非霍奇金淋巴瘤患者化療前外周血中CD4/CD8值與其療效的關系

王 樂 李午平 黃 燕

腫瘤化療療效與患者的免疫機能密切相關，研究表明，許多癌細胞在化療后僅被藥物殺傷而未死亡，這部分癌細胞的清除有賴于免疫系統[1-6]。非霍奇金淋巴瘤(NHL)是一類淋巴系統惡性腫瘤，隨著疾病的發生發展，患者的免疫機能常處于低下狀態[7]，而CD4/CD8值是一項重要的免疫指標，在免疫狀態監測等領域有著廣泛而重要的應用，目前，NHL患者化療前CD4/CD8值與化療近期療效的關系尚未明確。本研究采用流式細胞術(FCM)測定了74例NHL患者化療前的CD4/CD8值，并分析了該指標與化療近期療效的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

入選的74例患者均為我院2012年1月至2013年11月收治的，其中男性47例，女性27例；年齡15～75歲，中位年齡49歲；所有患者均經病理組織學檢查確診為NHL，治療的一線方案為CHOP。其中Ⅰ期12例，Ⅱ期 17例，Ⅲ期25例，Ⅳ期20例(Ann Arbor分期)；有B癥狀者25例，無B癥狀者49例。所有患者近3個月內未接受化療，化療前卡氏評分≥60分，重要器官功能基本正常，預計生存期≥3個月，并有可測量評價的客觀指標。

1.2 方法

化療前采用直接免疫熒光標記全血溶血法和流式細胞術(FCM)，檢測患者外周血T淋巴細胞亞群：用貝克曼庫爾特公司的三色熒光標記混合單抗CD4-FITC/CD8-PE/CD3-PC5或mouse IgG1-FITC/PE/PC5(同型對照)標記EDTA抗凝全血，貝克曼庫爾特Optilyse-C溶血液裂解紅細胞，生理鹽水洗滌、重懸，在貝克曼庫爾特 EPICS-XL流式細胞儀上測定淋巴細胞中CD3+CD4+和CD3+CD8+細胞的百分比，并計算CD4/CD8值。

治療一線方案為CHOP：CTX 750 mg/m2，Ⅳ，d1；ADM 50 mg/m2，Ⅳ，d1；VCR 1.4 mg/m2(最大劑量2 mg) Ⅳ，d1；PDN 100 mg PO，d1-5，21～28天為1個周期，必要時由臨床醫生進行調整。全組患者均化療2～6個周期。每化療2個周期后進行1次療效評價，有效者繼續采用原方案化療，可達6個周期；無效者改用其他方案。化療中常規給予止吐、保肝等對癥處理，化療結束后復查血常規、肝腎功能，出現Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制時給予對癥處理。

1.3 療效評價標準

化療療效按照2013版NCCN評價指南分為：完全緩解(CR),部分緩解(PR),穩定(SD)以及進展(PD)；以CR+PR為有效率。每化療2個周期后進行療效評價。

1.4 統計學方法

應用SPSS 17.0軟件進行數據分析，率的比較采用卡方檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CD4/CD8值與NHL臨床特征的關系

74例患者中，共有16例患者CD4/CD8值偏低(參考值范圍1.02～1.94)，占21.6%，CD4/CD8值與患者年齡、性別、Ann Arbor分期和B癥狀均無相關性(表1)。

表1 CD4/CD8值與 NHL臨床病理特征的關系(例，%)

注：*為連續校正法。

2.2 近期療效與CD4/CD8值的關系

全部患者均化療2個周期或以上，化療2個周期時74例患者均可評價療效，有效率為77.0%，其中CD4/CD8值偏低組有效率為62.5%，CD4/CD8值正常或偏高組有效率為81.0%，P>0.05，差異無統計學意義；化療至4個周期時，51例患者可評價療效，有效率為82.4%，其中CD4/CD8值偏低組有效率為54.5%，CD4/CD8值正常或偏高組有效率為90.0%，P<0.05,差異有統計學意義。

3 討論

腫瘤與免疫的關系，是當前腫瘤研究的一大熱點。目前已知，在多種血液和實體腫瘤中，腫瘤的發生發展、治療的療效和預后都與機體免疫機能有密切關系。在腫瘤發生發展過程中，腫瘤細胞對免疫系統的破壞是一個普遍現象，因此，患者在確診時便常處于免疫力低下的狀態[7]；另一方面，近來的研究顯示，免疫系統對受化療藥物殺傷的腫瘤細胞具有的更強的識別和攻擊能力[1]，此外，免疫系統對治療后少量殘留腫瘤細胞的清除、對腫瘤復發的防范以及預后的改善都有重要意義[8]。這就凸顯了在臨床實踐中對腫瘤患者進行免疫狀態監測的必要性。

輔助T細胞(CD3+CD4+)和胞毒T細胞(CD3+CD8+)是細胞免疫的主要組成部分，在免疫系統對抗腫瘤的過程中起著至關重要的作用，CD4/CD8值是反映免疫功能的重要指標，CD4/CD8值偏低代表患者免疫功能低下。本研究中，我們對74 例非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者化療前CD4/CD8值進行了測定，結果表明，有相當一部分(21.6%)患者的免疫功能低下，這與我們的預期相吻合。有研究表明，腫瘤細胞可以利用幾乎所有的免疫抑制途徑，如上調抑制性T細胞數量、分泌抑制性細胞因子等手段，對免疫系統進行抑制從而實現免疫逃逸[9]；而按照克隆進化學說，實現免疫逃逸是腫瘤發生發展的關鍵步驟之一[10]。本研究還發現，CD4/CD8值偏低與患者年齡、性別、Ann Arbor分期及B癥狀均無相關性，這提示免疫抑制在NHL患者中可能普遍存在，而非局限于上述某一特定患者群體；但由于本研究病例數有限，且觀察指標不夠全面，還需要進一步的研究來分析免疫抑制和各種臨床特征有無相關性，以便確定在未來的臨床實踐中，究竟是應該對所有患者進行免疫狀態監測，還是對特定患者群體進行監測。

有研究顯示，化療療效與機體免疫狀態密切相關[1-6]，因此，我們推斷，患者CD4/CD8值與化療近期療效可能存在關聯。本研究中，患者2個周期化療療效與CD4/CD8值無相關性，但4個周期化療療效與CD4/CD8值顯著相關，這表明，免疫系統對化療療效的促進作用可能需要較長時間才能顯現。此后續研究中，我們還需要更大的樣本量來進一步確認2個周期化療療效是否確實與CD4/CD8值無關。

上述結果表明，CD4/CD8值與NHL患者化療近期療效有密切聯系：CD4/CD8值偏低患者的近期療效不如CD4/CD8值正常或偏高者，說明免疫系統可能確實在化療中發揮了作用。后續研究中，我們需要在免疫缺陷動物模型上進一步驗證此結論并闡明其機制，還需要在樣本量更大、觀察指標更全面的臨床研究中確認CD4/CD8值偏低是否是影響化療近期療效的獨立因素。如果上述觀點均得以確認，那么接下來的問題是：化療前CD4/CD8值及其在化療過程中的變化是否和遠期療效相關？能否通過CD4/CD8值(并綜合考慮其他影響因素)來預測特定患者的療效，并據此調整化療方案？能否研制藥物對CD4/CD8值進行干預以改善化療效果？這一系列問題都有賴于大量深入的后續研究，但無論如何，本研究都給出了正面的提示，為進一步的研究提供了基礎。

[1] Smith AA,Hodge J,Garnett C,et al.Chemotherapy-induced immunogenic modulation of tumor cells enhances killing by cytotoxic T lymphocytes and is distinct from immunogenic cell death 〔J〕.Int J Cancer,2013,33(3):624-636.

[2] Zitvogel L1,Kepp O,Kroemer G,et al.Immune parameters affecting the efficacy of chemotherapeutic regimens 〔J〕.Nat Rev Clin Oncol,2011,8(3):151-160.

[3] Mattarollo SR,Loi S,Duret H,et al.Pivotal role of innate and adaptive immunity in anthracycline chemotherapy of established tumors 〔J〕.Cancer Res,2011,71(14):4809-4820.

[4] Baldwin AS.Regulation of cell death and autophagy by IKK and NF-κB:critical mechanisms in immune function and cancer 〔J〕.Immunol Rev,2012,246(1):327-345.

[5] Halama N,Michel S,Kloor M,et al.Localization and density of immune cells in the invasive margin of human colorectal cancer liver metastases are prognostic for response to chemotherapy〔J〕.Cancer Res,2011,71(17):5670-5677.

[6] Hannani D,Sistigu A,Kepp O,et al.Prerequisites for the antitumor vaccine-like effect of chemotherapy and radiotherapy 〔J〕.Cancer J,2011,17(5):351-358.

[7] Lindau D,Gielen P,Kroesen M,et al.The immunosuppressive tumour network:myeloid-derived suppressor cells,regulatory T cells and natural killer T cells〔J〕.Immunology,2013,138(2):105-115.

[8] Fridman WH,Pagès F,Sautès-Fridman C,et al.The immu-

ne contexture in human tumours:impact on clinical outcome〔J〕.Nat Rev Cancer,2012,12(4):298-306.

[9] Whiteside TL.Inhibiting the inhibitors:evaluating agents t-

argeting cancer immunosuppression〔J〕.Expert Opin Biol Ther,2010,10(7):1019-1035.

[10] Greaves M,Maley CC.Clonal evolution in cancer〔J〕.Nature,2012,481(7381):306-313.