關于正確測定血氨濃度的幾點經驗總結

【摘要】 目的 分析引起血氨測定出現誤差的因素并做出經驗總結。 方法 回顧臨床65例各種肝病和消化道出血患者血氨濃度的檢測記錄，分析其中16例結果有明顯異常的標本，發現其中9例是由于嚴重黃疸、溶血、乳糜標本而導致結果偏差，經稀釋、重新采集樣本后復查糾正了原來的檢測誤差，最終測定出真實結果。 結論 引起血氨濃度測定出現誤差的因素主要體現在兩個方面：一是外在因素的干擾，如含氟的抗凝劑，未去氨材質做的試管，分析過程中受到空氣中氨的污染。再就是標本放置過程中氨的逸出，嚴重溶血、黃疸、脂血標本，即內在因素的干擾，最主要和最常見的就是內在因素的干擾。

【關鍵詞】 血氨濃度；酶法；誤差；因素

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.702 文章編號：1004-7484（2014）-03-1744-01

人體內血氨含量極微。體內氨是蛋白質代謝過程中通過氨基酸脫氨基形成，大部分在肝臟內通過鳥氨酸循環合成尿素。血液中氨的來源主要有三：①氨基酸脫氨基生成的氨；②由腸管吸收的氨，其中包括食物蛋白質在大腸內經腐敗作用生成的氨和尿素通過腸肝循環在腸管中生成的氨；③腎生成的氨，谷氨酰胺在腎遠曲小管上皮細胞內分解生成的氨。氨在體內能迅速地代謝而不致堆積。在正常情況下，氨的主要去路是在肝臟通過鳥氨酸循環合成尿素。此外，腦和腎臟等器官的氨與谷氨酸作用生成谷氨酰胺后被運輸到肝臟，在肝臟轉變為尿素或其他含氮化合物后由腎臟排出體外，或形成銨鹽隨尿排出，是蛋白質代謝的最終產物。氨對人體有毒，能影響神經細胞的新陳代謝，對人體的中樞神經系統有潛在的毒副作用。血氨的來源增加和去路減少，都會引起血氨增高。肝是清除體內氨的主要器官，因此血氨測定對肝性腦病，肝硬化末期肝昏迷，肝衰竭的診斷和鑒別診斷有極其重要的意義。高血氨癥在飲食蛋白過多攝入時也有發現。影響血氨測定的因素有很多，為了能夠給臨床提供真實可靠的檢驗數據，實驗室工作人員必須有強烈的責任心和敏銳的思維，認真、慎重對待每一份標本，現將多年來本人在從事氨測定方面的一些經驗總結如下：

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2013年1月至6月住院處65例各種肝病和上消化道出血患者血氨標本，經統計其中49例血氨濃度在正常范圍內，16例結果異常，血氨濃度>55.3umol/L，對結果異常的標本進行復查并分析原因。

1.2 測定方法

1.2.1 試劑來源 中生北控生物科技股份有限公司。

①試劑R1主要成分：三乙醇胺緩沖液、α-酮戊二酸、NADH。

②R2試劑：谷氨酸脫氫酶。

③校準品：硫酸銨。

1.2.2 反應原理 酶法血清中氨在過量α-酮戊二酸、NADH和足量谷氨酸脫氨酶（GLDH）作用下，使NADH轉化為NAD+，吸光度下降速率與氨的濃度成正比，在340nm處連續監測吸光度的變化率。

α-酮戊二酸+NH4+ +NADH GLDH谷氨酸+NAD+ +H2O

1.2.3 檢測儀器 法國BASIC半自動生化儀。

1.2.4 參考值 男：14.7-55.3umol/L；女：11.2-48.2umol/L。

1.2.5 臨床意義 正常情況下，氨在肝臟中轉變為尿素。重癥肝病時尿素生成的功能低下，門靜脈和側支循環增加，先天性鳥氨酸循環有關酶缺乏，使血氨增高。血氨的測定主要用于肝昏迷時的診斷及療效觀察。消化道出血時，腸道內含氮的物質增高，經細菌或酶的作用會產生大量氨，腎功不全患者由于尿素排出減少使血氨增高。

1.3 標本來源 標本全部來自住院處各種肝病及消化道出血患者：采集靜脈血2ml，用EDTA抗凝，密封后立即送檢。

2 結 果

16例血氨濃度異常的標本經重復測定，其中9例檢測值存在誤差而被及時糾正。產生誤差的主要原因為標本留取與收集錯誤、嚴重溶血標本、嚴重乳糜標本、嚴重黃疸標本未經稀釋處理而直接測定。

3 討 論

實驗室工作人員在接收標本時應首先核對標本是否為血漿標本。因為血液在凝固過程中會產生氨，所以避免使用血清做標本。在抗凝劑選擇方面可采用非銨鹽的肝素，EDTA和草酸鹽三（Li，k，Na），不能用肝素胺，氟化物，發現不合格的標本要及時通知臨床科室重新采集樣本。標本接收后分離血漿時要低溫離心5min，取血漿迅速測定，在30min內檢測完畢，否則會引起血氨的升高。如不能立即測定，在2-4℃可保留2小時，-20℃可穩定24小時。紅細胞中氨的濃度是血漿的2.8倍，故血標本放入試管中后要輕輕顛倒混勻幾次，不要劇烈晃動試管，以免造成溶血。溶血可使紅細胞內的氨進入血漿。紅細胞和血小板中的γ-谷氨?；D移酶（γ-GT）、谷丙轉氨酶（ALT）還可引起血氨濃度的自然增加，肝病時γ-GT和ALT活性比正常人的增加很多，γ-GT是血氨測定引起標本氨濃度增加的一個主要因素。為了降低血標本放置中氨的增加，測出標本中真實的氨的含量，可在血標本中加入γ-GT抑制劑，如上6-二氨基-5-L-已氨酸或硼砂加絲氨酸等。對于乳糜、黃疸標本，則應用蒸餾水進行稀釋處理后再做測定，以免超出線性范圍或導致結果假性偏高。對于結果異常的標本除了及時復查外，還應與臨床溝通，詢問患者的一般狀況。當血氨低于100umol/l，患者表情多正常。血氨在100-200umol/L時可表現為興奮，行為、性格異常，嘔吐，喂養困難。血氨在200umol/L以上時會出現意識障礙，驚厥。血氨達到400umol/L時將出現昏迷、呼吸困難。實驗室與臨床的及時溝通便于臨床診斷肝性腦病及觀察療效，為合理用藥改善患者病情提供一個可靠的依據。以上是在標本方面值得注意的地方。在試劑管理方面要嚴格注意試劑的保存條件和有效期。R1和R2試劑溶解后要在2-8℃避光保存，且R1試劑溶解后穩定期只有1天，所以在操作前還要認真核對試劑是否在有效期內使用。上述為本人在實際工作中總結出的一些經驗，在這里與大家一起分享。