直接藥敏試驗與常規藥敏試驗在臨床血液細菌鑒定與檢驗中的臨床應用價值比較研究

摘要：目的 探究直接藥敏試驗與常規藥敏試驗在臨床血液細菌鑒定與檢驗中的臨床應用價值，并對二者進行比較。方法 回顧性分析本院2010年10月～2013年10月診斷陽性的血液樣品資料，對陽性樣品進行培養后，進行直接藥敏試驗與常規藥敏試驗，比較兩種檢測結果。結果 共培養485例陽性樣品，其中直接藥敏試驗檢出410例，常規藥敏試驗檢出485例，符合率為84.54%。485例樣品中，革蘭氏陽性菌（G+）87株，占總數的17.94%；革蘭氏陰性菌（G-）398株，占總數的82.06%，兩種方法檢測G-菌結果差異不顯著（P>0.05）。結論 臨床上采用直接藥敏試驗和常規藥敏試驗進行血液細菌鑒定與檢驗，能達到快速確定病原菌的藥敏特性的目的，從而減少了盲目用藥。

關鍵詞：直接藥敏試驗；常規藥敏試驗；血液細菌；鑒定與檢驗；價值比較

近年來，由于臨床上抗生素的濫用現象嚴重，導致耐藥菌的出現進而引起抗生素的治療失效[1]。臨床上，做好細菌的臨床檢驗，確定各種細菌的藥物敏感性具有重要的意義，它是臨床用藥的前提和依據[2]。隨著現代醫療技術的進步，越來越多智能化、自動化的醫療儀器已經在臨床治療的各個環節中得到廣泛應用，為臨床上各種疾病的診斷和治療提供了極大的幫助[3]。先進的醫療儀器具有其檢測特異性和靈敏性的優勢，但是通常自動化的醫療機器往往價格均較為昂貴，難以在基層醫院推廣應用。藥敏試驗法和生化微管法細菌鑒定目前在基層醫院的檢測中仍占有重要地位，尤其是對菌血癥及敗血癥患者及時的獲取有效的抗生素的藥敏結果具有著重要的臨床治療意義[4-5]。本研究回顧性分析本院2010年10月～2013年10月診斷陽性的血液樣品資料，對陽性樣品進行培養后，進行直接藥敏試驗與常規藥敏試驗，比較兩種檢測結果，探究直接藥敏試驗與常規藥敏試驗在臨床血液細菌鑒定與檢驗中的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究中485例均為我院2010年10月～2013年10月診斷陽性的血液樣品，全自動血培養儀培養（北京伯盛泰科技有限公司，京藥監械（準）字2012第2400316號），細菌鑒定時所使用的API鑒定板條（Remel Inc.國食藥監械（進）字2012第2401104號）。其他儀器及試劑包括： 細菌鑒定、藥敏綜合板、藥敏紙片（Becton Dickinson and Company，國食藥監械（進）字2012第2403040號）、MH干粉、血平板（濟南賽爾生物科技有限公司，魯濟食藥監械（準）字2012第1400066號）、巧克力平板（烏魯木齊宏信科創生物科技有限公司，新烏食藥監械（準）字2011第1400089號）、麥康凱平板（成都瑞琦科技實業有限責任公司，川食藥監械（準）字2011第2400016號）、無菌拭子及一次性無菌注射器。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗 從全自動血培養儀取出陽性樣本后用無菌注射器抽取部分樣品并加入無菌離心管中，置入離心機內進行離心1500rpm，離心5min。然后吸取離心管上層清液置入另一離心管中，3000rpm離心15min，棄去上清后，對沉淀物進行0.9%氯化鈉溶液洗滌3次，收集均細胞黏液行涂片革蘭染色，顯微鏡下觀察細菌形態。結果為常規菌則接種到MH-平板上，無菌拭子涂抹均勻并貼上藥敏紙片。革蘭氏染色結果為革蘭陽性球菌（G+）呈鏈狀，則以MH+羊血平板并進行初步藥敏試驗，根據結果選擇適當酶試驗，最后調整菌液濃度到6.2×102cfu/L涂到綜合板上行藥敏試驗和細菌鑒定。

1.2.2 常規藥敏試驗 同樣無菌環境中取陽性樣本接種于各種不同平板，放置于溫度為35℃，5% CO2的孵箱中孵育18～24h后，之后進行革蘭染色。同樣根據染色檢測結果選擇相應的酶試驗。

1.3藥敏紙片選擇 一般情況下，革蘭陰性桿菌（G-）多選擇頭孢類抗生素，革蘭氏陽性菌（G+）多選擇β-內酰胺類、部分萬古霉素及大環內酯類。

1.4數據處理 本研究中所有實驗數據均采用SPSS20.0軟件進行統計學處理，計量資料采用t檢驗，表示方法采用平均數±標準差表示；計數資料采用χ2檢驗，結果以P<0.05為差異顯著。

2 結果

共培養485例陽性樣品，其中直接藥敏試驗檢出410例，常規藥敏試驗檢出485例，符合率為84.54%。485例樣品中，革蘭氏陽性菌（G+）87株，占總數的17.94%；革蘭氏陰性菌（G-）398株，占總數的82.06%，兩種方法檢測G-菌結果差異不顯著（P>0.05），見表1。

3 討論

隨著臨床上抗生素使用的增多，不合理的抗生素使用率逐年增高，多重耐藥細菌感染的患者比例也明顯增高，這往往誘發患者全身感染性疾病，敗血癥和菌血癥是臨床嚴重危及患者生命的疾病，因此快速準確的藥敏試驗與細菌鑒定是臨床診斷和治療的關鍵。故高效、快速耐藥性試驗和細菌鑒定在臨床治療方面顯得極為重要，從而能快速控制感染，提高患者的治愈率[6]。

目前，臨床血液細菌鑒定與檢驗以常規藥敏試驗最為常用。其基本原理為臨床定性試驗，往往通過測量抑菌環直徑與抗生素的抑菌濃度來設計相關試驗。由于該方法對環境和設備等條件要求較高，在臨床推廣方面造成了許多不便；其次常規藥敏試驗檢測所需時間一般較長，通常在2～3d后才能獲得試驗結果，沒有得到藥敏結果前，往往只能依靠醫生臨床經驗去判斷，選擇相應的抗生素進行治療，此時，對于感染多重耐藥性細菌的患者臨床療效往往較差，并且導錯過誤最佳治療時間，從而加重病情[7]；該方法還存在誤差率偏高，相關文獻報道，在測量抑菌直徑時誤差約在±2mm左右[8]，忽略誤差后準確率約>95%。種種條件均限制常規藥敏試驗快速、高效檢驗。

直接藥敏試驗最早是1973年提出后便逐漸引起各界學者的廣泛關注，1986年美國Fincgold等人再次提出這一說法，他們認為直接對臨床患者血液標本進行藥敏檢驗，可達到快速、高效檢驗目的[9]。

本研究結果表明，臨床上采用直接藥敏試驗和常規藥敏試驗進行血液細菌鑒定與檢驗，能達到快速確定病原菌的藥敏特性的目的，從而減少了盲目用藥，提高臨床治愈率和治療效果。

參考文獻：

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