結(jié)腸癌患者血清己糖激酶活性變化及其臨床意義

【摘要】 目的 分析結(jié)腸癌患者血清己糖激酶（HK）的活性變化，探討HK與結(jié)腸癌病理類(lèi)型、淋巴轉(zhuǎn)移、臨床治療、年齡及性別等的關(guān)系。 方法 利用酶聯(lián)免疫吸附方法，分別檢測(cè)對(duì)89例結(jié)腸癌患者和40例體檢健康人群進(jìn)行血清己糖激酶（HK）活性。 結(jié)果 結(jié)腸癌患者血清HK活性明顯高于正常對(duì)照組（P<0.01），其中淋巴轉(zhuǎn)移與綜合治療前患者的血清HK活性顯著升高（P<0.01），但不同病理類(lèi)型、年齡與性別之間的HK活性沒(méi)有顯著差異。 結(jié)論 結(jié)腸癌患者體內(nèi)糖酵解反應(yīng)較為活躍，血清HK活性檢測(cè)或?qū)Y(jié)腸癌的臨床評(píng)價(jià)及診斷有重要作用。

【關(guān)鍵詞】 己糖激酶；結(jié)腸癌；血清

結(jié)腸癌是一種高發(fā)病率的惡性腫瘤，其發(fā)病可能與生活方式、遺傳和炎性病變等有關(guān)，但確切的原因不清。隨著腫瘤能量代謝研究的深入，已經(jīng)證明腫瘤細(xì)胞的能量主要來(lái)自于糖酵解，肝癌、乳腺癌和前列腺癌等多種腫瘤細(xì)胞和組織的糖酵解十分活躍，糖酵解限速酶多呈現(xiàn)高表達(dá)和高活性，糖酵解反應(yīng)顯著增強(qiáng)[1]。己糖激酶（Hexokinase，HK，EC 2.7.1.1）作為糖酵解反應(yīng)的第一個(gè)限速酶，催化葡萄糖轉(zhuǎn)變成6-磷酸葡萄糖，在調(diào)控糖酵解整體反應(yīng)中起著重要作用。現(xiàn)有的研究表明，結(jié)腸癌組織和細(xì)胞中HK的表達(dá)，特別是HK同工酶的表達(dá)異常增強(qiáng)，活性也明顯升高[2-3]，但結(jié)腸癌腫瘤患者血清中HK的狀況如何尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本文通過(guò)檢測(cè)結(jié)腸癌患者血清HK的活性，從臨床血清學(xué)角度進(jìn)一步研究HK活性與結(jié)腸癌的關(guān)系，并探索其在結(jié)腸癌臨床診斷和治療中的意義。

1 資料和方法

1.1 一般資料 正常對(duì)照組40例為健康體檢人員，中位年齡26歲。結(jié)腸癌組89例，結(jié)腸癌的診斷均經(jīng)病理學(xué)確認(rèn)，其中男性54例，女性35例，年齡范圍27-86歲，中位年齡57歲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 標(biāo)本采集要求受檢者受檢前1d素食，空腹8-12h后于清晨取血，送檢血清在3h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)方法采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。HK試劑盒購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司（20111201B型人己糖激酶試劑），測(cè)定用酶標(biāo)儀為奧斯邦公司ELX-800型，采用450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣本濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（χ ±s）表示，利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 結(jié)腸癌患者與正常人血清HK活性的比較 表1的數(shù)據(jù)表明，與正常人相比，結(jié)腸癌患者血清中HK活性有明顯增高，與正常體檢人員比較具有顯著性差異（P<0.01）。

2.2 血清HK活性與結(jié)腸癌臨床相關(guān)參數(shù)的關(guān)系 表2的結(jié)果表明，結(jié)腸癌患者血清中HK活性在性別、年齡和不同病理類(lèi)型之間均無(wú)顯著性差異（P>0.05），但在淋巴轉(zhuǎn)移與無(wú)轉(zhuǎn)移組之間（P<0.01）、手術(shù)等綜合治療前后之間（P<0.05）的比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3 討 論

糖酵解是指在無(wú)氧或供氧不足的條件下，將糖分解成乳酸的過(guò)程。正常情況下，機(jī)體大多數(shù)組織細(xì)胞主要依賴(lài)糖的有氧氧化而非糖酵解供能。但在腫瘤細(xì)胞，即使是在供氧充足條件下，能量也主要來(lái)源于糖酵解，腫瘤細(xì)胞的糖酵解反應(yīng)相當(dāng)活躍和高效，這種現(xiàn)象被稱(chēng)為Warburg效應(yīng)[4]。Warburg效應(yīng)是繼腫瘤自我增殖能力等六大顯著特征之后的所發(fā)現(xiàn)的第七大特征。Warburg效應(yīng)的發(fā)生機(jī)制不清，目前認(rèn)為可能與HK等糖酵解限速酶的異常表達(dá)等因素有關(guān)。

HK是調(diào)控糖酵解反應(yīng)速度的重要限速酶之一，其活性變化與表達(dá)狀況直接影響著糖酵解的效能和終產(chǎn)物乳酸的生成。已經(jīng)證實(shí)，HK的含量在肝癌、肺癌、腎癌、胃腸及乳腺癌等惡性腫瘤組織中明顯增高，當(dāng)病灶發(fā)生轉(zhuǎn)移時(shí)會(huì)更高[5]，HK在腫瘤細(xì)胞中的高表達(dá)可加速糖代謝，繼而為腫瘤細(xì)胞提供能量，促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成，抑制細(xì)胞的凋亡，還可使線(xiàn)粒體反饋抑制機(jī)制的敏感性下降[6]，同時(shí)，HK的增高還可以導(dǎo)致乳酸增多，乳酸所引起的腫瘤酸化的微環(huán)境，一方面保護(hù)了腫瘤細(xì)胞逃避宿主免疫殺傷，減輕化療藥物作用，另一方面為腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移做好準(zhǔn)備，從而促進(jìn)了腫瘤生長(zhǎng)[7]。

腫瘤患者血清HK的研究顯示，卵巢癌患者血清HK活性明顯升高，并且在臨床各期中都處于高水平，乳腺癌病人的血清HK也表明，惡性病變的HK活性顯著高于良性病變者[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，結(jié)腸癌患者血清HK活性明顯增高，與上述二種腫瘤的血清學(xué)改變一致，這顯然與結(jié)腸癌組織和細(xì)胞的HK高表達(dá)有關(guān)。另外，結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移病人HK的高活性和治療后HK的活性下降，也提示HK或可作為一個(gè)重要的血清學(xué)指標(biāo)，在評(píng)價(jià)結(jié)腸癌臨床綜合治療效果及診斷等方面起重要作用。

由于HK有HKⅠ-Ⅳ四種同工酶，其中HKⅡ具有組織特異性和催化結(jié)構(gòu)的特殊性，在多種腫瘤中具有高表達(dá)，催化效率也高出HKⅠ/HKⅢ 1倍以上[9]，所以，進(jìn)一步研究血清HK各同工酶與結(jié)腸癌等腫瘤的關(guān)系，將更有利于從臨床上探索腫瘤的防治和早期診斷。

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