BIRC5和Twist在腎透明細胞癌中的表達及意義

【摘要】目的：本研究觀察存活蛋白BIRC5（survivin）、Twist在腎透明細胞癌組織中的表達情況，并探討BIRC5及Twist在腎透明細胞癌中的表達的臨床意義和二者表達的關系。方法：收集60塊腎透明細胞癌的組織蠟塊及選取20例正常癌旁組織作為對照，采用免疫組化S-P法檢測60例腎透明細胞癌組織及20例正常腎組織中BIRC5、Twist的表達水平，并分析兩者表達的相關性。結果：1.BIRC5主要表達在腫瘤細胞的胞漿及胞膜，在腎透明細胞組織中，BIRC5表達陽性率為80%，在正常腎組織中均未見BIRC5表達，兩者差別具有統計學意義（P <0.05）。2.Twist 蛋白同樣表達于腫瘤細胞的胞漿及胞膜，在腎透明細胞癌組織中，表達陽性率為62%，在對照組中陽性表達率為5 %，兩者比較有統計學意義（P <0.05）。3.在腎透明細胞癌中，BIRC5的表達與Twist的表達呈正相關（r=0.579 P <0.05）。結論：聯合檢測BIRC5、 Twist可對腎癌的惡性程度的判定及浸潤轉移能力的評估，可共同作為判斷預后的標志物。

【關鍵詞】腎癌；BIRC5；Twist蛋白；免疫組織化學；診斷

【中圖分類號】R722.12 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0122-02

腎透明細胞癌是泌尿系統常見的惡性腫瘤之一，且近年來發病率有提高的趨勢， 腎透明細胞癌早期的癥狀不明顯， 發現時往往已到晚期，鑒于腎透明細胞癌有如此高的發病率，分析研究腎透明細胞癌的發生發展機制及其內在的分子生物學特征，從而尋找有效的檢查及診治手段，對該項疾病做到早期診斷。存活蛋白BIRC5（survivin）屬于凋亡抑制蛋白IAPs（Inhibitor of apoptosis proteins）家族中的一員，在細胞的有絲分裂、胞質分裂和腫瘤發生發展中起重要的作用。 Twist蛋白是螺旋-環-螺旋蛋白家族中的高度保守的轉錄因子，被認為是癌基因蛋白，對于兩者之間的相關性研究報道較少。本實驗采用免疫組化S-P法，檢測BIRC5、Twist在腎癌和正常組織中的表達，探討二者在腎透明細胞癌中的作用及兩者之間的相互關系。

材料和方法

材料：

1.標本：實驗組60例腎癌石蠟標本取自于大連醫科大學附屬第一醫院病理科，由2002年～2010年住院手術所得，經臨床和病理均診斷為腎細胞癌（renal cell carcinoma， RCC），每例臨床資料齊全，所有患者術前均未接受化療、放療或免疫治療。其中男性38例，女性22例，年齡22～75歲，平均53歲；經Fuhrman（1982）腎細胞癌形態分級系統（病理分期），G1期12例，G2期16例，G3期22例，G4期10例。根據UICC（國際抗癌協會）制定的TNM分期（臨床分級）：Ⅰ期9例，Ⅱ期20例，Ⅲ期25例，Ⅳ期6例。其中伴有淋巴結轉移者25例，無淋巴結轉移者35例，選取20例癌旁正常組織作為對照組，

2.主要儀器及試劑：切片機，微波爐，顯微鏡，溫箱等。實驗所用兔抗人BIRC5（購于上海鑫樂公司）、兔抗人Twist（購于武漢愛博泰克公司）均為即用型多克隆抗體。

3.陽性結果判斷：根據雙盲法閱片。BIRC5、Twist染色陽性信號均成棕黃色顆粒，其表達定位于細胞漿。根據染色強度和染色細胞百分率進行綜合評分。

4.統計學方法：運用SPSS15.0軟件進行統計學處理，計數資料采用率表示，不同組間比較χ2檢驗、Fisher精確概率法及Spearman等級相關分析，P <0.05為差異有統計學意義。

結果：

1.BIRC5、Twist在腎癌及正常腎組織中的表達

BIRC5在腎癌組織陽性表達率為 80%（48/60），在對照組中不表達（0/20），兩者比較差異有統計學意義（χ2= 36.74，P <0.05）。Twist在腎癌組織陽性表達率為 62 %（37/60），在對照組中陽性表達率為 5%（1 /20），兩者比較差異有統計學意義（χ2=17.11，P <0.05）。詳見表1

結論：1、BIRC5的陽性表達在腎透明細胞癌組織中和正常腎組織中存在顯著差異，BIRC5與腎透明細胞癌的病理分期有密切相關，而與性別、年齡、臨床分期（TNM）及淋巴轉移均無明顯相關性。2、BIRC5與Twist 在腎透明細胞癌組織中的表達存在相關性（r=0.579 P=0.002）聯合檢測BIRC5、 Twist可對腎癌的惡性程度的判定及浸潤轉移能力的評估，可共同作為判斷預后的標志物。

參考文獻

[1] Parker AS， Kosari F， Lohse CM， et al. High expression levels of survivin protein independently predict a poor outcome for patients who undergo surgery for clear cell renal cell carcinoma [J]. Cancer， 2006， 107（1）37-45

[2] 宮大鑫，何舜發.Survivin在腎癌組織何腎癌細胞系中的表達及意義[J]. 中國醫科大學學報， 2008， 37（1）：116-118

[3] Tamm I， Wang Y， Sausville E， et al. IAP-familyprotein surviving inhibits caspase activity and apoptosis induced by Fas（CD95）， Bax， caspases and anticancer drugs [J]. Cancer Research， 1998， 58（23）：5315-5320

[4] Lens SM， Rodriguez JA， Vader G， et al. Uncoupling the central spindle-associated function of the chromosomal passenger complex from its role at centromeres [J]. Mol Biol Cell， 2006， 17（4）：1897-1909

[5] Chen J， Wu W， Tahir SK， et al. Down-regulation of survivin by antisense oligonucleotides incereases apoptosis， inhibits cytokinesis and anchorage-independent growth [J]. Cancer Reasearch， 1998， 58（23）： 5315-5320

[6] Zampareses R， Pannone G， Santoro A， et al. Survivin expression in renal cell carcinoma[J]. Cancer Invest， 2008， 26（9）：1306-1310