溶菌酶對枯草芽孢桿菌的抑菌活性研究

【摘要】目的：通過對雞蛋清與唾液中的溶菌酶的提取，觀察溶菌酶對枯草芽孢桿菌的抑制性。方法：（1）將雞蛋清分別稀釋成25%、50%、75%和100%，將唾液稀釋成20%、40%、60%的梯度；然后將其置于不同的試管中，并做好標記；（2）將配置好的不同濃度的雞蛋清與唾液按一定的計量注入打好孔的培養(yǎng)基上；（2）將制好的培養(yǎng)基置于37攝氏度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時，然后在小組內(nèi)進行觀察。結(jié)果：通過實驗觀察，（1）濃度為75%的雞蛋清在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)最大，直徑為4cm；濃度為50%的雞蛋清在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)平均為2cm；濃度為25%的雞蛋清出現(xiàn)的抑菌環(huán)大小不等；濃度為100%的雞蛋清在培養(yǎng)基上無抑菌環(huán)出現(xiàn)；（2）濃度為20%的唾液在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)最大，直徑為2cm；濃度為40%的唾液在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)平均為1cm；濃度為60%的唾液出現(xiàn)的抑菌環(huán)大小不等。結(jié)論：溶菌酶的濃度不同，對枯草桿菌的抑制性也不同。

【關(guān)鍵詞】溶菌酶抑菌環(huán)抑制性

【中圖分類號】Q93【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0249-02

溶菌酶又稱胞壁質(zhì)酶或N一乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶，是一種葡萄糖苷酶，它能切斷肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酰之間的β-1，4糖苷鍵，破壞肽聚糖支架，在內(nèi)部滲透壓的作用下使細胞脹裂開，引起細菌裂解，有些革蘭氏陰性菌，如埃希氏大腸桿菌，傷寒沙門氏菌，也會受到溶菌酶的破壞[1]。它具有溶解細菌細胞壁的能力，起到抗菌消炎的作用。溶菌酶為正常機體免疫防御機制的組成部分，具有溶解細菌細胞壁的作用[2]。在人體內(nèi)，它存在于中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞內(nèi)；也存在于黏膜分泌液中，成為體表防御因素之一。正常人尿中無溶菌酶。某些疾病患者血清或體液內(nèi)的溶菌酶活性值有顯著差別，故測定溶菌酶活性日益受到臨床重視。因此，本研究就此開展了相關(guān)工作。

1材料與方法

1.1材料

雞蛋兩顆、試管若干個、棉簽、玻璃棒、燒杯、漏斗、打孔管若干、普通瓊脂培養(yǎng)基10個、生理鹽水、刻度尺、量筒、移液器；

1.2方法

（1）接種枯草芽孢桿菌于LB液體試管中，30度搖床過夜培養(yǎng)，第二天將培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)液均勻涂布于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上，然后用無菌打孔管在每個培養(yǎng)基里面打四個孔；

（2）用生理鹽水將雞蛋清分別配制成濃度為100%、75%、50%、25%的溶液[3]；唾液稀釋成濃度為20%、40%、60%的溶液；并將其置于試管中再做好標記；

（3）用移液器將配置好的溶液從試管中移入相應(yīng)的培養(yǎng)基中已打的孔中，在培養(yǎng)基上做好標記后放入37攝氏度的培養(yǎng)箱中，18小時后觀察實驗結(jié)果。

2.結(jié)果

通過實驗觀察，（1）濃度為75%的雞蛋清在培養(yǎng)基上形成的抑菌圈最大，直徑為4cm；濃度為50%的雞蛋清在培養(yǎng)基上形成的抑菌圈平均為2cm；濃度為25%的雞蛋清出現(xiàn)的抑菌環(huán)大小不等；濃度為100%的雞蛋清在培養(yǎng)基上無抑菌環(huán)出現(xiàn)；（2）濃度為20%的唾液在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)最大，直徑為2cm；濃度為40%的唾液在培養(yǎng)基上形成的抑菌環(huán)平均為1cm；濃度為60%的唾液出現(xiàn)的抑菌環(huán)大小不等。結(jié)果顯示如下：

【討論】

溶菌酶為正常機體免疫防御機制的組成部分，具有溶解細菌細胞壁的作用[4]。在人體內(nèi)，它存在于中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞內(nèi)；也存在于黏膜分泌液中，成為體表防御因素之一。正常人尿中無溶菌酶。某些疾病患者血清或體液內(nèi)的溶菌酶活性值有顯著差別，故測定溶菌酶活性日益受到臨床重視。

參考文獻

[1]孫占田.蛋清中的溶菌酶[J].國外畜牧科技，1999，（6）1.

[2]葉丹，連賓.溶菌酶及其應(yīng)用[J].貴州科學，2003，（3）2.

[3]楊因平.用蛋殼提取溶菌酶[J].化學世界，1991，（8）11：22-23.

[4]張鳳凱，馬美湖.溶菌酶及其食品保鮮劑的應(yīng)用[J].肉類研究，2001，（4）3：32-34.