臨床免疫檢測灰區判讀研究

【摘要】目的：酶聯免疫檢測的灰區應該有一個可操作性“規定”，在沒有一個統一規定的情況下，我們的實驗室如何去規范操作，是我們實驗室應該做的一件大事，不認真對待灰區的出現，就會引發和滋生。方法：通過114292例酶聯免疫檢測，總結出來灰區出現如何處理的路子-方法。結果：根據總結的方法完成制度管理和SOP文件，按照執行這些方法和文件，讓我們在灰區出現時能夠正確處理，近兩年來，我們按照科室制定的制度執行操作，沒有在灰區的問題上出現誤差和失誤。

【關鍵詞】灰區；復檢；標本

【Abstract】objective： enzyme-linked immune detection of grey area should have a maneuverability ＼\"rules＼\"， in the absence of a unified regulation， how to standardize the operation， in our laboratory is one of the lab should do something， not serious about the grey area， will cause and breeding. Methods： 114292 cases by enzyme-linked immune detection， summarized out way - method of how to deal with the grey area. Results： the method to complete the system management according to the summary and SOP files， according to implement these methods and file， let us can correctly handle， in the presence of grey area in the past two years， we according to the system performs operations， the department did not have errors and mistakes in the grey area issues.

【key words 】gray area re-inspection specimens

【中圖分類號】R722.12 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0021-02

酶聯免疫檢測，這個定性試驗，經過多年的實驗室應用，為檢驗事業的發展、為免疫性疾病患者解決了不可磨滅的功勞，也為醫務工作者爭得了名譽。但對于檢驗工作者，也帶來了一些不好解決的難題—灰區[1] [2] [3]問題；酶聯免疫檢測結果報告，按照相關規定，只能出具陰性或者陽性報告，模棱兩可的報告確實難倒了檢驗工作者。用ELISA方法檢測的各種免疫試驗，如乙肝兩對半、丙型肝炎、艾滋病、丁肝、戊肝、ANA、甲肝等，都存在著灰區的問題，我們如何在工作上，對這個問題進行分析處理，我們做了這方面的研究分析。

1、對象與方法

1.1、研究對象

選擇2012年至2013年，兩年在我院的乙肝表面抗原48997例、丙型肝炎抗體檢測29230例、艾滋病抗體檢測31034例、丁型肝炎抗體483例、戊型肝炎抗體檢測661例、甲型肝炎抗體檢測1110例，ANA2777人次，檢測樣本共計114292例。

1.2、方法

其中乙肝兩對半是用達安的時間分辨檢測的，灰區相對要少些；ANA采用歐蒙酶聯免疫檢測試劑盒；其他項目全部采用北京萬泰的酶聯免疫檢測試劑盒。

2、結果

通過兩年的檢測，共檢測出灰區157例，其中乙型肝炎表面抗原36例，采用的是時間分辨檢測，檢測灰區值最高0.58，最低0.43。下面的項目采用的酶聯免疫檢測；HIV11例，丙型肝炎抗體測定12例，丁肝4例，戊肝6例，甲肝11例，ANA77例；檢測的SCO值最高1.1453，最低0.8571。

3、討論

3.1、酶聯免疫法和時間分辨熒光分析法都存在灰區，灰區如何處置，我們通過檢測數據；把乙型肝炎表面抗原設定為0.425～0.575ng/L為灰區，乙肝表面抗原灰區的結果應檢測其HBe抗體和HBc抗體，特別是后者，如果HBc抗體是陰性的，則HBsAg的陽性基本不太可能，可以發陰性報告；如是陽性，則：將標本10000g，10min離心，然后復檢[4] [5]（如果離心機沒有g的標注，用10000轉/min的高速離心也可達到這個目的）。如果高速離心后復檢為陰性，應報告陰性結果，若仍為弱陽性：應換用另一款比較公認的試劑，比如雅培Architect的化學發光法試劑，重新檢測；如果沒有這樣的進口試劑，用其他廠家的HBsAg檢測一下，如果是陰性，可發陰性報告，如果也是陽性，則需要慎重對待，可以進行血清HBV PCR檢測，當然PCR陽性的話基本就可以發送HBsAg陽性報告，而PCR陰性也不能排除HBsAg陽性可能。所以，最后這種情形下確認HBsAg確實比較復雜。總之，乙肝的診斷是一個很考驗臨床知識的項目，要綜合考慮，不可過于匠氣，給患者帶來不必要的負擔。.

3.2、其他的酶聯免疫法設定為S/CO在0.85～1.15之間為灰區，在灰區內的檢測數據進行復查，根據復查結果進行判斷，如果復查仍然在灰區，擔心標本污染；為了嚴謹，保證結果質量，體現全面質量管理的理念。寫上S/CO值，告訴臨床醫生一定要注意該病人了；模板：“該標本檢測結果為弱陽性，S/CO=*.**，建議結合臨床情況診斷或選擇其他方法做確認試驗。”不同項目也有不同的描述，如果是有診斷意義的指標，備注后面可以說明定期復查，建議一個月后復查之類的。 門診患者，一是向患者說明，重抽標本復查。二是，如果患者不愿意重新采血復查，應在檢驗報告單上說明三個月后或定期復查。

3.3、科室根據ISO15189 [6]的有關規定，制定了SOP文件，寫清楚了3.1的內容和復查操作規定。

綜上所述，按照執行這些方法和文件，讓我們在灰區出現時能夠正確處理；近兩年來，我們按照科室制定的制度執行操作，沒有在灰區的問題上出現誤差和失誤。

參考文獻

[1] Kearney H， Schneider T， Yiannakas MC， Altmann DR，Wheeler-Kingshott CA， Ciccarelli O， Miller DH.J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2014 Aug 5. pii： jnnp-2014-308241. doi： 10.1136/jnnp-2014-308241.

[2] Riera R， Becerro MA， Stuart-Smith RD， Delgado JD， Edgar GJ.Mar Pollut Bull. 2014 Aug 1. pii： S0025-326X（14）00450-0. doi： 10.1016/j.marpolbul.2014.07.014.

[3] Castellano G， Manzano ML.Gastroenterol Hepatol. 2014 Jul；37 Suppl 2：15-21. doi： 10.1016/S0210-5705（14）70064-0. Spanish.

[4] Leucht S， Helfer B， Hartung B.Cochrane Database Syst Rev. 2014 Jan 15；1：CD002832. doi： 10.1002/14651858.CD002832.pub3. Review.

[5] Hao Q， Shi X， Zhang X， Zhu J.Zhongguo Yi Liao Qi Xie Za Zhi. 2013 Sep；37（5）：373-5， 378. Chinese.