骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞介導(dǎo)的血紅素氧合酶-1促進(jìn)大鼠心肌梗死后血管再生
2014-08-28 09:39:12王艾力彭小凡
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床
2014年2期
曾 彬，王艾力，彭小凡，李 昌
(1.武漢大學(xué)人民醫(yī)院心血管內(nèi)科，湖北武漢430060;2.中南醫(yī)院心血管內(nèi)科超聲心動(dòng)室，湖北武漢430071;3.武漢大學(xué)2008級(jí)臨床醫(yī)學(xué)五年制2班，湖北武漢430060;4.湖北省中山醫(yī)院心內(nèi)科，湖北武漢430033)
隨著對(duì)細(xì)胞移植與基因治療結(jié)合的研究，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 (mesenchymal stem cells，MSCs)作為外源性治療基因的載體而被關(guān)注［1］。一些研究表明供體細(xì)胞在移植前的基因修飾可使其獲得更高的移植存活率及增強(qiáng)隨后發(fā)揮的綜合生物學(xué)作用。譬如:用抗凋亡基因Bcl-2修飾過(guò)的MSCs可以提高移植MSCs在急性心肌梗死后心肌的生存率，改善左室心肌重塑及左室心功能［2］。然而，對(duì)于局部血流灌注未恢復(fù)的缺血心肌來(lái)說(shuō)，單純提高移植細(xì)胞存活率并沒(méi)有很大的意義，尤其是對(duì)于患者的遠(yuǎn)期預(yù)后。
血紅素氧合酶-1(heme oxygenase，HO-1)是血紅素分解代謝的起始酶和限速酶，能催化血紅素降解為一氧化碳(CO)、亞鐵離子(Fe2+)和膽紅素，后者迅速降解為膽綠素。最近已經(jīng)有研究證明了HO-1在血管再生方面的重要作用［3－4］。然而，MSCs介導(dǎo)的 HO-1是否對(duì)血管再生產(chǎn)生影響仍然不得而知。
1 材料與方法
1.1 MSCs的分離、純化、擴(kuò)增培養(yǎng)和腺病毒轉(zhuǎn)染
無(wú)菌條件下采集16～18周齡 Wistar大鼠的雙側(cè)脛、股骨骨髓，密度梯度法分離 MSCs，以細(xì)胞數(shù)1×105個(gè)/mL密度接種于塑料培養(yǎng)瓶，DMEM/F12+20%胎牛血清、37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)，細(xì)胞培養(yǎng)至70% ～80%匯合時(shí)，更換無(wú)血清培養(yǎng)基;按感染復(fù)數(shù)值200加入Adv-HO-1(由臺(tái)灣中央研究院李梅芳博士饋贈(zèng)，攜帶綠色熒光蛋白)，37℃孵育2 h加入新鮮的培養(yǎng)基，5% CO2、37℃ 條件下培養(yǎng)［5］。
