電化學(xué)發(fā)光免疫法和酶聯(lián)免疫法檢測血清糖類抗原125的對比分析

王起來，常紅葉

（1.吉林省人民醫(yī)院，吉林長春130021；2.吉林省臨床檢驗中心）

電化學(xué)發(fā)光免疫法和酶聯(lián)免疫法檢測血清糖類抗原125的對比分析

王起來1，常紅葉2＊

（1.吉林省人民醫(yī)院，吉林長春130021；2.吉林省臨床檢驗中心）

人體對發(fā)生發(fā)展中的腫瘤產(chǎn)生反應(yīng)或腫瘤自身所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)、激素、酶及癌基因等物質(zhì)統(tǒng)稱為腫瘤標(biāo)志物，正常人的血清中不存在或僅有很低濃度，且不同腫瘤患者血清中所表達(dá)的標(biāo)志物也各有不同，故對特異性標(biāo)志物的檢測可作為相關(guān)腫瘤的觀察指標(biāo)，如早期診斷、評估預(yù)后、療效觀察以及術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移等。CA125是卵巢癌診治過程中最常用的腫瘤標(biāo)志物。本實驗分別用電化學(xué)發(fā)光免疫法（ECLIA）和酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測血清糖類抗原125，對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源就診于我院婦產(chǎn)科的106例卵巢癌患者血清，均經(jīng)術(shù)后病理證實為卵巢癌者。

1.2 儀器與試劑電化學(xué)發(fā)光法采用瑞士羅氏Cobas e411全自動分析儀及其配套檢測試劑；酶聯(lián)免疫法采用ELX800全自動酶標(biāo)儀及CA125診斷試劑盒（康乃格生物工程有限公司）。

1.3 測定方法采靜脈血2管，每管3ml，凝血后每分鐘3000轉(zhuǎn)離心5min以分離血清，分別用ECLIA及ELISA檢測CA125，記錄檢測數(shù)據(jù)。所有操作嚴(yán)格按照試劑及儀器操作使用說明書進(jìn)行。化學(xué)發(fā)光法CA125線性范圍及參考值分別為0.0－2000.0U／ml、0.0－35.0U／ml；酶聯(lián)免疫法CA125線性范圍及參考值分別為0.0－400.0U／ml、0.0－35.0U／ml。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法兩種方法的檢測數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ˉx±s）表示，進(jìn)行t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組數(shù)據(jù)對比CA125在低濃度（0.0－35.0U／ml）和高濃度（400.1－2 000.0U／ml）有統(tǒng)計學(xué)差異；中濃度（35.1－200.0U／ml、200.1－400.0U／ml）無統(tǒng)計學(xué)差異，詳見表1。

表1 ECLIA及ELISA檢測CAl25結(jié)果比較

3 討論

由于卵巢位處盆腔位置特殊，且早期卵巢癌無明顯臨床癥狀，常被患者忽視，延誤治療，多數(shù)患者確診時已至中晚期，5年存活率僅為15%，但若能被早期診斷和治療，其5年生存率可升高至94%［1］。故改善卵巢癌患者的預(yù)后情況早期診斷和治療尤為重要。CA125是黏蛋白樣糖蛋白的一種，分子量較高，共有氨基酸殘基22152個，分子量在1000KD以上，由定位于染色體19p13.3的MUCl6基因編碼，可被單克隆抗體OC125結(jié)合，CA125作為目前卵巢癌重要的相關(guān)抗原，被認(rèn)為是檢測卵巢上皮癌首選的腫瘤標(biāo)記物。其在檢測卵巢上皮腫瘤患者血清中的陽性率高達(dá)82%－94%，在臨床實踐中研究發(fā)現(xiàn)患者血清中CA125的值與臨床病理分期有關(guān)，隨著臨床分期的增高，CA125的含量也隨之增高。可見卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸與CA125在患者血清中的表達(dá)有相關(guān)性［2］。其可作為卵巢癌診斷和監(jiān)測的輔助方法。本實驗采用ECLIA及ELISA法對卵巢癌患者血清中CA125進(jìn)行檢測，兩組數(shù)據(jù)對比CA125在低濃度（0.0－35.0U／ml）和高濃度（400.1－2 000.0U／ml）有統(tǒng)計學(xué)差異；中濃度（35.1－200.0U／ml、200.1－400.0U／ml）無統(tǒng)計學(xué)差異。可見ECLIA與ELISA相比，線性范圍更寬。ECLIA是電化學(xué)發(fā)光和免疫測定相結(jié)合的產(chǎn)物，它標(biāo)記物的發(fā)光原理與一般的化學(xué)發(fā)光不同，包括電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光二個過程，由電化學(xué)引發(fā)，在電場的作用下發(fā)生的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，具有高度的特異性，精度及可重復(fù)性高，監(jiān)測結(jié)果更為穩(wěn)定等優(yōu)點，電化學(xué)發(fā)光能最大程度消除樣本底的干擾及對位量的散射，可以獲得較高的靈敏度。另外電化學(xué)發(fā)光法可以完全自動化，可以減少系統(tǒng)誤差和隨機誤差。并且ECLIA試劑保存期長，測定結(jié)果快而準(zhǔn)，靈敏性高、特異性強、線性范圍寬等優(yōu)點。可作為卵巢癌早期診斷及排除的輔助方法，并可對治療中的患者進(jìn)行療效評估。ELISA操作簡便，儀器要求不高，但可受到手工加樣、孵育時間、溫度、洗板等因素干擾，靈敏度及可重復(fù)性受限，但成本低廉，適用于批量標(biāo)本檢測。

［1］袁嘉玲，段瑞岐，郄明蓉.應(yīng)用受試者工作特征曲線分析人附睪蛋白4和糖鏈抗原－125聯(lián)合檢測對卵巢癌的診斷價值［J／CD］.中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志，電子版，2012，8（2）：155.

［2］Coussy F，Chereau E，Darai E，et al.Interest of CA 125level in management of ovarian cancer［J］.Gynecol Obstet Fertol，2011，39（5）：296.

2013－08－20）

1007－4287（2014）10－1715－02

＊通訊作者