莼菜葉斑病的防治藥劑研究

趙瑤 王文澤 彭偉 畢朝位

摘要：莼菜作為綠色蔬菜珍品，是石柱出口及農民致富的支柱產業之一，而莼菜葉斑病在當地的發生危害越來越嚴重。本研究通過室內平板篩選和田間小區試驗，獲得對莼菜葉斑病有較好防效的殺菌劑。研究結果表明，戊唑醇、苯醚甲環唑、苯甲·丙環唑、吡唑醚菌酯的平板抑菌效果較好，對病原菌的生長抑制率可達75%；而吡唑醚菌酯的田間防效最好，3次用藥后8天、16天對莼菜葉斑病的相對防效為43.63%和47.96%，并且對植株生長未見影響。以上結果表明，吡唑醚菌酯可以作為防治莼菜葉斑病的備選藥劑。

關鍵詞：莼菜；葉斑病；殺菌劑；吡唑醚菌酯

中圖分類號：S482.2文獻標志碼：論文編號：2014-0058

0引言

莼菜(Brasenia schreberi J. F. Gmel.)又名菁菜、馬蹄菜、湖菜等，為多年生宿根水生草本植物，其味鮮美滑嫩，并含有豐富的膠質蛋白、碳水化合物、脂肪、多種維生素和礦物質，有抗腫瘤、抗潰瘍、抗菌消炎和促進免疫等生物活性, 為具有營養、醫療和保健功效的綠色蔬菜珍品[1-5]。莼菜對生長的自然條件要求非常高，在世界上除日本尚有少量栽培外，主要在中國重慶石柱、浙江杭州西湖、湖北利川佛寶山等地有較大面積栽培[6-8]。石柱縣種植莼菜始于1991年，目前種植面積已達 870 hm2，產值7000多萬元，已成為全球最大的莼菜基地，也是當地出口及農民增收的主要支柱產業之一[9]。然而近年來，石柱莼菜葉斑病發生十分嚴重。它主要為害葉片，多從葉緣開始發病，初為黑色小點，后逐漸擴大，形成具輪紋的黑褐色大斑，病斑邊緣具黃色暈環，多個病斑可愈合并使整個葉片逐漸腐爛。在石柱，一般田塊發病率在10%~30%，重病田達100%，其嚴重影響產量和品質，并且發生面積和嚴重程度有逐漸加重的趨勢。對于莼菜病害的研究報道本就十分少，而從未見國內外對莼菜葉斑病的系統研究報道。本實驗室前期研究表明，引起該病害的病原菌為鏈格孢菌(Alternaria alternate)（待發表）。而對該病害采用何種防治措施是目前生產上急需解決的問題。筆者通過室內平板篩選和田間小區試驗，以期獲得對莼菜葉斑病有較好防效的殺菌劑。

1材料與方法

1.1試驗時間、地點

研究田間試驗于2013年在石柱縣冷水鎮八龍村進行，室內試驗在西南大學植保學院真菌學實驗室進行。

1.2試驗材料

1.2.1供試菌株莼菜葉斑病病原菌分離自重慶市石柱縣冷水鎮田間發病的病株，本實驗室保存。

1.2.2供試殺菌劑85%戊唑醇水分散粒劑（青島潤生農化）；25%嘧菌酯懸浮劑（先正達）；30%苯甲·丙環唑乳油（先正達）；10%苯醚甲環唑水分散粒劑（先正達）；50%多菌靈可濕性粉劑（江蘇藍豐生物化工）；25%吡唑醚菌酯乳油（巴斯夫）。

1.3試驗方法

1.3.1不同殺菌劑的室內抑菌試驗采用菌絲生長速率法比較不同殺菌劑的抑菌作用[10]。將菌株在PDA平板上25℃培養5天，沿菌落邊緣制成直徑6 mm的菌碟，以不同殺菌劑的推薦田間用藥濃度再稀釋10倍和100倍配制含藥PDA平板，將菌碟移至含藥平板上，每處理重復3次，以不含藥平板作對照，25℃培養7天后十字交叉法測量菌落直徑，計算不同殺菌劑的抑制率，如式(1)。

抑制率=[(對照菌落直徑-處理菌落直徑)/(對照菌落直徑-菌碟直徑)]×100%…(1)

1.3.2田間小區試驗選用常發病田，當地常規栽培管理。根據室內抑菌試驗結果，選用85%戊唑醇（用量510 g a.i./hm2）、25%嘧菌酯(112.5 g a.i./hm2)、30%苯甲·丙環唑(135g a.i./hm2)、10%苯醚甲環唑(60 g a.i./hm2)、25%吡唑醚菌酯(150 g a.i./hm2)5種殺菌劑處理，以清水為空白對照。每處理3次重復，每小區30 m2，各小區隨機排列。根據田間發病情況及天氣情況，于4月28日、5月11日、5月20日施藥3次。

于每次藥前以及末次藥后8天、16天調查病害發生情況。采用隨機取樣，每小區隨機調查50個葉片，記錄總葉片數、病葉數和各級病葉數。參照大多數葉部病害設定病情分級標準：0級—無病斑，1級—病斑面積占整個葉面積5%以下，3級—病斑面積占整個葉面積6%~10%，5級—病斑面積占整個葉面積11%~20%，7級—病斑面積占整個葉面積21%~50%，9級—病斑面積占整個葉面積50%以上。

病情指數及相對防治效果的計算如式(2)~(3)。式中，CK0—空白對照區施藥前病情指數；CK1—空白對照區施藥后病情指數；PT0—藥劑處理區施藥前病情指數；PT1—藥劑處理區施藥后病情指數。

[病情指數=各級病葉數×相對級數值調查總葉數×最高級數值×100]…(2)

[相對防效=(1-CK0×PT1CK1×PT0)×100%]…(3)

2結果與分析

2.1不同殺菌劑的室內抑菌作用

選用不同類型的常用殺菌劑，以其推薦田間用藥劑量的濃度再稀釋10倍和100倍配制含藥平板，接種病原菌，測定不同殺菌劑的室內抑菌效果，結果（表1）表明，戊唑醇和苯醚甲環唑在2種濃度下的抑菌效果都是最好的，分別都在90%和75%以上；苯甲·丙環唑和吡唑醚菌酯的抑菌效果次之，在高濃度下的抑菌效果達75%以上；嘧菌酯平板抑菌效果較差，并且2個濃度間無抑菌效果無差異，為37%和36%；而多菌靈的抑菌效果最差，僅為14%和6%。根據以上結果并結合各類殺菌劑的作用方式及防治對象，選用戊唑醇、苯醚甲環唑、苯甲·丙環唑、吡唑醚菌酯和嘧菌酯等5種殺菌劑用于田間小區試驗。

2.2不同殺菌劑的田間防效

對選用的5種殺菌劑進行田間小區試驗，結果（表2）表明，在推薦劑量下，吡唑醚菌酯的相對防治效果最好，3次用藥后8天、16天對莼菜葉斑病的相對防效為43.63%和47.96%，嘧菌酯的相對為防效21.19%和32.11%，戊唑醇為31.63%和29.63%，苯甲·丙環唑為19.51%和26.67%，而苯醚甲環唑僅為2.34%和13.37%。以上結果表明吡唑醚菌酯對莼菜葉斑病具有一定的田間防治效果，可以作為防治該病害的備選藥劑。

3結論與討論

莼菜為中國重要的野生經濟植物，分布于江蘇、浙江、安徽、江西、湖南、四川、云南和臺灣等省份。由于人類活動導致野生生境破壞及過度的經濟開發，莼菜的群落面積與種群數量急劇減少，目前已被林業局和農業部列為國家I級重點保護野生植物[11-13]。野生莼菜主要在淺水湖泊、池塘內呈間斷分布，其生境隔離現象十分突出[13]，因此也不會有病蟲害的大面積嚴重發生，有關莼菜病蟲害的研究報道也就十分少見。但由于近年來在部分地區人工大面積的連片種植，莼菜病害發生也有逐漸加重的趨勢。比如莼菜葉斑病在石柱縣的發生危害就越來越嚴重。本研究也是首次對該病害的防治作初步的探討。

本研究選用屬甾醇生物合成抑制劑的戊唑醇、苯醚甲環唑、苯甲·丙環唑和屬β-甲氧基丙烯酸酯類的嘧菌酯、吡唑醚菌酯等5種殺菌劑用于室內平板抑菌和田間小區試驗。室內平板抑菌試驗結果表明，戊唑醇和苯醚甲環唑的抑菌效果最好，苯甲·丙環唑和吡唑醚菌酯次之，嘧菌酯較差。而田間小區試驗結果與此并不完全一致，相對防效最好的是吡唑醚菌酯，其次是嘧菌酯、戊唑醇和苯甲·丙環唑，而苯醚甲環唑較差。產生這種差異是由于在2種試驗方法下藥劑對病原菌的接觸方式不同，前者藥劑直接接觸病原菌，而后者藥劑要通過植物吸收后才能接觸病原菌，此過程中受植物對藥劑的粘附性、吸收性、傳導性、降解等方面的影響，還受施藥期間環境的影響。因此，室內平板抑菌試驗結果是田間小區試驗藥劑選擇的參考，而田間小區試驗結果更能指導實際生產。

莼菜是一種水生的綠色蔬菜珍品，一般在1000~1500 m的高山地區生長，要求陽光充足、水源豐富、水質清潔、土壤pH 5.5~7.0、無污染的自然環境條件[14-16]，因此在莼菜栽培中基本不施用化肥等。在本研究的田間小區藥效試驗中，施用殺菌劑后結合病害調查，還會定期觀測、評價各藥劑處理對莼菜的安全性，如葉色、葉斑、長勢等生長發育指標的影響。在整個施藥過程中及藥后3周的田間調查均未發現藥害的產生，表明以上殺菌劑在試驗施藥水平下對莼菜是安全的。

參考文獻

[1] 楊玉鳳.蔬菜珍品——莼菜栽培技術[J].四川農業科技,2004(12):15.

[2] 王淑如,夏爾寧,周嵐.莼菜多糖的提取分離及某些生物活性的研究[J].中國藥科大學學報,1987,18(3):187.

[3] Kakuta M, Misski A. The polysaccharide of Junsai (Brasenia schreberi J. F. Gmel) mucilage, fragmentation analysis by successive smith degreadations and partial acid hydrolysis [J]. Agric Biol Chem,1979,43(6):1269.

[4] Goleniewska-Furmanova M. Antimitotic acivity of basic compounds and extracts from the leaves of Caboniboceae, Nymphaeaceae and Nelumbonacceae species[J]. Acta Pol Pham,1969,26(5):389-407.

[5] 劉翠俐,于秋英.莼菜多糖粘膠降血糖作用的研究[J].職業與健康,2004(6):142-143.

[6] 袁政,卓萬凱,劉長懷,等.利川莼菜優質高產栽培及加工技術[J].中國蔬菜,2007(增刊):122-123.

[7] 劉美玉,習向銀,羅麗娟,等.莼菜資源利用研究綜述及展望[J].長江蔬菜.2011(10):7-10.

[8] 余昌均,牟來明,周超愛.福寶山莼菜氨基酸和微量元素分析[J].湖北農業科學,1995(4):47-48.

[9] 王惠玲,馬世旬,冉素清.石柱莼菜產業發展的現狀問題及對策[J].中國農技推廣,2009,25(3):27-28.

[10] 賈曉輝,傅俊范,周如軍,等.草莓褐色輪斑病病原生物學研究及防治藥劑的篩選[J].安徽農業科學,2005,33(10):1849-1850.

[11] 吳永堯,彭振坤,周大寨,等.莼菜富集鋅的能力及其鋅的分布探討[J].食品科學.2003,24(2):125-127

[12] 鄭舜.保健水生蔬菜-莼菜優新品種[J].蔬菜天地,2008(6):8-9.

[13] 高邦權,張光富,陳會艷.不同生境下莼菜群落的物種多樣性[J].應用生態學報,2007,18(2):283-287.

[14] 王昌全,李煥秀,彭國華,等.土壤及水質條件與莼菜生長的關系[J].四川農業大學學報,2000,18(3):265-268.

[15] 馬成亮,王家蓮.莼菜的栽培與利用[J].特種經濟動植物,2002(5):36.

[16] 李桂娟,孫淑鳳,樓憲英.莼菜無公害高產栽培技術[J].北方園藝,2009(12):153.