血漿蛋白C基因多態性與華法林劑量相關性的研究

【摘要】 目的 探討血漿蛋白C基因多態性和華法林劑量的相關性。 方法 選擇心臟機械瓣膜置換術后患者100例，應用限制性片段長度多態性技術、堿基淬滅探針技術，檢測患者的VKORC1-1639G>A、CYP2C91075A>C以及PROCrs5936的基因型，分析和華法林劑量的相關性。 結果 在PROCrs5936等位基因頻率中，T為54.8，G為45.2%。華法林平均穩定劑量：GG型：（2.51±0.80）mg.d-1，TG型：（2.64±0.92）mg.d-1，TT型：（2.63±0.72）mg.d-1，組間比較華法林差異不具有統計學意義。進行方差分析，VKORC1-1639G>A、CYP2C91075A>C基因多態性和華法林劑量相關性具有統計學意義，兩個基因解釋的華法林劑量差異分別為31.0%、7.2%。 結論 VKORC1-1639G>A、CYP2C91075A>C基因多態性和華法林劑量相關性顯著，PROCrs5936基因多態性則不顯著。

【關鍵詞】 血漿蛋白C；基因多態性；華法林劑量

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2014.03.511 文章編號：1004-7484（2014）-03-1596-02

進行心臟機械瓣膜置換術后，患者必須不停地服用華法林抗凝，但是，華法林抗凝在個體用藥劑量方面存在很大的差異，容易出現不良反應如出血、栓塞等，對生命造成威脅，華法林的安全使用受到人們的關注[1]。本次研究主要是分析血漿蛋白C基因多態性和華法林劑量的相關性，選擇100例心臟機械瓣膜置換術后患者進行研究，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇心臟機械瓣膜置換術后患者100例，統計患者的年齡、性別、華法林劑量等，華法林劑量達到穩定狀態后，進行記錄。每位患者被記錄的次數至少為5次。華法林日平均劑量計算如下：患者測得華法林劑量和國際標準化比值（INR），范圍在1.5至2.8之間，記錄總服用量，繼而得出日平均穩定劑量。

1.2 方法

1.2.1 基因型檢測 患者同意后，收集1mL EDTA抗凝靜脈全血，應用低滲液，使得紅細胞裂解，白細胞分離，應用經典酚-氯仿法，將白細胞基因組DNA提取出來，儲存于冰箱，溫度設定為-20℃，備用。應用限制性片段長度多態性技術、堿基淬滅探針技術，檢測患者的VKORC1-1639G>A、CYP2C91075A>C以及PROCrs5936的基因型。

1.2.2 測序 選擇VKORC1-1639G>A：AA型、GG型以及AG型；CYP2C91075A>C：AA（*1/*1）型以及AC（*1/*3）型；PROCrs5936：GG型、GT型以及TT型2支擴增PCR產物，25L，送至相關部門進行測序驗證。

1.3 統計學分析 應用SPSS16.0進行統計分析，P<0.05，差異具有統計學意義。

2 結 果

2.1 華法林平均穩定劑量對比 在PROCrs5936等位基因頻率中，T為54.8，G為45.2%。華法林平均穩定劑量：GG型：（2.51±0.80）mg.d-1，TG型：（2.64±0.92）mg.d-1，TT型：（2.63±0.72）mg.d-1，組間比較華法林差異不具有統計學意義。

2.2 基因多態性對華法林劑量產生的影響 進行方差分析，VKORC1-1639G>A、CYP2C91075A>C基因多態性和華法林劑量相關性具有統計學意義。進行多元線性回歸分析，兩個基因解釋的華法林劑量差異分別為31.0%、7.2%。

3 討 論

華法林主要是對維生素K環氧化物還原酶起到抑制的作用，進而對凝血因子起到抑制作用，能夠起到抗凝的作用[2]。在集體中，PROC是較為重要的抗凝因子，在生理情況下，主要是以酶原的形式在血液中循環，在特定的條件下會被激活，成為活化蛋白C（APC），APC對凝血以及纖溶等系統起作用，起到的抗凝作用較大[3]。PROC是血漿糖蛋白，被維生素依賴，合成的過程需要維生素K的參與，所以，PROC也會影響到華法林的抗凝作用，它的基因多態性對于華法林在不同人群的抗凝作用可能會產生影響，本次的研究結果顯示，PROCrs5936基因多態性和華法林平均穩定劑量相關性不具有顯著性差異，有助于為后續的理論研究提供依據。

參考文獻

[1] 張遼，湯榮華.血漿蛋白Z水平測定的臨床觀察[J].血栓與止血學，2008，14（1）：5-7.

[2] 胡微，湯榮華.口服華法林患者血漿蛋白質Z水平檢測的臨床意義[J].蚌埠醫學院學報，2008，33（1）：26-27.

[3] 張海燕，方煥榮，楊協清，等.血漿蛋白C基因多態性與華法林劑量相關性的研究[J].中國藥學雜志，2012，47（21）：1741-1745.