CPG－ODN對哮喘小鼠KL－6表達的影響

黃維琳，孫 亭，唐曉偉，黃九龍，汪浩然，裴文俊

(1.安徽中醫(yī)藥高等專科學校;2.蕪湖市第一人民醫(yī)院，安徽 蕪湖 241000)

氣道炎細胞浸潤是支氣管哮喘的主要特征，免疫反應(yīng)在哮喘的發(fā)病機制中占有重要地位。CpGODN是指一段寡核苷酸序列，其中含有未甲基化的CpG二核苷酸，具有強烈的免疫刺激作用，類似細菌DNA。許多資料證明，CpG－ODN對哮喘動物模型具有預(yù)防和治療作用。KL－6(Krebs Von den Lungen－6)是一種勃液素樣的大分子糖蛋白，研究顯示血清KL－6可反映肺泡Ⅱ型上皮細胞損傷、再生程度，可能成為支氣管哮喘的早期診斷的指標［1］。本研究以哮喘小鼠為研究對象，觀察CpG－ODN刺激對哮喘小鼠后KL－6的表達，探討CpG－ODN是否能降低支氣管哮喘小鼠氣道的KL－6表達，從而減輕喘小鼠肺泡Ⅱ型上皮細胞損傷，探討其可能的發(fā)生機制。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 卵白蛋白、氫氧化鋁購自合肥智陽生物科技有限責任公司。全鏈硫代修飾的人工合成的CpG－ODN，序列為5/－TCCATGACGTTCCTGATGCT－3/，購自Takara公司，KL－6 ELISA試劑盒購自Binding Site公司。

1.2 小鼠哮喘模型的建立 以卵蛋白 (OVA)作為抗原進行致敏和激發(fā)，建立小鼠哮喘模型。將小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，第1、4、7天分別將含0.01%卵蛋白 (OVA)和2%氫氧化鋁各0.1ml注射腹腔，重復一周后第14天將小鼠逐個放入自制的密閉容器中，體積約4L，噴入1%OVA20ml進行霧化激發(fā)再次致敏30分鐘，連續(xù)一周，當小鼠出現(xiàn)明顯噴嚏、鼻部潮濕、煩躁、激惹等呼吸道癥狀為造模成功。

1.3 實驗動物分組及處理 清潔級ICR小鼠50只，體重30±2g，雌雄各半，購自南京青龍山實驗動物中心。小鼠隨機分為哮喘模型組、CpGODN高、低劑量組、地塞米松治療組、空白對照組，每組10只小鼠。……