分子病理檢查的規范化問題及建議

【摘要】分子病理是近年臨床診斷的重要手段之一。分子病理診斷的應用領域十分廣泛，主要包括腫瘤分子分型，遺傳疾病的相關診斷，感染性疾病的相關病原體檢測以及基因相關的檢測等領域。[1]而近年來，在臨床分子病理檢查中，因操作出現的問題屢見不鮮，所以對于分子病診斷的操作上出現的問題應該引起醫療機構足夠的認識，并希望醫療機構可以規范分子病理檢查的操作。

【關鍵詞】分子病理檢查；規范化；建議

【中圖分類號】R722.12【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0705-01

1分子病理診斷

1.1分子病理學的介紹

分子病理學是一種分支學科，在上世紀的七十年代，由分子生物學和疾病細胞生物學，兩種學科在發展中相互滲透而形成的一種分支學科，所以在某種意義上說這種學科具有分子生物學和疾病細胞生物學的優點。我國在上世紀八十年代就開始開設分子病理診斷在醫療上的應用，如今分子病理診斷已經在醫療的各個領域得到了較為廣泛的應用，但是分子病理診斷在實際的診斷過程中，對操作設備的要求很高，因而不是在一些設備不齊全或者是設備落后的醫療機構，就會發生診斷后出現錯誤診斷結果現象。

1.2分子病理診斷的重要性

分子病理診斷是從細胞內部的分子來分析患者的疾病。現在的分子病理診斷多用于基因類疾病和癌癥類疾病，分子病理學主要的研究對象是分子，因此在癌癥和基因等方面的診斷有較為突出的應用。在癌癥的治療上也有較為突出的應用，主要的應用是利用分子進行定位的治療方式，可以使相應的藥物作用于指定的靶細胞。這種診斷在遺傳病患者和癌癥患者的診斷過程中十分重要，不僅可以在較短的時間內查出患病的原因，還可以通過分子的診斷找出一種治療的方法。所以分子病理診斷在醫療機構的診斷過程中具有重要作用。

分子病檢測有常見的六種方法，分別是染色體的顯色原位雜交，PCR技術，熒光原位雜交，基因芯片，熒光定量PCR技術以及DNA測序技術等。[3]下面筆者就來簡要的介紹其中的幾種技術。

1.3、PCR技術

PCR技術也叫做聚合酶鏈式反應，這是一種檢測DNA變異方法。聚合酶鏈式反應在一定程度上是一種體外的DNA合成技術，通過一種特殊的聚合酶的催化作用下，對指定的DNA序列經過高溫變性、低溫退火、室溫延伸這三步，進行DNA序列的復制，但是這只是聚合酶鏈式反應的最為重要的一部分，并不是全部。在這之后要對復制的分子進行相關的處理，如凝膠電泳、測序等。所以這種技術可以復制基因片段上的DNA序列，也可以用來檢測患者病變部分的DNA序列，還可以用來檢測患者的患病位置中的細胞是否含有有毒DNA序列，此外這項技術也是基因突變技術檢測的前期準備技術。

1.4、染色體的顯色原位雜交技術

這種技術也是有幾種技術的發展滲透而延伸的一種新技術，它主要由組織化學、細胞學和分子生物學發展而來。這種雜交技術利用的原理是核酸間的堿基互補配對原則。通過對待測的核酸序列進行相應的標記，然后在相應的聚合酶進行催化使得待測的核酸序列進行堿基互補配對，形成一條完整的核酸序列，最后通過相應的試劑使得這些被標記的核酸在相應的組織、細胞或染色體上顯示出來。這種技術可以分為DNA原位雜交雜交技術和RNA原位雜交技術，這兩種技術的應用范圍不一樣，DNA雜交技術主要是在基因定位和檢測，而RNA分子雜交技術主要是用于基因的檢測或基因表達問題上的檢測。這種技術的應用十分廣泛，可以應用于親子鑒定，DNA分子對比等方面。此外這種技術的應用特點有：操作簡單；目的性強，可以直接對患者的組織進行點位；信號穩定，便于分子顯色檢測；操作成本低；對相關的分子容易存儲等。從總的來說這種技術不僅操作上簡單不復雜，而且是患者在檢查時容易接受的一種臨床檢查方式。

1.5、DNA測序

DNA測序也是分子病理檢測中常使用的技術手段之一。常見的測序有兩種，一種是直接使用對分子進行測序，另一種是焦磷酸測序技術。直接測序法，是使用相應的沒將核苷酸序列上的隨機的一個起始點開始進行終止，使測試的序列分成不同長度的核酸序列，最后對得到的核苷酸進行電泳檢測，就可以得到相應的DNA序列。但是這種測序方式在一定程度上的靈敏度不夠高，測序時間長，步驟多，在造作過程中不容易控制；而優點是測序結果準確性高，重復性較好等。焦磷酸測序技術是一種新型的測試法，在原理上上是利用聯合酶的方式進行測試。在檢測結果上可以與直接檢測法相媲美，而且在檢測速度上更快。因此對于已知的核苷酸序列的檢測通常就是使用這種方法。

2分子病理檢測中規范化問題及建議

2.1醫療機構的設備問題

對于一些醫療機構而言，一套完善的分子病理檢測設備是一個天文數字，而對于上世紀就已經出現的診斷手法，如果一個醫療機構都不具備，那么在很大程度上就會使得一所醫療機構在患者就診這方面存在問題。但是在實際生活中很多醫療機構的設備問題上是存在很大的問題，不少的地方政府對醫療機構的相關設備問題不給予重視，因而使得一些醫療機構在設備存在不足，對于使用這些設備的專業人員更是缺乏。所以對于這一類情況從相關的醫療管理部門下手，對于一些取得使用分子病理檢測的醫療機構需要定期對該醫療機構的設備進行檢測，對操作人員進行考核，這樣可以減少一些醫療機構濫用或不正規使用分子病理檢測，也可以在一定程度上減少一些意外情況的出現。

2.2、分子病理診斷相關業務人員的素質問題

分子病理診斷是一種應用較為廣泛的現代化診斷手段。因此對于相關的業務員存在以下的素質問題，如隨意開價、夸大應用范圍、欺騙患者等。對于分子病理診斷的應用雖然是范圍廣、應用領域大，但是并不是所有的病，都可以使用分子病理去分析。對于以上的幾種業務素質問題，主要是百姓不了解分子病理的應用范圍，以及分子病理診斷的操作流程，此外有些人希望可以快速得到鑒定的結果或診斷結果等，都可能使業務員出現一些違規的做法等。對于一個業務人員，應該秉承誠實守信的信念來幫助患者，對患者的一些業務咨詢，不要信口開河，不要隨意夸大分子病理檢測的功能及作用，畢竟人類的科學水平還是有一定的限度，現在還是有很多無知的領域，即使對一個已經發展成熟的領域，也還是有很多未知的東西存在，所以對于業務員，希望可以遵守職業道德，保持一個業務員基本的素質。

2.3、分子病理檢測操作人員的工作嚴謹性問題

對于相關的操作人員來說，工作的嚴謹性十分重要。分子病理的應用十分廣泛，在醫療領域中扮演這一個重要的角色，很多的診斷結果、鑒定結果都將與分子病理檢測的結果有著直接的關系。相對來說，影響分子病理檢測結果的因素主要是操作人員工作過程的嚴謹性問題。如操作員的操作過程中出現一些失誤就可能會嚴重到最后檢測的結果，如核酸的標記問題，對于核酸的標記不是通過將核酸放置在含有特殊磷元素就可以使得核酸內的磷元素被替換成特殊的磷元素，而是要在細菌體內進行相應的替換工作等，諸如此類的簡單操作。因此概括來說，操作員的嚴謹性問題，主要體現在，容易忽視一些細節、操作過程的生疏、相關試劑的使用、操作時間的控制、溫度的控制、嚴格進行室內質控及室間質控等。這些問題都會影響到分子病理檢測的結果，所以說操作員的嚴謹性操作十分重要。

2.4、分子病理檢測中的建議

在分子病理檢測的過程中，存在著很多問題，如上述中提到的設備問題，操作員問題，業務員的問題。對于這些問題的存在，筆者在這里簡要的談一下自己的看法，首先醫療結構在接受分子病理業務前，必須具備有專業技術過硬的操作員，完善的儀器和設備；再就是對管理層的要求，管理層必須完善的管理制度，主要是對操作員和業務員的管理，如獎勵制度，操作員操作的規范性，業務員介紹推廣業務的專業性等；最后是對分子病理檢測操作員和業務員的績效的考核制度，這是一項容易導致他們犯錯的地方，因此在考核的標準要結合實際，可以避免一些不必要的虛假操作的發生。

3結語

本文不僅介紹了分子病理診斷產生，還簡要的較少了分子病理在臨床診斷過程中常用的幾種技術，最后對分子病理檢測操作員操作的嚴謹性問題做出了簡要的說明。通過這些介紹可以發現分子病理診斷的應用領域將會越來越廣泛，同時對專業人士的要求也會越來越高。

參考文獻

[1]王建東，周曉軍.分子病理檢查的規范化問題及建議[J].臨床與實驗病理學雜志.2012-01-28

[2]張品南，馮國飛，陳艷梅，黃益.臨床分子病理檢查的發展與展望[J].醫院管理論壇.2014-01-15

[3]楊舉倫，王麗，潘鑫艷，黎貴蕓.分子病理診斷的現狀與思考[J].診斷病理學雜志.2014-06-28