GDF-5聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠BMSCs向類(lèi)髓核樣細(xì)胞分化

魏強(qiáng)強(qiáng)，殷嫦嫦，殷 明，何丁文，周榮平，梁廣勝,3

(1.九江學(xué)院 轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 江西 九江 332000； 2.南昌大學(xué) 第二附屬醫(yī)院 骨一科；3.南昌大學(xué) 研究生院 醫(yī)學(xué)部，江西 南昌 330006)

研究論文

GDF-5聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠BMSCs向類(lèi)髓核樣細(xì)胞分化

魏強(qiáng)強(qiáng)1,2,3，殷嫦嫦1*，殷 明2，何丁文2，周榮平2，梁廣勝2,3

(1.九江學(xué)院 轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室， 江西 九江 332000； 2.南昌大學(xué) 第二附屬醫(yī)院 骨一科；3.南昌大學(xué) 研究生院 醫(yī)學(xué)部，江西 南昌 330006)

目的探討 GDF-5聯(lián)合地塞米松誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)向類(lèi)髓核樣細(xì)胞分化潛能及其表型的改變。方法用全骨髓貼壁法及序貫酶消化法分別分離培養(yǎng)大鼠BMSCs和髓核細(xì)胞(NPCs),均取P3代細(xì)胞分為1)對(duì)照組，2)BMSCs+Dex組3)BMSCs+GDF-5組4)BMSCs+Dex+GDF-5組(聯(lián)合誘導(dǎo)組)5)NPCs組。誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d，鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及密度變化，阿辛藍(lán)染色檢測(cè)蛋白多糖，RT-PCR檢測(cè)COL1、ACAN、SOX9及COL2和髓核細(xì)胞陽(yáng)性基因KRT19、PAX1和FOXF1的表達(dá)。Western blot檢測(cè)COL2及COL1蛋白表達(dá)。結(jié)果BMSCs形態(tài)呈長(zhǎng)梭型、漩渦樣生長(zhǎng)；NPCs呈球形、島狀生長(zhǎng)的特點(diǎn)；誘導(dǎo)后BMSCs向類(lèi)圓形、三角形轉(zhuǎn)變，細(xì)胞體積縮小，胞質(zhì)顏色與對(duì)照組相比逐漸加深；蛋白多糖分泌增加，以聯(lián)合誘導(dǎo)效果最佳。ACAN、SOX9、COL2基因的相對(duì)表達(dá)量逐漸增高，ACAN/COL2的比例呈遞增趨勢(shì)，COL1的表達(dá)呈遞減趨勢(shì)。NPCs陽(yáng)性基因KRT19、PAX1、FOXF1與對(duì)照組相比(P<0.05)。含GDF-5的誘導(dǎo)組COL2蛋白表達(dá)高于對(duì)照組(P<0.05)，而聯(lián)合誘導(dǎo)組COL1蛋白的表達(dá)最少。結(jié)論GDF-5可以誘導(dǎo)大鼠BMSCs向類(lèi)髓核樣細(xì)胞分化，且地塞米松能起到顯著促進(jìn)作用，為BMSCs移植治療椎間盤(pán)退變提供了理論依據(jù)。

GDF-5；地塞米松；BMSCs；分化；類(lèi)髓核樣細(xì)胞

下腰痛是當(dāng)今困擾人們正常生活最普遍的疾病之一，椎間盤(pán)退變是引起下腰部疼痛的最主要因素，其中髓核組織在遭受形態(tài)學(xué)及細(xì)胞變性后而導(dǎo)致其自身硬化以及椎間盤(pán)高度和靈活度的下降是椎間盤(pán)退變的主要原因[1]。……