微孔淀粉在丁香揮發油固化中的應用研究

馬琍琍，李舒新，滕家良

1南京晨光集團有限責任公司晨光醫院藥劑科，南京 210006；

2中國藥科大學 藥學院，南京 210009；3江蘇省省級機關醫院藥劑科，南京 210024

微孔淀粉，又稱多孔淀粉，是指原淀粉在不經糊化的前提下，利用淀粉酶或酸水解，將其制成表面布滿孔洞的淀粉顆粒[1]。具有該結構的改性淀粉顆粒，可作為不穩定物質的包埋載體，起到防止被包埋物質氧化、光解、揮發等作用，并且該物質安全性高。

丁香揮發油系從干燥丁香花蕾中提取的黃色至淡黃色的油狀液體，主要含有丁香酚，具有抗菌、驅蟲、清除自由基和抗氧化、抗衰老的功能，在醫藥、食品、日用化工等領域中有廣泛的應用。但丁香揮發油穩定性較差。為提高其穩定性，減少散失，一般采用包合技術將其制成β-環糊精包合物[2]。但存在輔料用量多、制備過程繁瑣等缺點。

本實驗采用微孔淀粉作為載體材料，通過簡單的攪拌工藝將丁香揮發油進行固化，并進一步研究固化粉末表面形態、穩定性及丁香酚的體外溶出性能，為微孔淀粉固化揮發油研究提供一定的實驗依據。

1 儀器與材料

LC-10AT型高效液相色譜儀、SPD-10A紫外檢測器（日本島津公司）；FA-2004型電子天平（上海精密儀器廠）；6390LV掃描電鏡 （日本電子公司）；ZRS-8G型智能溶出試驗儀 （天津大學無線電廠）；SHW110J實驗室攪拌機（上海盛海威電氣儀表有限公司）。

微孔淀粉（遼寧立達生物科技有限公司，批號：1000203256）；丁香（安徽萬生中藥飲片有限公司，批號：20121129）；丁香酚對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110725-200711）；甲醇為色譜純；其余試劑均為分析純；水為高純水。

2 方法與結果

2.1 丁香揮發油的提取

[3]，取丁香300 g，置 5000 mL的圓底燒瓶中，加入10倍量水，連接揮發油提取裝置，加熱煮沸，提取至測定器中揮發油量不再增加時，放出揮發油，加入適量無水硫酸鈉脫水，測得丁香酚的含量為65.82%，備用。

2.2 丁香酚的含量測定方法建立[4]

2.2.1 對照品儲備液的制備精密稱取丁香酚對照品6.71 mg，置于100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得 67.10 μg·mL-1對照品貯備液。

2.2.2 供試品溶液的制備取微孔淀粉固化丁香揮發油樣品約10 mg，精密稱定，置50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，稱重，超聲30 min，再稱重，用甲醇補足減失的重量，濾過，即得。

2.2.3 色譜條件色譜柱ODC C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（60∶40）；檢測波長：280 nm；流速：1 mL·min-1；柱溫：30℃；進樣量 10 μL。 理論板數以丁香酚計不低于3000。

2.2.4 線性關系考察分別精密吸取丁香酚對照品儲備液 0.2、0.5、1、2、5、10 mL， 置于 10 mL 量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。各精密吸取10 μL注入液相色譜儀中，測定峰面積，以對照品濃度（C）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：A=8.959×104C-2357，r=0.9998， 丁香酚在1.342～67.10 μg·mL-1范圍內線性關系良好。

2.2.5 精密度實驗精密吸取同一濃度對照品溶液，連續進樣6次，測定峰面積，RSD=0.87%，表明儀器精密度良好。

2.2.6 穩定性試驗精密吸取對照品溶液，于配制后 0、2、4、6、8 h 進樣測定峰面積，RSD=1.33%。 表明丁香酚溶液在8 h內測定穩定。

2.2.7 重復性試驗取同一批樣品6份，分別按供試品制備項制備，每份重復3次，進樣10 μL，丁香酚含量的RSD為1.41%，結果表明重復性良好。

2.2.8 加樣回收率試驗稱取6份已知丁香酚含量的樣品各約7 mg，精密稱定，置于50 mL量瓶中，分別精密加入一定量的丁香酚對照品溶液（67.10 μg·mL-1）適量，按“2.2.2”項下的方法處理，按“2.2.3”項下色譜條件測定，得平均加樣回收率為101.05%，RSD為1.73%，符合回收率試驗要求。

2.3 微孔淀粉固化丁香揮發油

按載體與藥物 1.5∶1、2.5∶1、3∶1 的質量比例，分別稱取微孔淀粉和丁香揮發油適量，采用實驗室攪拌機200 r·min-1攪拌5 min，即得固化粉末，備用。

2.4 丁香酚收率測定

按“2.2.2”項下的方法處理和“2.2.3”項下色譜條件測定。丁香酚收率按下式計算，結果見表1。

丁香酚收率（%）=固化粉末中丁香酚含量/所投揮發油中丁香酚含量×100%

2.5 固化粉末感官比較

微孔淀粉與揮發油不同比例所得固化粉末在感官上的差別見表1。

表1 微孔淀粉與揮發油的比例對丁香酚收率及固化粉末性質的影響（n=3，±s）

表1 微孔淀粉與揮發油的比例對丁香酚收率及固化粉末性質的影響（n=3，±s）

項 目 微孔淀粉與揮發油（質量比）1.5∶12.5∶13∶1丁香酚收率（%）47.95±0.6191.03±0.5693.37±0.73氣味 較重 淡 淡色澤 淡黃色 白色 白色流動性 差 好 好手捏是否結塊 是 否 否

從表1的結果可以看出，隨著載體與藥物比率增大，固化粉末中丁香酚收率增加，但載體與藥物比率3∶1和2.5∶1相比，丁香酚收率沒有顯著性增加。同時，綜合考慮其在實際應用中，粉末的流動性以及成品的穩定性，采用的比例為微孔淀粉∶丁香揮發油=2.5∶1，產品為白色、不結塊、具有良好的流動性的固化粉末。

2.6 固化粉末體外溶出性能研究[5]

分別取固化粉末、丁香揮發油適量填裝膠囊，按溶出度測定方法測定（《中國藥典》2010年版二部附錄XC槳法），以經脫氣處理的水（900 mL）為溶出介質，轉速 50 r·min-1，溫度 37℃±0.5℃，于 10、30、45、60、90、120、180 min 定時定點取樣 5 mL （同時補加同溫度等量溶出介質），以0.45μm微孔濾膜過濾，取續濾液按“2.2.3”項下色譜條件操作，測定出各時段溶出介質中丁香酚的濃度，計算累積溶出百分率。

圖1 固化粉末和丁香揮發油中丁香酚的溶出曲線（n=6）

圖1 結果顯示，在180 min內，固化粉末中丁香酚的溶出度明顯高于丁香揮發油，說明微孔淀粉固化丁香揮發油后，可以提高丁香酚的體外溶出度。原因可能與丁香揮發油被吸附于微孔淀粉的凹孔中，與溶出介質的接觸面增加有關，其原理和體內的溶出情況有待進一步研究。

2.7 固化粉末的表面形態

用掃描電鏡觀察微孔淀粉和固化粉末的表面形態，結果見圖2。

圖2 微孔淀粉（A）、固化粉末（B）的SEM照片

微孔淀粉的吸附能力與其顆粒結構密切相關，顆粒產生多孔結構，同時保持顆粒結構能有較好的吸附效果。圖2（A）為微孔淀粉顆粒表面結構電鏡圖，可以看出顆粒表面分布許多蜂窩狀小孔，小孔由表面向內延伸，比表面積增大，可以較好地吸附目的物質。與微孔淀粉相比，固化粉末（圖2B）的性狀無明顯差異，色澤稍暗，可能與吸附丁香揮發油或電鏡掃描視覺角度變化有關。

2.8 熱穩定性研究

分別取適量丁香揮發油、固化粉末（微孔淀粉與揮發油質量比2.5∶1）各3批，于50℃條件下放置8 h，定時分別取樣，按“2.2.3”項下色譜條件測定丁香酚含量，結果見表2。

表2 50℃熱穩定性試驗結果（n=3，±s）

表2 50℃熱穩定性試驗結果（n=3，±s）

批號樣品 丁香酚含量 （mg·g-1）0 h 8 h損失率（%）平均損失率（%）1丁香揮發油657.6±1.6338.7±1.348.49 2丁香揮發油659.2±1.4339.3±1.248.5348.53 3丁香揮發油658.0±1.8338.5±1.448.56 1固化粉末187.7±2.1137.5±1.926.74 2固化粉末188.3±1.8137.8±1.226.8226.79 3固化粉末186.8±1.5136.7±1.026.82

由表2結果可知，丁香揮發油和固化粉末在50℃下，放置8 h后，其平均損失率為48.53%和26.79%。說明在一定的溫度范圍內，丁香揮發油被微孔淀粉吸附固化后，其熱穩定性有顯著性增強。微孔淀粉凹孔部所產生吸引力較為集中，目的物質被吸附于孔洞內壁時，外界的吸引力很難達到。因此微孔淀粉產生的吸附很牢固，且在物理空間上具有包埋作用，更利于不穩定、易揮發和易散失物質的有效吸附。在固化粉末中，由于微孔淀粉的吸附和包埋作用，丁香揮發油受熱向外遷移時遇到了阻礙，延滯了其揮散而減小了損失；而液體丁香揮發油無載體保護作用，受熱容易揮發，損失較多。

3 討 論

本研究采用微孔淀粉固化丁香揮發油，制備工藝簡單，無需進行乳化、均質、干燥等復雜加工，又可避免因高溫加工產生對丁香揮發油成分不利的影響。

一方面，揮發油固體粉末化技術，如環糊精及其衍生物包合、微囊化等在中藥制劑的研究與運用方面已取得一定的進展[6]。但許多研究仍然只停留在實驗階段，很少將之運用于工業化大生產。另一方面，多數揮發油固體制劑含油率不高，例如在環糊精包合固化的處方工藝中，環糊精與油比例一般為 6∶1 時才能達到理想效果，有的甚至達 8∶1、10∶1，使得患者服用藥物劑量增加[7-8]。本研究以微孔淀粉為藥物載體，通過攪拌機固化丁香揮發油，載體用量與揮發油質量2.5∶1即有良好的固化效果，丁香酚收率達（91.03±0.56）%，所得固化粉末受熱穩定性良好。本方法工藝簡單，操作方便，適用于工業化生產。

參考文獻

[1]張 斌，陳 國.多孔淀粉的制備工藝及應用研究進展[J]. 食品工業科技，2012，33（2）：399-403.

[2]邱 琴，崔兆杰，韋棟梁，等.丁香揮發油化學成分的研究[J]. 藥物分析雜志，2003，23（6）：443-6.

[3]呂 佳，徐 晶，李海濱，等.丁香揮發油β-環糊精包合物制備工藝研究[J]. 中成藥，2004，26（5）：424-6.

[4]彭曉霞，李 仲，談春霞，等.丁香揮發油β-環糊精包合物的制備研究[J]. 甘肅中醫學院學報，2001，18（3）：10-3.

[5]劉 莉，劉 強，吳偉健.丁香普通粉與超微粉中丁香酚體外溶出度的比較 [J].時珍國醫國藥，2010，21（5）：1070-1.

[6]張 純，趙 陽，郭 澄，等.兩種含丁香油制劑的體外溶出度測定 [J].北京針灸骨傷學院學報，2001，8（1）：14-7.

[7]譚亞芹，賀 濤，韓雪梅.蒿芩清膽顆粒制備工藝的研究[J]. 中華中醫藥雜志，2007，22（11）：764-7.

[8]俞忠明，壽 旦，盛 蕊，等.扶本增脈顆粒劑中揮發油的包合工藝研究 [J].中華中醫藥雜志，2011，26（2）：363-6.