ABO和RhD血型定型試劑的穩定性觀察

【摘要】目的：正確使用血型定型試劑，避免因試劑穩定性問題造成差錯的發生。方法：將抗-A、抗-B和RhD血型定型試劑分別成批滴加在血型檢測卡上，放置在實驗室普通室溫條件下一定的時間后，測定反應親和力，以凝集時間表示。結果：新開瓶ABO、RhD試劑分別暴露放置2.0h、45min內親和力無明顯變化；ABO、RhD試劑開瓶放置8小時后，分別暴露放置60min內親和力均無明顯變化；ABO、RhD試劑室溫放置5天后，分別暴露放置45min、30min內親和力無明顯變化；ABO、RhD試劑室溫放置10天后，分別暴露放置45min、20min內親和力無明顯變化；

【關鍵詞】ABO血型系統；血型鑒定；凝集反應

【中圖分類號】R722.12【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0170-01

ABO和RhD血型鑒定是臨床常規檢驗項目，是輸血病人必須檢測的項目。血型鑒定直接關系到臨床輸血的安全[1]。并且血型已列入身份證識別信息，也是能影響社會安定與執法的因素。正定型玻片法[2]鑒定血型是臨床檢驗中最廣泛采用的基本檢測方法。為了提高工作效率，臨床工作中，血型多為批量操作，即把抗-A、抗-B和RhD試劑預先成批滴加在血型檢測卡上，當有新標本時，還用余下份數檢測，由于室溫放置的時間不確定，結果是否可靠性就尤為關鍵。為正確使用血型定型試劑，避免誤報血型，筆者將抗-A、抗-B和RhD血型試劑成批滴加在血型檢測卡上，在實驗室普通室溫條件下放置一定等時間后，測定反應親和力，現報道如下。

材料與方法

1、材料 1）5%A、B、O型紅細胞[2]：取自我科健康體檢人群（年齡在20-45歲之間，血常規紅細胞、白細胞、血小板三系均正常）各9人，分別將其中3人按1：1：1的比例同型混合，用生理鹽水洗滌3遍，以生理鹽水配成5%紅細胞懸液。共分別得到3份5%A、B、O型紅細胞懸液。2）ABO血型試劑，上海血液，批號為：20130815；效期為：20150819，有國家生產批準文號和批批檢定合格證書；RhD試劑：批號為：20130802；效期為：20150801，有國家生產批準文號。3）離心機：白洋離心機。4）檢測環境：溫度：22℃，相對濕度35%。

2.方法將抗-A、抗-B和抗-RhD血型定型試劑成批滴加在血型檢測卡上，按0min、5min、10min、20min、30min、45min、60min、1.5h、2.0h等時間，分別滴加5%的紅細胞懸液，用竹簽涂開，呈10mm直徑面積，立即搖勻，并啟動計時，以出現1mm2大小凝集顆粒時的時間（s）來表示親和力。每個標本連續測定3次，其均值代表標本親和力，將每個血型的三個親和力結果進行統計學處理，結果見表一；將試劑開瓶室溫下放置8小時后，再按同樣的方法試驗，結果見表二；將開瓶室溫下放置8小時后的試劑再蓋好瓶蓋，室溫放置整5天后，再按同樣的方法試驗，結果見表三；將此試劑再室溫放置至整10天后，再按同樣的方法試驗，結果見表四。每組數以SPSSStatistics17.0統計學軟件用單因素方差分析進行統計。

討論

單克隆ABO和RhD血型定型試劑與紅細胞反應，具有較高的敏感性和特異性，廣泛應用于臨床。

在臨床實際工作中，血型多為批量操作，時有試劑滴加份數多于標本數的情況發生，但不忍浪費，當有新標本時，還用余下份數檢測，結果是否可靠性就尤為關鍵。

血型定型試劑在原包裝瓶內，保存期間的性能改變，亦有文章報道[3]。但在正定型玻片法血型檢測中，試劑滴加在檢測卡上后，其穩定性發生改變，國內報道較少[4]。

本次試驗以表一結果代表新開瓶試劑的親和力，以表二、表三和表四結果代表試劑在使用過程中反復開瓶和在溫度下加蓋放置的情況下，親和力發生的變化。

由表一數據可以看出，新開瓶試劑，直接暴露于室溫環境下，ABO試劑親和力可穩定至2.0h，RhD試劑可穩定至45min。

由表二數據可以看出，開瓶置于室溫環境下8小時后，ABO試劑檢測親和力縮短至1.5h。

由表三數據可以看出，經開瓶放置8小時后的試劑，又加蓋室溫放置5天，ABO試劑親和力縮短至45min，RhD親和力縮短至30min。

由表四數據可以看出，經開瓶放置8小時后的試劑，又加蓋室溫放置10天，ABO試劑親和力縮短至45min，RhD親和力縮短至20min。

顯然，室溫放置對血型試劑的穩定性影響很大。對于標本量大的單位，一支試劑在短時間（如5日）內用完的前提下，而且在30min時間內完成試驗的前提下，試劑本身的穩定性可以保證試劑使用時的可靠性。但是對于標本量小的單位，長時間（如10日）內用不完的情況，必須要注意試劑的保存，并在使用過程中減少試劑暴露于空氣中的時間，不能超過20min，否則，結果的可靠性難以得不到保證。

綜上所述，為確保血型結果可靠性，合理保存試劑；檢測時，血型試劑應做到隨做隨加。

參考文獻

[1]樹銘.輸血安全與檢驗醫學[J].國外醫學臨床生物化學與檢驗學分冊，2003，24（2）：63.

[2]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：246—251.

[3]楊福軍，張蘭香，徐蓉.國產人ABO血型定型試劑穩定性觀察[J].微生物學免疫學進展，2000，28（3）：55—57.

[4]王平，洪流，羅月明.ABO和RhD血型定型試劑滴加在白瓷板后的穩定性觀察[J].國際檢驗醫學雜志，2009，3O（6）：589—591.