兩種常用方法檢測HBsAg室間質評樣本的結果分析

【摘要】 目的 比較膠體金免疫層析試驗（GICA）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測HBsAg的效果，減少漏檢或誤診，為臨床選擇一種檢測乙型肝炎病毒（HBV）經濟、快速、準確、敏感的方法。 方法 分別用基層醫院實驗室常用的兩種方法檢測75份云南省室間質評血清標本中的HBsAg，并對測定結果進行比較分析。 結果 兩種方法檢測HBsAg陽性符合率差異有統計學意義（P<0.05），ELISA法的陽性符合率和靈敏度高于GICA法。 結論 ELISA法檢測乙肝病毒標志物的陽性符合率和靈敏度高，具有較高的臨床應用價值，適用于大批量人群抗原抗體篩查等，但操作步驟多，測定結果相對較慢；而膠體金免疫層析試驗（GICA）操作簡單、方便、快速、可單份檢測，適用于急診和標本量較少的基層醫院，但其檢測結果不能作為診斷機體是否感染乙型肝炎病毒的唯一依據，如需確診，需采用ELISA法等其他方法進一步檢測。

【關鍵詞】 乙肝表面抗原；膠體金免疫層析試驗；酶聯免疫吸附試驗；結果分析

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.010 文章編號：1004-7484（2014）-03-1210-01

人感染乙型肝炎病毒（HBV）后，會引起廣泛的急、慢性肝臟疾病，其流行病學研究表明乙肝病毒與肝細胞癌、肝硬化的發生有密切關系。其實驗結果對乙型肝炎的早診斷、早治療及其預防具有十分重要的意義。HBsAg是HBV感染后產生的標志物。但是，由于檢測試劑的靈敏度、特異性差異，導致不同方法檢測HBsAg時存在部分檢測結果不同的現象，特別是部分HBsAg滴度表達較低的標本，造成一定程度的誤診和漏診，甚至引發醫患矛盾或醫療糾紛。作者用目前國內基層醫院常用的兩種檢測方法對收集的室間質評免疫標志物標本進行測定HBsAg，并對結果進行分析比較，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 標本來源 收集我院2008年第一次——2013年第二次參加云南省室間質評免疫標志物檢測的血清標本75份。每次收到血清標本嚴格按要求低溫冰箱保存，按測定時間同時用兩種方法檢測標本，檢測時標本無黃疸、脂血、溶血等現象。

1.2 試劑和儀器 ①試劑：GICA試紙條由國內某知明公司生產提供，ELISA試劑盒由國內某知明公司生產提供。②儀器：上海科華實驗系統有限公司生產的ST-360酶標儀和ST-36W洗板機。

1.3 方法 將標本復溶后，分別以GICA試紙條、ELISA試劑盒檢測技術平行檢測HBsAg，實驗操作均嚴格按試劑盒說明書進行。

1.4 方法學陽性結果判斷 GICA法：試紙條在檢測線和對照線位置出現兩條紫紅色線結果為陽性；ELISA法：樣本OD值S/COV≥1.0者為HBsAg陽性，樣本OD值S/COV<1.0者為HBsAg陰性。

1.5 統計學方法 采用SPSS13.0統計軟件進行分析，組間比較采用x2檢驗，P<0.05為有統計學意義。

2 結 果

2.1 HBsAg陽性率的比較，采用膠體金免疫層析試驗、酶聯免疫吸附試驗對75例室間質評樣本進行乙肝表面抗原檢測，結果顯示，我院參加的室間質評HBsAg檢測：ELISA法陽性符合率為100%，陰性符合率為100%，膠體法的陽性符合率為80.9%，陰性符合率為80.5%，兩組間比較，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 以ELISA為標準做統計，兩種方法測定血清HBsAg的結果統計見表2。由表2可以看出GICA法的靈敏度低于ELISA法，當血清中HBsAg含量低時GICA法不能測出，造成假陰性結果。

3 討 論

在臨床檢驗工作中，HBsAg測定的方法學不同而導致結果差異，常常引起醫療糾紛及臨床醫師的誤解，一般有以下幾種情況：①漏診和誤診，GICA法檢測HBsAg低滴度樣本時造成假陰性；②GICA法在不同的一段時間內檢測同一患者樣本時會出現不同結果；③GICA檢測結果為陰性而ELISA檢測結果為陽性。這些情況讓臨床醫師常常感到困惑，其實這正體現了要恰當選擇測定方法的重要性，然而兩種方法在臨床應用上各有優缺點。

ELISA法是臨床實驗室最常用的固相免疫測定方法，由于ELISA方法具有陽性符合率和靈敏度高、經濟實惠、不需要昂貴設備，適用于大批量人群抗原抗體篩查等優點，所以該方法廣泛應用于各種抗原和抗體測定。雖然，ELISA法在測定時需要人工加樣反復地加試劑洗板，會造成較多的人為誤差，影響因素較多，但是只要操作中掌握一定的技術要求。其結果還是準確可靠的，故在本研究中陰陽性符合率達到了100%。

膠體金免疫層析試驗（GICA）操作簡單、方便、快速、可單份操作等優點，適用于急診和標本量較少的基層醫院，如為門、急診病人和無償獻血現場采血前檢測HBsAg提供了便利條件。但由于測定靈敏度低于ELASA法、成本高于ELASA法和對于標本量較多的大型醫院或大批量體檢來說，又不如ELISA法經濟、簡單方便，并且其結果只能通過肉眼觀察做定性檢測，陽性符合率低于ELISA法，且對于弱陽性的表現較差，容易造成弱陽性標本的漏讀和誤讀。

在本研究中，膠體金法檢測HBsAg的陽性符合率和靈敏度均低于ELISA法，主要是HBsAg含量較低的樣本不能完全測出。使金標法檢測的應用受到一定限制，為了確保檢驗結果的準確及臨床用血的安全，經GICA初篩測定為HBsAg陰性或可疑弱陽性的標本仍需用ELISA進行復檢，尤其是可疑標本，必要時需要用化學發光或電化學發光法復查；ELASA測定HBsAg無疑是目前應用最為廣泛的方法，因為其陽性符合率和靈敏度都比較理想且成本較低，只需要一臺酶標儀，基本滿足了臨床需求，但隨著醫學的發展與進步以及患者要求的日益嚴格，顯然存在差距；近年微粒子化學發光檢測技術（MEIA）檢測HBsAg是目前世界上檢測乙肝標志物的金標準，它不但靈敏度高且抗干擾能力強，重復性好，但由于儀器昂貴、試劑成本較高在我國應用較少，只適用于大型醫院開展針對弱陽性或可疑弱陽性標本的檢測。

總之，用ELISA法檢測HBsAg的靈敏度、陽性符合率明顯比GICA法高，使HBsAg滴度表達低的標本得以檢出，對臨床診斷及流行病學調查有著重要意義。因此，為了提高對乙型肝的診斷率，減少漏檢率，避免引發不必要的醫療糾紛，除急診或樣本量較少的基層醫院外，均應用ELISA法檢測HBsAg。

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