苦蕎茶對D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影響的實驗研究

鄧洋 張利霞

(包頭醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，014060)

苦蕎茶對D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影響的實驗研究

鄧洋 張利霞

(包頭醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，014060)

目的 研究苦蕎茶對D-半乳糖所致衰老小鼠丙二醛(MDA)和單胺氧化酶(MAO)的影響，探討苦蕎茶的抗氧化作用。方法 將60只小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組(正常對照組，模型對照組，苦蕎茶低、中、高劑量組)。正常對照組注射生理鹽水，其余組注射D-半乳糖；正常對照組和模型對照組每日用涼白開水灌胃(5 g/kg)，苦蕎茶低、中和高劑量組分別按照苦蕎茶2.5 g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg的量進(jìn)行灌胃。實驗結(jié)束后測定各組MDA和MAO含量。結(jié)果 模型對照組小鼠MDA均高于正常對照組和苦蕎茶各劑量組(P＜0.05)；正常對照組的MAO低于衰老模型組(P＜0.05)。結(jié)論 苦蕎茶可對D-半乳糖造成衰老小鼠的MDA和MAO含量升高有一定抑制作用，具有抗氧化功能。

苦蕎茶；MDA；MAO；D-半乳糖

蕎麥又名烏麥、三角麥、花麥，屬雙子葉植物。常見的有甜蕎和苦蕎兩種，其中苦蕎的營養(yǎng)價值和藥用價值都要高于甜蕎。研究表明苦蕎黃酮具有較強(qiáng)的清除自由基的能力，其中清除超氧化陰離子自由基的能力要強(qiáng)于茶多酚[1]。本研究通過建立D-半乳糖衰老動物模型，探討苦蕎茶對于衰老模型小鼠的丙二醛(mlondialdehyde，MDA)和單胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO)含量有無影響及其影響程度，從而探討苦蕎茶的抗衰老作用。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 實驗動物為昆明種健康雄性小鼠，體質(zhì)量(20.89±2.62)g，購自內(nèi)蒙古大學(xué)實驗動物中心，為清潔級動物。

1.1.2 試劑與儀器 D-半乳糖(美國Amresco公司)、丙二醛檢測試劑盒、單胺氧化酶檢測試劑盒、考馬斯亮蘭蛋白測定試劑盒(以上試劑盒源于南京建成生物工程研究所)、苦蕎茶(包頭市娜其格爾食品有限公司)。T6新悅分光光度計、電光分析天平TG328A、TU-1810紫外可見分光光度計等。

1.2 動物分組及處理 將60只健康昆明種雄性小鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為5組，每組12只，分別為正常對照組、模型對照組、苦蕎茶低劑量組、苦蕎茶中劑量組和苦蕎茶高劑量組。實驗期間正常對照組每日皮下注射生理鹽水(0.05 g/kg)，其余組每日皮下注射D-半乳糖(0.05 g/kg)連續(xù)6周；正常對照組和模型對照組每日用涼白開水進(jìn)行灌胃(5 g/kg)，苦蕎茶低、中和高劑量組分別按照苦蕎茶2.5 g/kg、5 g/kg、10 g/kg的量進(jìn)行灌胃，連續(xù)進(jìn)行6周。處死動物后，取小鼠的肝和胃組織測定MDA和MAO含量。

1.3 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析 實驗所有數(shù)據(jù)以(x±s)表示，采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，用單因素方差分析比較其組間差異。

2 實驗結(jié)果

2.1 實驗動物的一般情況 實驗前，各組小鼠毛色白，有光澤，精神狀態(tài)良好，體質(zhì)量間沒有差異。隨著造模進(jìn)行，正常對照組小鼠的一般情況良好，模型對照組小鼠出現(xiàn)行動緩慢，精神萎靡，毛發(fā)不均，個別小鼠有尾部斷落情況，苦蕎茶各劑量組外觀和表現(xiàn)介于正常對照組和模型對照組之間。

2.2 各組小鼠體質(zhì)量變化(表1) 在實驗進(jìn)程中各組小鼠體質(zhì)量逐漸增加，正常對照組與苦蕎茶3個劑量組之間平均體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而模型組與其他4組之間的平均體質(zhì)量差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明D-半乳糖對小鼠體質(zhì)量增長有明顯影響。

2.3 實驗組小鼠肝和胃組織MAO和MDA測定結(jié)果比較(表2) 由表2可知模型對照組小鼠肝組織和胃組織的MDA值都是最高的，與正常對照組和苦蕎茶各劑量組對比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，表明D-半乳糖可以造成小鼠衰老，而苦蕎茶對丙二醛(MDA)含量升高有一定抑制作用；正常對照組的MAO值最低，與衰老模型組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，且苦蕎茶高劑量組與正常對照組相比差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，表明苦蕎茶對小鼠機(jī)體的衰老具有抑制作用。

表1 各組小鼠體質(zhì)量變化(g)

表2 實驗各組小鼠肝和胃組織MDA和MAO結(jié)果比較

3 討論

D-半乳糖所致亞急性衰老小鼠模型是在一定時間內(nèi)通過對小鼠皮下連續(xù)注射D-半乳糖，使機(jī)體細(xì)胞內(nèi)的半乳糖濃度增高，在醛糖還原酶催化下，還原成半乳糖醇，該物質(zhì)不能在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步代謝而聚集，從而影響細(xì)胞正常的滲透壓，導(dǎo)致細(xì)胞代謝紊亂，使自由基堆積，從而造成細(xì)胞的損傷[2-3]。本實驗的小鼠體質(zhì)量測定顯示衰老模型組體質(zhì)量明顯低于其他組，尤其低于正常對照組，有統(tǒng)計學(xué)差異，說明D-半乳糖造成了小鼠的衰老。

目前，從分子生物學(xué)角度認(rèn)為衰老是隨著年齡的增加，體內(nèi)抗氧化酶的活性不斷下降，導(dǎo)致體內(nèi)氧自由基不能及時被清除，生成過氧化物，從而引起細(xì)胞的衰老和死亡，加速機(jī)體的衰老。MDA是過氧化脂質(zhì)的降解產(chǎn)物，其含量與細(xì)胞損傷的程度呈正相關(guān)，MDA含量的變化可間接反映組織中氧自由基含量的變化[4]。有研究結(jié)果顯示苦蕎葉提取物中有一定量的抗氧化物質(zhì)，能有效的清除體內(nèi)的自由基，具有較好的抗氧化和抗脂質(zhì)過氧化作用[5]，也有研究結(jié)果[6]表明苦蕎生物類黃酮對CCL4所致肝臟丙二醛含量的增高有明顯的抑制作用。這些與本實驗結(jié)果都是相符合的。

MAO存在于細(xì)胞的線粒體外膜上，參與體內(nèi)單胺類物質(zhì)代謝的主要酶類，廣泛存在于肝、腎、腦等組織中[7]。MAO是廣泛地催化芳香族、脂肪族單胺類氧化脫氨基反應(yīng)的酶，分為A、B兩型，隨著年齡的增長MAO-B的含量增加，MAO-B又被稱為老化相關(guān)酶[8]。MAO可以通過激活神經(jīng)毒作用，亦或提高H2O2的水平來加速大腦老化[9]；同時單胺類神經(jīng)遞質(zhì)如5-HT和NE等被MAO氧化分解，促進(jìn)神經(jīng)系統(tǒng)老化，減少應(yīng)激敏感性，使大腦的各種思維活動能力下降[10]。所以MAO是研究衰老的一個重要指標(biāo)。本實驗研究表明，苦蕎茶可以降低肝臟和胃中MAO的活性，減少神經(jīng)毒作用和神經(jīng)遞質(zhì)的分解，從而起到延緩衰老作用。

苦蕎茶可對D-半乳糖造成衰老小鼠的MDA和MAO含量升高有一定抑制作用，具有抗氧化功能。

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Objective To study the influence of buckwheat tea on malondialdehyde(MDA)and monoamine oxidase(MAO)of D-galactose induced aging mice，and explore the antioxygenation of buckwheat tea.Methods 60 mice were randomly divided into 5 groups on the basis of body mass(normal control group，model control group，three groups with low，moderate and high dose of buckwheat tea).The normal control group were injected with normal saline，while the other groups with D-galactose.The normal group and the model control group were gavaged daily with cold boiled wate(5.0 g/kg)，and the three groups with low，moderate and high dose of buckwheat tea were gavaged with buckwheat tea by 2.5 g/kg，5.0 g/kg，and 10.0 g/kg.MDA and MAO contents were determined after the experiment.Results MDA of the model control group was higher than that of the normal control group and the three buckwheat tea groups(P＜0.05)；MAO of the normal control group was lower than the aging model group(P＜0.05).Conclusion Buckwheat tea has certain inhibitory effect on increasing MDA and MAO content of D-galactose induced aging mice，which has antioxidant function.

Buckwheat Tea；MDA；MAO；D-galactose

1005-619X(2014)08-0678-03

10.13517/j.cnki.ccm.2014.08.004