如何用紫外分光光度法測定鹽酸氨溴索口服液的含量

【摘要】鹽酸氨溴索能夠改善肺功能，是新一代的祛痰藥品，2010年版《中國藥典》中記錄，采用高效液相色譜法控制鹽酸氨溴索口服液的含量，其測定結果準確，但由于成本投資較大，檢測的周期長，不適用于基層單位，本文采取紫外分光光度法對鹽酸氨溴索口服液的含量進行測定。

【關鍵詞】紫外分光光度法；鹽酸氨溴索口服液；含量測定

【中圖分類號】R944.4 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2014）10-0124-01

一紫外分光光度法簡介及原理

紫外分光光度法是通過被測物質在紫外光區的特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法，本法在藥品檢驗中主要用于藥品的鑒別、檢查和含量測定。它的原理是物質對紫外輻射的吸收，是由于分子中原子的外層電子躍遷所產生的， 因此，紫外吸收主要決定于分子的電子結構，故紫外光譜又稱電子光譜。有機化合物分子結構中如含有共軛體系、芳香環或發色基團，均可在近紫外區（200-400nm）或可見光區（400-850nm）產生吸收。通常使用的紫外分光光度計的工作波長范圍為190—900nm，因此又稱紫外—可見分光光度計。

二鹽酸氨溴索口服液作用

鹽酸氨溴索是新一代的祛痰藥，具有促進粘液排出、溶解分泌物的特性，能有效改善肺功能為粘液溶解劑，能增加呼吸道黏膜漿液腺的分泌，減少粘液腺分泌，從而降低痰液粘度；還可促進肺表面活性物質的分泌，增加支氣管纖毛運動，使痰液易于咳出。

三采用紫外分光光度法注意事項：

1、試驗中所使用的量瓶、移液管等試驗器具必須經過檢定校正、清洗干凈后方可使用。

2、使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空白溶液的吸收池，當裝入同一溶劑時，在規定波長處測定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配對使用，否則必須加以校正。

3、取吸收池時，手指拿毛玻璃面的兩側。裝盛樣品溶液，以池體積的4/5為度，測定揮發性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無殘留溶劑，為防止溶劑揮發后溶質殘留在池子的透光面，可先用醮有空白溶劑的擦鏡紙擦拭，然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時應注意每次放入方向相同。

使用后用溶劑及水沖洗干凈，晾干防塵保存。吸收池如污染不易洗凈時，可用硫酸，發煙硝酸（3：1V/V）混合液稍加浸泡后，洗凈備用。如用鉻酸鉀清潔液清洗時，吸收池不宜在清潔液中長時間浸泡，否則清潔液中的鉻酸鉀結晶會損壞吸收池的光學表面，并應充分用水沖洗，以防鉻酸鉀吸附于吸收池表面。

4、測定前應先檢查所用的溶劑在測定供試品所用的波長附近是否符合要求，可1cm石英吸收池盛溶劑，以空氣為空白，測定其吸收度。

四材料與方法

1、儀器與試藥

備齊以下測試所需用品：日本島津紫外-可見分光光度計，型號：UV3101；AEU-210型電子天平；鹽酸氨溴索對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100599-200502）；鹽酸氨溴索口服液（哈藥集團制藥總廠，規格為5ml：15mg，批號A1405009）；實驗室制備的超純水；分析純試劑。

2、溶液制備

取9ml濃鹽酸，加入1000ml的純化水，配置出0.1mol？L-1的鹽酸溶液，備用。

用配置好的0.1mol？L-1的鹽酸溶液將經過精密稱取的15.62mg鹽酸氨溴索稀釋為0.16mg，即對照品儲備液。

用0.1mol？L-1的鹽酸溶液與適量的對照品儲備液稀釋成每毫升含量為15.6μg的溶液，即對照品溶液。

將5ml樣品放置100ml量瓶中，加入0.1mol？L-1的鹽酸溶液至刻度，搖勻后，量取5ml溶液至50ml的量瓶中，繼續加入0.1mol？L-1的鹽酸溶液至刻度，搖勻后，即樣品溶液。

3、測定方法

（1）測定波長的確定

方法一，按照《中國藥典》2010年版（二部）附錄IVA中紫外—可見分光光度法進行測定，取對照品溶液和樣品溶液在244nm波長處進行吸光度測定。方法二，可精密稱取鹽酸氨溴索口服液，加入適量0.1mol？L-1的鹽酸溶液配置成20μg？ mL- 1溶液，搖勻后，于波長200～400nm處進行掃描，結果顯示在244nm波長處有最大吸收，用輔料進行相同試驗，輔料在此波長處無吸收，選用244nm為測定波長。

（2）線性關系

精密稱取本品50. 0mg于100mL量瓶中，用0. 1mol？L- 1鹽酸溶液溶解定容。分別取上述500μg？mL- 1的藥物貯備液適量，加0. 1mol？L- 1鹽酸溶液稀釋成30、25、20、15、10和5μg？mL- 1的藥物溶液。以 0. 1mol？L- 1鹽酸溶液為空白，于244nm處分別測定吸收度。

（3）回收率試驗

分別精密稱取低、中、高 3種劑量的鹽酸氨溴索對照品，加入處方量的輔料100mL量瓶中，加 0.1mol？L- 1鹽酸稀釋至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液5mL置50mL量瓶中，加0. 1mol？ L- 1鹽酸稀釋至刻度，照分光光度法于波長244nm的波長處分別測定吸收度，代入標準曲線計算回收率。

（4）精密度試驗

精密量取對照品儲備溶液 5ml 置 50ml 量瓶中，用 0.1mol？L-1鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，測定6次，測定結果RSD為 0.2%，表明該試驗具有良好的精密度。

（5）穩定性試驗

精密量取樣品溶液（批號：A1405009）5ml置50ml量瓶中，用0.1mol？L-1鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，分別在1、3、6、9、12、15h，進行吸光度測定，測定結果RSD為0.4%，數據表明溶液在15h內是穩定的。

（6）樣品測定

取本品3mL，置100mL量瓶中，加0. 1mol？L- 1鹽酸稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液 5mL，置50mL量瓶中，加0. 1mol？L- 1鹽酸稀釋至刻度，搖勻；另取經120℃干燥至恒重的藥物對照品，精密稱取適量，加0. 1mol？L- 1鹽酸制成每1mL中約含22. 5μg的溶液。取上述二溶液，照分光光度法（中國藥典2005年版二部附錄ⅣA），分別在244nm的波長處測定吸收度，根據二者吸收度比值計算，即得。供試品含量測定結果為99. 7%。

（7）重復性試驗

精密量取樣品溶液（批號：A1405009）5ml 各5份，分別置50ml量瓶中，用0.1mol？L-1鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，測定吸光度，平均含量為99.9%，RSD 為 0.3%。試驗結果表明本方法重復性好。

（8）回收率試驗

采用空白加標的方法進行回收率測定。精密稱取鹽酸氨溴索對照品12、15、18mg各3份，分別置100ml量瓶中，同時分別加入處方比例量空白輔料，用0.1mol？L-1鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，精密量取5ml置50ml量瓶中，用0.1mol？L-1鹽酸溶液定容至刻度，搖勻，測定吸光度，計算回收率。

（9）含量測定

精密移取鹽酸氨溴索口服液5ml，配制樣品溶液，測定吸光度，計算含量，結果批號A1405009標示量為 99.8%。

總結：高效液相色譜法控制鹽酸氨溴索口服液的含量，成本高，投入大，不適用基層單位，本次試驗采取紫外分光光度法測定鹽酸氨溴索口服液含量，結果表明，此方法易于操作，并且周期短，結果準確，重現性好，利于對藥品的檢測，具有巨大的應用價值。

參考文獻

[1]楊靜，宋超.鹽酸氨溴索的臨床合理使用[J].中國藥房，2012，23（28）：2683

[2]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典[S].北京：中國醫藥出版社，2010：766