阿托伐他汀下調大鼠心肌梗死后線粒體融合素2表達和細胞凋亡

周 煒，陳 玲，周 逸，陳曼華

心肌細胞凋亡是引起心肌梗死后心功能不全、心室重塑及心律失常的重要原因［1］。目前發現，他汀類藥物可通過原癌基因Ras法尼基化的相關機制誘導磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositide 3 kinase/protein kinase B，PI3K/Akt)信號通路激活，發揮其調節細胞增殖和凋亡、心肌保護等調脂外作用［2－3］。線粒體融合素 2(mitofusin 2，Mfn2)是利用差異顯示法從自發性高血壓大鼠體內克隆獲得的基因，其表達產物可負向調控PI3K/Akt信號通路，誘導細胞凋亡［4］。目前關于他汀類藥物對Mfn2的調節作用尚不明確。因此，本實驗建立大鼠急性心肌梗死模型，觀察阿托伐他汀對心肌細胞凋亡及Mfn2表達的影響，進一步闡明其抗心肌細胞凋亡的機制，為其臨床應用提供新的實驗依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

凋亡檢測(TUNEL)試劑盒(Roche公司);Mfn2抗體(Abcam 公司)，p-Akt抗體、Akt抗體、α-肌動蛋白(α-actin)抗體和辣根過氧化物酶標記的二抗(Cell signaling公司)。免疫組化試劑盒、二氨基聯苯胺(DAB)顯色液(武漢博士德公司);阿托伐他汀(阿斯利康制藥有限公司)。其他的試劑采用國產分析純試劑。

1.2 實驗分組

SPF級雄性SD大鼠48只，體質量(250±30)g(華中科技大學同濟醫學院實驗動物中心)，動物許可證號:【SYXK(鄂)2009-0049】。實驗分為假手術組(sham);心肌梗死組(myocardial infarction，MI);阿托伐他汀1組(statin 1);阿托伐他汀2組(statin 2)，共4組，每組12只。Statin 1組和statin2組術前7 d開始每日灌胃，給予阿托伐他汀10和40 mg/kg，劑量的選擇參考文獻［5］。Sham組及MI組予等量蒸餾水灌胃。

1.3 建立大鼠心肌梗死模型

參照文獻［1］進行。腹腔注射3%戊巴比妥鈉(40 mg/kg)麻醉大鼠，小動物呼吸機鼻面罩輔助通氣。開胸后分離胸膜、心包，在左心耳下緣、肺動脈圓錐水平結扎左前降支。……