吡哆胺對人腎小管上皮HK-2細胞凋亡及纖維化因子表達的影響

袁 音，朱鵬立，林 帆，余惠珍

(福建省立醫院老年科 福建省臨床老年病研究所 福建醫科大學省立臨床醫學院， 福建 福州 350001)

研究論文

吡哆胺對人腎小管上皮HK-2細胞凋亡及纖維化因子表達的影響

袁 音，朱鵬立*，林 帆，余惠珍

(福建省立醫院老年科 福建省臨床老年病研究所 福建醫科大學省立臨床醫學院， 福建 福州 350001)

目的探討吡哆胺對人近曲腎小管上皮HK-2細胞凋亡及纖維化因子表達的影響及其作用機制。方法以吡哆胺(P)和替米沙坦(T)分別干預血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)作用的HK-2細胞，分為對照組、AngⅡ(10-6mol/L)組、AngⅡ分別加T(10-5mol/L)組、P(0.01、0.1、1和10 mmol/L)、T+P(1 mmol/L)組，采用MTT法檢測細胞存活率，Annexin V-FITC雙染法檢測細胞凋亡，流式細胞術分析活性氧簇(ROS)水平，ELISA檢測細胞上清液晚期糖基化終末產物(AGEs)濃度，real-time PCR檢測糖基化終末產物受體(RAGE)、TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA表達，Western blot檢測RAGE、TGF-β1、CTGF表達和NF-κB P65磷酸化水平。結果與AngⅡ組相比，吡哆胺和替米沙坦均增加HK-2細胞存活率，抑制細胞早期凋亡，降低細胞上清液AGEs濃度，減少ROS生成，下調RAGE、TGF-β1、CTGF、MMP-9 mRNA/蛋白表達和NF-κB P65磷酸化水平(均P﹤0.01)。吡哆胺的作用較替米沙坦顯著(P<0.05或P<0.01)，合用組的作用較替米沙坦單用組顯著(P<0.01)。結論吡哆胺可能通過降低AGEs-RAGE水平、改善氧化應激以及減少NF-κB P65磷酸化，從而抑制細胞凋亡并下調纖維化分子表達。

吡哆胺；血管緊張素Ⅱ；糖基化終末產物；細胞凋亡；纖維化

近曲小管上皮細胞是腎小管間質的主要功能細胞，在局部腎素-血管緊張素系統(renin-angiotensin system, RAS)的影響下，細胞的增殖與凋亡動態平衡被破壞，同時各類炎癥介質及纖維化因子的表達上調，從而進一步加速腎小管間質纖維化的進程[1- 2]。晚期糖基化終末產物(advanced glycation end products, AGEs)是糖基化反應所生成的一系列終產物的總稱。目前認為血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)可通過促進AGEs的生成，上調AGEs受體……