分支DNA技術檢測血漿游離DNA方法的建立及在急性心肌梗死患者中的初步應用

趙 麗，景蓉蓉，張魯榕，俞榮華

循環游離 DNA(circulating free DNA，cf-DNA)是一種無細胞狀態的胞外DNA，廣泛存在于血液(血清或血漿)、滑膜液和腦脊液等體液中。近來的研究表明在創傷、腫瘤、自身免疫性疾病和炎性反應等病理過程中可檢測到cf-DNA的改變［1］。血液不同于其他體液，來源于全身各處，因而對血 cf-DNA含量進行準確定量具有重要意義。

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者具有發病急、并發癥多、病死率高等特點［2－3］。隨著生物醫學的進步，心臟的生物學標志物如肌鈣蛋白 I(cTnI)、肌酸激酶同功酶 MB(CK-MB)和肌紅蛋白(MYO)等已廣泛應用于AMI的診斷。然而，現有的心臟生物學標志物也存在一定的缺點，如cTnI窗口期長而診斷再梗死以及判斷梗死范圍的能力差等。因此，人們仍在不斷的探索特異性、敏感性及診斷價值更高的心臟生物學標志物。目前國內未見AMI患者血cf-DNA含量的相關報道。本研究擬采用分支 DNA(branched DNA，bDNA)信號放大的定量檢測技術建立檢測血中cf-DNA-ALU含量的方法，并對其進行方法學評價，初步應用于AMI患者的檢測。

1 材料與方法

1.1 標本來源

實驗組:2010年5月至2011年8月在南通大學附屬醫院就診的82例AMI患者(年齡40～85歲，男性50例，女性32例)。符合美國心臟病學會/美國心臟協會2007診斷標準確診為AMI。排除標準:1)既往有AMI史;2)合并慢性心功能不全、外傷、腫瘤、肺栓塞、中風、心肌病、肝臟疾病、腎臟疾病及免疫系統疾病;3)正在上述疾病治療中。對照組:60名在南通大學附屬醫院體檢中心的健康成人。本研究中，所有受試對象均匿名。本研究經南通市第四人民醫院醫學倫理委員會批準。……