討論咽拭子標本對手足口病疫情監測的應用

【摘要】 目的 觀察討論咽拭子標本對手足口病疫情的監測方法及效果，總結其臨床應用價值。 方法 選取我中心2009年9月至2013年9月收集的164例手足口病患者的咽拭子標本，分別對其進行病毒RNA提取，以逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法檢測柯薩奇病毒16型（CoxA16）、腸道病毒71（EV71）型的特異性引物和腸道通用引物。 結果 164例標本中，檢測出腸道通用引物為擴增陽性有90例，占54.9%，其中檢出CoxA16陽性有83例，占50.6%，EV71陽性有20例，占12.2%。 結論 手足口病的疫情監測顯示以EV71和CoxA16兩種類型病毒為主要病原，使用咽拭子標本進行手足口病疫情監測，操作簡便，出結果快，檢出率高，具有重要的臨床應用價值。

【關鍵詞】 咽拭子標本；手足口病；疫情監測

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.724 文章編號：1004-7484（2014）-03-1760-02

手足口病是由腸道病毒所引起的感染性疾病，在臨床上以手、足、口腔多處同時出現皮疹、皰疹為主要癥狀的臨床癥候群，患者一般癥狀較輕，但也有部分患者出現呼吸系統、中樞神經系統損害等較嚴重病情，個別患兒病情危重且進展迅速，如不能及時處理可導致死亡[1]。該病可由20多種腸道病毒感染引起，具有傳播性，可引起相關疫情的發生，因此需要通過對該病的疫情進行監測，以便及時實施公共衛生管理措施阻止疫情的擴散。通過觀察咽拭子標本對該病的臨床檢測效果，研究其在該病疫情監測中的作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我中心2009年9月至2013年9月收集的164例手足口病患者的咽拭子標本，標本來源病例擬診斷為手足口病，年齡1歲-9歲，且采集時距皰疹出現未超過5d，采集前及發病前近期為使用抗病毒藥物治療。

1.2 方法 對入組標本進行振蕩混勻，離心3000轉20分鐘。使用RNA提取液200μl進行病毒RNA提取，以逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）法檢測柯薩奇病毒16型（CoxA16）、腸道病毒71（EV71）型的特異性引物和腸道通用引物。CoxA16特異性引物包括CoxA16-S與CoxA16-A，EV71特異性引物包括EV71-S與EV71-A[2]。

1.3 數據處理 對兩組患者數據應用SPSS軟件17.0版實施統計學檢驗。計量資料表示為χ ±s，使用t檢驗；計數資料表示為n（%），使用χ2檢驗。可信區間95%，檢驗水準為0.05，P﹤0.05表明樣本數據差異明顯且具有統計學意義。

2 結 果

164例標本中，檢測出腸道通用引物擴增基因片段呈陽性有90例，占54.9%，其中檢出CoxA16引物擴增呈陽性有83例，占50.6%，EV71引物擴增呈陽性有20例，占12.2%，見表1。

3 討 論

以往對于腸道病毒檢測多采取傳統細胞培養與血清中和試驗聯合應用，但由于腸道病毒具有較多的血清型，在檢測中常會遇到型別難以鑒定等情況，且進行細胞培養及中和試驗需要較長的時間，無法滿足快速診斷的臨床需求，其臨床應用效果與可行性較差。

而使用咽拭子標本對腸道病毒的通用引物進行篩查，能夠迅速得出腸道病毒感染的判斷，而后對通用引物呈現陽性病毒標本再次進行CoxA16與EV71等相關特異性引物的檢驗，能夠明顯提高檢驗效率，使臨床檢測時間顯著縮短。同時這些特異性引物經相關學者的臨床驗證在檢測中具有良好敏感性及特異性，其檢測結果準確性較高[3]。

咽拭子標本在臨床采集中操作簡單，方便易行，不會給患兒造成較大身體不適而容易得到其配合，具有較理想的可行性，能夠快速、大范圍的得到樣本標本，而形成對疫情監測的作用；同時手足口病的病毒最早感染位置便在咽部，在這里采樣可以在最早的時間里收集病毒樣本，以便快速對患兒作出診斷。相關研究表明，咽拭子標本與皰液、糞便中采集的標本在進行病毒分離、PCR檢測方面沒有明顯差異，均能夠良好的檢測病毒感染狀況[4]。

本文結果顯示，在此次采集入組的164例標本中，通過RT-PCR檢測出腸道通用引物為擴增陽性有90例，占54.9%，其中檢出CoxA16陽性有83例，占50.6%，EV71陽性有20例，占12.2%。

本文所采集標本中仍有74例檢測腸道通用引物呈陰性，這些標本的出現可能包括以下原因：臨床上誤將其他疾病診斷為手足口病而實施相應實驗室檢查；標本采集未達到標準要求或病毒太少等導致未采集到相應病毒；標本采集后存儲、運輸等環節出現問題，導致病毒的核酸出現降解；檢測中出現PCR漏檢、為假陰性。

本文所進行手足口病的疫情監測顯示本區域內手足口病以EV71和CoxA16兩種類型病毒為主要病原，使用咽拭子標本進行手足口病疫情監測，操作簡便，患兒配合度較高，方便大規模臨床應用，且出結果快，檢出率高，具有良好的應用效果及重要的臨床應用價值。

參考文獻

[1] 劉鳳仁，劉渠，李剛，等.2010——2012年龍崗區手足口病標本病原學檢測結果分析[J].實用預防醫學，2013，20（3）：359-361.

[2] 汪照國，劉曉琳，于萍，等.咽拭子標本對手足口病疫情監測的應用研究[J].預防醫學論壇，2008，14（8）：761-763.

[3] 孫文軍，陸武，黃文光，等.2009——2011年無錫市濱湖區托幼機構手足口病流行特征[J].社區醫學雜志，2012，10（21）：50-51.

[4] 薛黎堅，王文明，王華，等.昆山市2010——2011年手足口病腸道病毒監測及流行特征研究[J].社區醫學雜志，2012，10（10）：1-2.