中藥鑒定技術的新進展

摘要：中藥材的真偽問題是困擾中藥材品種質量的關鍵問題，本文闡述了近年來中藥鑒定技術的新進展，并對中藥鑒定技術發展進行展望。

關鍵詞：中藥；鑒定技術；進展

中藥的應用歷史悠久，萬余種中藥材存在著諸如品種混亂、真偽難辨等現狀，古代僅靠有經驗的老藥工眼觀、手摸、口嘗，一些新技術也逐漸應用在中藥鑒定領域，包括較為傳統的基原鑒定、形態鑒定、顯微鑒定、理化鑒定的方法，近年來常用的光譜技術、同工酶分析技術以及隨著分子生物學迅速發展應用于中藥鑒定的PCR技術等等，本文就近年來新發展應用的中藥鑒定技術展開綜述，以利于新技術的推廣使用。

1 近紅外光譜技術

近紅外光譜技術是一種結合了光譜技術與化學技術的新技術，其原理主要是通過分子的振動，測定相應的光譜，利用相關數據庫，將未知樣本與建立的校正模型進行對比，以達到定性及定量分析的目的[1]。近紅外光譜技術具有操作簡單，分析速度快，效率高，花費少，結果重復性好等優點。本技術能夠應用于鑒定多種中藥藥材，結果準確迅速，從而為鑒別其質量的優劣提供基礎。另外，近紅外光譜技術還可以應用于中成藥的定性鑒定，原理主要是通過不同組分的指紋圖譜之間的差異建立識別模型，以達到對于不同配伍比例的中藥復方的鑒別。盡管如此，近紅外光譜技術在應用中仍存在一些缺陷，例如鑒定樣本的組分含量要再0.1%以上，檢測靈敏度相對較低，并且在藥材鑒定時，需要對原始圖譜進行準確的數據處理[2]。

2 同工酶分析技術

同工酶是基因編碼的產物，可以反應出編碼 DNA 的變化，因此能夠通過分析同工酶酶譜的變化獲得所需的遺傳信息。電泳法是同工酶技術中應用最廣泛的方法。同工酶電泳的操作方法與蛋白質電泳的原理基本一致。由于不同同工酶的電荷、分子大小以及形狀不同，在電泳作用和分子篩作用下，聚丙烯酰胺凝膠中的同工酶會產生不同的移動速度，從而被分離。而同工酶的染色主要是通過酶催化特異性底物發生生化反應形成有色產物而實現的。目前研究的同工酶有數百種，而主要用于中藥鑒定的包括過氧化物酶、過氧化氫酶、酯酶、淀粉酶、超氧化物歧化酶、乳酸脫氫酶等十幾種[3]。同工酶能夠在一定程度上顯示不同種源間遺傳的差異。因此，同工酶在真偽鑒別、遺傳種質的分離與篩選、藥物品種鑒定和生物多樣性等研究中有廣闊應用前景。

3 X射線衍射技術

X線衍射技術作為結構和成分分析的現代科學技術，具有操作簡便分析快速，所需樣品量少，所得圖譜信息量大等優點，目前廣泛應用于礦物類中藥的鑒別。主要分為單晶X衍射和多晶X衍射。單晶X衍射是晶體結構測定的方法。能夠得到樣本的鍵長、鍵角、配位數等晶體化學數據，還可以通過高分辨電子密度分辨圖進一步得到價電子分布、原子及離子的大小、鍵型等數據；多晶X射線衍射又叫粉末X射線衍射，其得到的衍射圖是各組分衍射效應疊加而成的，在混合物組成恒定的情況下，所得衍射圖譜就可作為該混合物的特征性圖譜。不同礦物藥的成分各不相同，因此X射線衍射圖譜也有差異，也就實現了通過X衍射對礦物藥的鑒別。但是，礦物藥材往往來源復雜，同一種礦物的化學成分在環境、采集時間、儲存方法等影響下也會發生差異，所以同一種礦物藥的X衍射圖譜可能不同。在實際運用中，往往需首先采集大量不同樣品，建立其X衍射譜的變化范圍和幅度，才能進行準確的鑒定。X衍射技術主要研究和應用的方向是礦物藥的鑒定，如雄黃、白礬、滑石等，在鑒別礦物藥炮制品鑒定方面具有明顯優勢，能夠通過觀察一些礦物藥生品與其炮制品圖譜清晰的區別其生品與煅品[4]。X射線衍射技術還能夠應用于確定礦物藥成分及其定量，在礦物藥鑒定的應用中具有廣闊的前景。

4 基于 PCR 技術的現代分子生物學技術

隨著分子生物學技術的迅速發展，尤其是聚合酶鏈式反應（PCR）技術的問世，基于PCR 技術的現代分子生物學技術在中藥鑒定中也得到很多應用[5]，由于其準確性和可靠性較高，因此具有其他方法難以比擬的優勢在PCR 技術的基礎上，現代分子生物學的許多操作技術廣泛應用于中藥的鑒定，如：RAPD技術主要用于藥用植物的鑒定和遺傳多樣性研究，具有多態性高和重復性好等優點；ISSR-PCR技術利用放射性標記的探針，能夠構建出多態性DNA圖譜；PCR-RFLP 技術用特異性的引物對模板DNA擴增，獲得特異性產物，并進行酶解，構建物理圖譜，在鑒定中具有準確可靠，重復性好等優點；還有尚處于起步階段mRNA 差異顯示技術，能夠鑒定栽培品種與野生種、道地藥材與普通藥材之間的差異。

5 結論

除了上述方法外，尚有中藥指紋圖譜技術、DNA條形碼技術[6]等新技術在不斷研究發展，這些新技術的發展與應用對于中藥的真偽鑒別和質量控制有非常重大的意義，為中醫藥在安全性、療效性和科學性方面提高打下基礎，更好的應用于臨床治療之中。

參考文獻：

[1]王緒新.近紅外光譜技術在中藥鑒定中的應用研究[J].中國實用醫藥，2013，10（8）：254.

[2]王星，白雁，陳志紅，等.近紅外光譜法測定連翹中連翹酯苷含量[J].中國中藥雜志，2009，34（16）：2071-2075.

[3]牛紅軍，姜明，楊官娥.同工酶分析技術在中藥鑒定中的應用進展[J].時珍國醫國藥，2013，12（6）：2976-2978.

[4]黃必勝，袁明洋，陳科力. X射線衍射技術在礦物類中藥鑒定中的研究進展[J].中國現代中藥，2013，11（4）：917-921.

[5]詹立平，趙鑫，劉志梅.基于PCR技術的現代分子生物學操作在中藥鑒定中的應用[J].中國醫藥導報，2013，10（7）：25-26+29.

[6]中國中醫科學院中藥研究所所長：陳士林.中藥鑒定領域新突破：DNA條形碼[N].健康報，2013-10-16005.編輯/王敏