門診宮頸拭子HPV檢測與早期宮頸癌防治關系研究

摘要：目的 研究我院婦科門診拭子檢測人乳頭瘤病毒亞型感染的情況，探討 HPV DNA檢測在防治早期宮頸癌中的意義。方法 對587例婦科門診患者進行HPV基因分型檢測。結果 587例患者中，HPV感染者156例，感染率為26.58%。患者中高危型 HPV （ 52、16、33、18、58、39、51、59、35、56、68） 112例， 占感染總人次的 71.79%； 低危型 HPV （6、11） 35例， 占感染總人次的22.44%； 中國人群常見型HPV （ 53、66 cp8304 ） 9例，占感染總人次的5.77 %。多重感染患者5例，占HPV感染者的 3.21%。結論 利用宮頸拭子進行HPV-DNA檢測HPV基因分型，有助于了解本地區HPV感染亞型的分布，有利于對 HPV感染的診斷和宮頸癌的防治，可作為宮頸癌篩查的手段。

關鍵詞：人乳頭瘤病毒；宮頸腫瘤；感染；防治

2002年全球宮頸癌發患者數約有500000 人，死亡人數約280000人[1-2]，可見宮頸癌是威脅婦女生命健康的最常見的疾病之一，近幾年呈增高趨勢。在我國宮頸癌也是最常見的女性生殖道惡性腫瘤之一。大量流行病學、分子生物學研究表明95% 宮頸癌發生與人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染有關，HPV 感染已被證明是引起宮頸癌及癌前病變的必要因素[3-4]。 目前已經確定的HPV亞型大約有120余種，能夠感染婦女生殖道的有40種亞型，而與腫瘤相關的約20種，HPV感染可引起肛門癌、陰莖癌、宮頸癌等[5]。本文將對587例在我院婦科門診的女性進行宮頸拭子HPV篩查及分型檢測，了解本地區婦女HPV感染情況，為HPV感染的防治及宮頸癌的早期診斷提供依據。現將我們的調查研究報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年3月～2013年9月587例在我院門診就診的年齡大于30歲以上進行宮頸拭子HPV-DNA及其亞型檢測的婦女，20～75歲，中位年齡39.2歲。

1.2 主要儀器 核酸擴增熒光分析儀（美國AB17000型）；醫用核酸分子快速雜交儀；試劑盒由潮州凱普生物化學有限公司提供。

1.3采集宮頸脫落細胞 將專用宮頸刷放置于宮頸口，輕輕搓動并使其順時針旋轉5圈，慢慢取出宮頸刷，將其放入專用取樣管內管內有細胞保存液，4℃保存待檢。

1.4 HPV-DNA提取及擴增 嚴格按照DNA提取試劑盒操作步驟提取，HPV-DNA擴增按照試劑盒說明書擴增程序進行PCR擴增反應。

1.5雜交顯色及結果判斷

PCR產物預熱至45℃后，取20μL 加入0.5ml已預熱至45℃的雜交液中，混勻后加在薄膜上，導流雜交在醫用核酸分子快速雜交儀中進行。雜交完成后，進行顯色，1h內分析結果。陽性點為清晰可見的藍色園點，陽性點的HPV病毒的類型根據膜條HPV的分型判斷。

1.6統計學處理 采用SPASS 17.0 統計學軟件進行統計學分析處理，以α=0.05為檢驗水準。

2 結果

2.1一般情況 587例女性中，HPV感染陽性者為156例，總陽性率達26.58%，其中112例為HPV高危型感染（71.79%），35例HPV低危型感染（22.44%），9例為中國人群HPV常見型感染（5.77%），有5例（3.21%）為混合感染且均為高危型混合感染。

2.2 HPV 感染年齡分布 587例HPV篩查的女性中，在21～35，36～45，46～55，>56例年齡區間的陽性率分別為19.44%，26.29%，28.81%，32.65%；感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統計學差異（P>0.05），見表1。

2.3 HPV亞型分布 本次研究中HPV各亞型分布見表2。HPV52型（16.7%），HPV6型（16.7%），HPV16型（12.8%），HPV33型（10.9%）分別占據了HPV各亞型感染分布的前4位。

3 討論

HPV是一類具有相同結構的異型病毒，主要侵犯皮膚及黏膜鱗狀上皮的小雙股環狀 DNA病毒。在分子生物學和流行病學不斷發展的時代，醫學界對人類乳頭瘤狀病毒 （ hum an papillo m au irus，H PV） 感染及下生殖道系列疾病的關系研究不斷深入，學者們發現人類乳頭瘤病毒感染和宮頸癌有著密切關聯性。國際癌癥研究中心 （ I ARC ） （ 1995） 年明確提出 H PV 感染是誘發宮頸癌的主要危險因素之一。潛伏感染期、亞臨床感染期、臨床癥狀期和相關的腫瘤期是HPV感染過程常見分期。 HPV陽性婦女是否進展到宮頸上皮內高度病變和癌癥，與HPV的型別有很大聯系。大部分學者認為HPV高危型持續感染是子宮頸癌發生必要條件[6]。Cuz i ck等研究報道，在印度宮頸癌高發區，高危型 HPV感染率為 7%～13%%[7]。

本研究中選取婦科門診進行HPV篩查的女性作為研究對象，年齡均在20歲以上，并進行基因分型檢測。587位女性中，HPV感染陽性者為156例，總陽性率達26.58%，其中112例為HPV高危型感染（71.79%），35例HPV低危型感染（22.44%），9例為中國人群HPV常見型感染，有5例（3.21%）為混合感染且均為高危型混個感染，與常見報道相一致。 HPV52型（16.7%），HPV6型（16.7%），HPV16型（12.8%），HPV33型（10.9%）分別占據了HPV各亞型感染分布的前4位。從年齡組間構成比看，感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統計學差異（P>0.05）。據文獻報道，全世界高危型感染主要以HPV-16，18亞型為主，其次為HPV45，31，33亞型[8]。但本次研究與此報道略有出入。本研究中，HPV高危型患者其亞型感染比例由高到低依次為 HPV：52、16、33、18、58、39、51、55、59、35、56、68，HPV52型成為第一亞型，而HPV16成為高危型的的第二亞型，HPV33型則為第三亞型，我們分析原因，這可能與地理分布差異及年齡段的選取有關。因此，筆者認為在本地區應著力開展HPV52、16、33亞型的普查研究，使其成為宮頸癌防治的早期預防措施。此外在我們的研究中，156例陽性感染者混合感染占3.21%，且均為高危亞型，但是未見四重以上感染。說明在本地區人群中婦女HPV多重感染所占比例較小。

本研究患者的年齡平均為39.5 歲，在21～35，36～45，46～55，>56各年齡區間的陽性率分別為19.44%，26.29%，28.81%，32.65%；感染高峰在46～55，>56這兩個年齡段。但各年齡組間HPV感染無統計學差異（P>0.05）。說明各年齡組間，感染HPV 病毒的概率沒有太大差別。研究認為，性活躍年輕婦女HPV感染率高，但目前認為這種感染是一過性的，這些HPV感染者大部分會自然消退， 僅 5.0%～10%發展為持續感染[9]。有前瞻性研究發現，宮頸HPV 感染者宮頸感染HPV1 6/18 型者在1 年時間內有1/3 將會發展成為宮頸上皮內瘤樣病變（CIN），而其中約有15%將可能轉變為宮頸癌[10]。

人乳頭狀瘤病毒感染與子宮頸病變發展有密切關系，對宮頸脫落細胞進行 HPV 檢測，了解其感染狀態和亞型，從而積極地治療宮頸高危型HPV 感染，對預防宮頸癌變具有重要的意義。

參考文獻：

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[10]徐成康，梅卓賢.宮頸人乳頭狀瘤病毒感染的篩查及其意義[J].中山醫科大學學報，1998，19：22-31.

編輯/王敏