李明洋,劉乙蒙,劉 超,李淑玲,欒治東*
(遼寧醫學院 基礎醫學院 1.發育生物學教研室;2.組胚教研室;3.生物化學教研室, 遼寧 錦州 121000)
研究論文
Ubc9對雞胚神經嵴細胞發育的影響
李明洋1,劉乙蒙3,劉 超1,李淑玲2,欒治東1*
(遼寧醫學院 基礎醫學院 1.發育生物學教研室;2.組胚教研室;3.生物化學教研室, 遼寧 錦州 121000)
目的探索Ubc9和SUMO通路對雞胚神經嵴細胞發育的影響。方法1)采集雞胚,通過免疫熒光實驗和原位雜交實驗來檢測SUMO結合酶Ubc9及神經嵴細胞標志基因的表達情況。2)設置對照組(非特異性嗎啉代處理)和Ubc9-嗎啉代組來處理各組8期雞胚,隨后通過原位雜交實驗檢測Snail2,Sox9和FoxD3等神經嵴細胞晚期標志基因的表達情況。結果1)Ubc9與標志基因Pax7共表達于4、6和8期雞胚神經嵴細胞前體。2)與對照組相比,Ubc9-嗎啉代組雞胚單側上Snail2(P<0.05),Sox9(P<0.01)和FoxD3(P<0.05)的mRNA水平均有下降。結論Ubc9表達于4、6和8期雞胚的神經脊細胞前體,雞胚神經嵴細胞的形成需要SUMO通路參與。
雞胚;神經嵴細胞;Ubc9;SUMO通路
神經嵴細胞(neural crest cell, NCC)起源于脊椎動物背部神經管,為多潛能的干細胞并具有高度遷移性,能夠分化產生多種組織,包括頭部的大部分骨骼和肌肉、 外周神經系統的神經元和膠質細胞及皮膚黑色素細胞等[1]。NCC發育異常會導致缺陷病。研究表明,許多蛋白參與NCC形成和遷移,如NCC早期標志基因Pax7[2]以及晚期調控因子如Snail2、Sox9和FoxD3[3]等。
小泛素相關修飾蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)化是一種廣泛存在的蛋白質翻譯后修飾形式[4],參與核質轉運,細胞周期調控,信號傳導和轉錄活性調控等[5]。本研究將觀察SUMO化中唯一的E2結合酶-Ubc9[6]在早期雞胚中的表達情況,隨后檢測Ubc9敲除后雞胚的NCC晚期標志基因的表達水平,探索SUMO通路對雞胚NCC發育的影響。……