟件進行處理，檢測結果以均數±標準差()表示，進行正態分布檢測，方差齊的組間比較采用單因素進行分析;非正態分布或者方差不齊，則進行多個獨立樣本的非參數檢驗(Kniskal-WallisH檢驗)。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 抗支口服液對大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ的影響

實驗結果顯示，模型組與空白組相比血清及肺泡灌洗液中IFN-γ含量均著降低(P＜0.05);與模型組相比，西藥及抗支口服液組血清IFN-γ含量均顯著升高(P＜0.05)，且抗支口服液與西藥組之間無顯著差異(P＞0.05)，與模型組相較抗支口服液組及西藥組肺泡灌洗液中IFN-γ含量有所升高，但無統計學意義。提示抗支口服液能夠升高哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ含量，尤其是血清。結果見表1。

表1 給藥4周后各組大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ的水平比較()

表1 給藥4周后各組大鼠血清及肺泡灌洗液中IFN-γ的水平比較()

注:與空白組相比，*P＜0.05;與模型組相比，#P＜0.05。

組別 n 血清中IFN-γ水平 BALF中IFN-γ水平空白組8 70.42±10.36 60.52±9.31模型組 8 42.16±19.97* 41.36±7.23西藥組 8 56.49±9.78# 49.56±6.39抗支口服液組 8 57.81±7.53#48.76±10.36

2.2 抗支口服液對大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6的影響

實驗結果顯示，模型組與空白組相比血清及肺泡灌洗液中IL-6含量均顯著升高(P＜0.05);與模型組相比，西藥及抗支口服液組血清及肺泡灌洗液中IL-6含量均顯著降低(P＜0.05)，且抗支口服液與西藥組之間無顯著差異(P＞0.05)，提示抗支口服液能夠降低哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6含量。結果見表2。

表2 給藥4周后各組大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6水平比較()

表2 給藥4周后各組大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6水平比較()

注:與空白組相比，*P＜0.05;與模型組相比，#P＜0.05。

組別 n 血清中IL-6水平 BALF中IL-6水平空白組8 35.96±12.36 26.46±12.49模型組 8 57.21±8.36* 42.19±14.51*西藥組 8 37.56±11.29# 35.74±10.03#抗支口服液組 8 40.36±7.12# 37.16±9.48#

3 討論

支氣管哮喘是一種許多細胞及細胞因子參與的氣道慢性炎癥性疾病，其具體發病機制尚未完全清楚，其中關于“Th1/Th2兩類細胞因子比率的失衡乃哮喘的發作的重要機制［1-2］”為目前研究的熱點。Th1細胞主要分泌IFN-γ，IL-2，IL-12等細胞因子。以上細胞因子具有協助機體抗細胞內寄生微生物和遲發型超敏反應的細胞免疫效應功能。而Th2主要分泌IL-4、IL-5、IL-10、IL-1等具有促進IgE及炎性介質產生的H型細胞因子，進而引起呼吸道毛細血管的擴張、腺體的分泌、氣道平滑肌的收縮等的一些生理性變化，在免疫應答中發揮作用。

現代醫學研究表明，哮喘患者的氣道高反應性和氣道炎癥與血清總IgE及特異性IgE陽性率有極大的相關性。而主要由Thl細胞中CD4+細胞產生的IFNγ不僅是具有促進T淋巴細胞分化增殖作用的T細胞生長因子，還可以通過抑制IL-4 mRNA的轉錄水平而降低IL-4誘導的B淋巴細胞合成IgE，進而抑制哮喘的發病。IL-6［3］是由氣道巨噬細胞及支氣管上皮細胞產生的能夠介導炎癥反應和免疫反應發生的介質，其主要作用于組織細胞，能夠加速B細胞的終末分化，進而促進IgE生成，是引起氣道炎癥的重要細胞因子之一。有研究證實，哮喘急性發作時患者血清IL-6含量顯著升高。

目前在哮喘的臨床治療中，糖皮質激素仍是臨床一線用藥，但因其有諸多不良反應，在臨床的應用頗受限制。近年來中藥在治療哮喘的臨床治療中越來越受到了人們的重視。在中醫理論中哮喘可歸屬于“哮證”范疇，乃呼吸道常見病之一，哮喘常見臨床表現如下:吼中哮鳴音，不同程度地喘息、氣急、胸悶等，實為本虛標實之癥，雖病在肺，常可累及脾腎，以肺脾腎之氣虧虛為本，以痰濁氣機互相阻滯，肺失宣降為標，其治則為:急則治其標，緩則治其本的原則。抗支口服液是根據哮喘病因病機而立方的，主要由麻黃、石膏、杏仁、黃芩、射干、僵蠶、地龍、炙百部、川貝母、桑白皮、虎杖、蘆根、甘草共13味組成。麻黃、石膏、蘆根清熱宣肺，杏仁、炙百部、川貝母化痰止咳，黃芩、射干、虎杖清熱解毒，僵蠶、地龍解熱平喘。全方升降適宜、散收相制，扶正祛邪，使肺熱邪毒以祛除，咳、喘、痰諸癥得以改善，是標本兼治之劑。

綜上所訴，抗支口服液能顯著上調哮喘大鼠血清中IFN-γ含量，并能降低哮喘大鼠血清及肺泡灌洗液中IL-6的含量，是臨床治療哮喘的良方。

［1］李學良，許朝霞.支氣管哮喘發病機制的研究進展［J］.中華中醫藥學刊，2012，30(9):1960-1963.

［2］郭坤霞，賈金虎.探討支氣管哮喘的中醫治療新思路“痰熱喘咳從腸走，肺腎虛喘從腎溫”［J］.中醫藥學報，2014，42(5):114-116.

［3］徐莉，楊永青.支氣管哮喘患者血漿TNF-α、IL-6和NT-proBNP的臨床意義［J］.臨床肺科雜志，2013，18(2):292-293.