神經(jīng)元特異性烯醇化酶對手足口病重癥病例診斷的臨床意義

溫大科，徐曉華，陳旭光，李天宇

神經(jīng)元特異性烯醇化酶對手足口病重癥病例診斷的臨床意義

溫大科，徐曉華，陳旭光，李天宇

目的探討手足口病（hand footand mouth disease,HFMD）患兒的血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specific enolase,NSE）水平對重癥病例診斷的臨床意義。方法收集2011年4月—2012年11月在本院兒內(nèi)科治療的320例HFMD患兒的臨床資料，按臨床表現(xiàn)分為輕癥組（235例）和重癥組（85例）；按血清EV71抗體檢測結果分為陽性組（89例）和陰性組（231例）。同時以在本院保健科體檢的75名健康兒童為對照組，應用電化學發(fā)光法測定血清NSE水平。比較分析HFMD組和對照組、EV71抗體陽性組和陰性組、輕癥組和重癥組、HFMD并發(fā)顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復期的NSE水平。結果血清NSE水平比較，HFMD組高于對照組；EV71抗體陽性組明顯高于陰性組；重癥組明顯高于輕癥組；重癥顱內(nèi)感染患兒發(fā)病期高于恢復期（P均＜0.05）。結論HFMD患兒血清NSE水平升高，尤以EV71抗體陽性組最為明顯。NSE水平越高，病情相對越重。NSE水平不僅是反應HFMD病程的可靠指標，也是判斷病情加重趨勢的有效指標。

手足口病；磷酸丙酮酸水合酶；中樞神經(jīng)系統(tǒng)

手足口病（hand,footandmouth disease,HFMD）是威脅兒童健康的常見傳染病之一，以5歲以下兒童發(fā)病居多[1-2]。HFMD由多種人類腸道病毒感染所致，如柯薩奇病毒A16型（coxsachievirus A16, CoxA16）、埃柯病毒和EV71等[3-4]，以EV71和CoxA16引起的HFMD最為常見[1-2]。多數(shù)患兒癥狀較輕，主要表現(xiàn)為發(fā)熱以及手、足、口、臀等部位出現(xiàn)皮疹；少數(shù)癥狀較重，病情發(fā)展迅速，并發(fā)顱內(nèi)感染，導致腎上腺素能神經(jīng)元功能先亢進后衰竭，進而發(fā)展為神經(jīng)源性肺水腫而死亡[3]。本文對HFMD患兒的臨床資料進行回顧性分析，現(xiàn)將結果報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象選取2011年4月—2012年11月在本院兒內(nèi)科治療的HFMD患兒320例（HFMD組），其中男185例，女135例，年齡7月齡～11歲，中位年齡3歲1個月。對照組為同期在本院保健科體檢的75名健康兒童，性別構成（男/女）為43/32，年齡7月齡～4.5歲。HFMD組和對照組在性別構成（χ2= 0.006，P=0.940）和年齡（t=0.602，P=0.549）上差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。

1.2 診斷標準HFMD的臨床治療、診斷和分型依據(jù)《手足口病診療指南（2010年版）》[5]。重癥HFMD診斷標準為有肌肉陣發(fā)性痙攣、心力衰竭、腦炎、肺水腫及急性弛緩性麻痹表現(xiàn)等。依據(jù)臨床表現(xiàn)分為輕癥組（235例）和重癥組（85例），重癥組中合并顱內(nèi)感染63例。所有患兒均行血清EV71抗體檢測，依據(jù)檢測結果分為陽性組（89例）和陰性組（231例）。

1.3 方法

1.3.1 樣品采集和血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specificenolase,NSE）水平測定HFMD組和對照組均在就診第1天抽取靜脈血3ml，用德國羅氏COBASE-601電化學發(fā)光儀行血清NSE水平測定，試劑盒采用德國羅氏診斷有限公司配套試劑。重癥顱內(nèi)感染者于治療第7天復查血清NSE水平。

1.3.2 EV71抗體檢測采集患兒血液標本，采用ELISA法檢測EV71抗體，試劑盒由北京萬泰生物藥業(yè)公司提供。

1.4 統(tǒng)計學處理采用SAS 9.0軟件進行統(tǒng)計分析。本研究均為計量資料，對各組計量資料數(shù)據(jù)先采用Shapiro-Wilk法和Levene法分別進行正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗，符合正態(tài)分布和方差齊性。數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，用±s表示。2組間比較采用成組t檢驗，治療前后比較采用自身配對t檢驗。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 HFMD組和對照組血清NSE水平比較HFMD組NSE水平顯著高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 HFMD組和對照組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 1 Com parison of serum NSE level between HFMD group and the control group(±s,ng/m l)

表1 HFMD組和對照組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 1 Com parison of serum NSE level between HFMD group and the control group(±s,ng/m l)

項目nNSE水平HFMD組32017.75±7.01對照組759.13±3.54 t值10.338 P值0.000

2.2 EV71抗體陽性組和陰性組血清NSE水平比較EV71抗體陽性組血清NSE水平明顯高于陰性組（P＜0.05）。見表2。

表2 EV71抗體陽性組和陰性組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of serum NSE level between antibody EV71 positive group and negative group(±s,ng/m l)

表2 EV71抗體陽性組和陰性組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 2 Comparison of serum NSE level between antibody EV71 positive group and negative group(±s,ng/m l)

項目nNSE水平陽性組8920.64±7.43陰性組23114.29±4.15 t值9.665 P值0.000

2.3 輕癥組和重癥組血清NSE水平比較重癥組NSE水平明顯高于輕癥組（P＜0.05）。見表3。

表3 輕癥組和重癥組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 3 Comparison of serum NSE level between the m ild group and the severe group(±s,ng/m l)

表3 輕癥組和重癥組血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 3 Comparison of serum NSE level between the m ild group and the severe group(±s,ng/m l)

項目nNSE水平輕癥組23513.52±4.18重癥組8524.40±5.99 t值18.189 P值0.000

2.4 重癥顱內(nèi)感染者發(fā)病期和恢復期血清NSE水平比較重癥顱內(nèi)感染恢復期血清NSE水平明顯低于發(fā)病期（P＜0.05）。見表4。

表4 重癥顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復期血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 4 Com parison of serum NSE level between children w ith severe intracranial infection at the onset phase and at the convalescent phase(±s,ng/m l)

表4 重癥顱內(nèi)感染發(fā)病期和恢復期血清NSE水平（±s，ng/m l）Table 4 Com parison of serum NSE level between children w ith severe intracranial infection at the onset phase and at the convalescent phase(±s,ng/m l)

項目nNSE水平發(fā)病期6330.21±7.74恢復期6323.65±6.38差值d6.56±3.65 t值14.265 P值0.000

3 討論

我國HFMD發(fā)病率近年明顯升高，重癥患兒的構成比有升高的趨勢，相應病死率有所上升[6]，導致該現(xiàn)象的原因尚不明確。有研究表明，HFMD發(fā)病率的上升與個體遺傳的敏感性、易感人群的累積及病毒重組變異有關[7-9]。EV71是重癥HFMD的主要病原體，與其他類型腸道病毒相比，致病性更強。國外研究者對HFMD死亡病例進行尸體解剖，結果發(fā)現(xiàn)EV71主要通過運動神經(jīng)通路感染中樞神經(jīng)，主要感染部位為下丘腦、腦干、脊髓和齒狀核。對病變組織進行病理研究發(fā)現(xiàn)，在神經(jīng)元及神經(jīng)細胞軸突上存在EV71抗原，提示該病毒具有嗜神經(jīng)性，可引起神經(jīng)細胞凋亡或變性壞死，導致病變發(fā)生[10-11]。運動神經(jīng)通路為EV71傳播的主要通路，HFMD患兒被EV71感染后發(fā)生的肺部水腫亦為神經(jīng)源性肺水腫，提示重癥HFMD主要是因EV71對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損傷所致。

由于神經(jīng)系統(tǒng)受損程度的不同，損傷較輕者臨床上可無明顯神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)，較重者才出現(xiàn)顱內(nèi)感染、神經(jīng)源性肺水腫和肺出血等，但一旦出現(xiàn)重癥表現(xiàn)，后遺癥發(fā)生率及病死率則明顯上升。因此阻止HFMD病情發(fā)展的關鍵是盡早發(fā)現(xiàn)及確診是否存在顱內(nèi)感染，并進行積極有效的早期干預治療[12]。

NSE是一種酸性可溶性蛋白質(zhì)，分子量78 KD，具有穩(wěn)定的理化性質(zhì)，在腦組織中廣泛存在，不存在于非神經(jīng)組織中。NSE作為反映神經(jīng)元損傷程度的敏感性和特異性指標，近年來受到廣泛關注。當神經(jīng)細胞受到損傷、崩解或變性時，血腦屏障通透性加強，NSE進入血液和腦脊液，血液及腦脊液NSE水平升高提示神經(jīng)系統(tǒng)可能發(fā)生了病理性改變。研究表明，血清NSE水平和腦脊液NSE水平成正相關，血清NSE和腦脊液NSE濃度與腦損傷程度呈正相關[13-14]。在臨床工作中由于不便取患者的腦脊液，因此常用靜脈血作為檢測樣本，血清NSE水平升高，提示可能存在顱內(nèi)感染。進一步結合腦脊液檢查結果可對顱內(nèi)感染進行早期診治，以減少重癥HFMD的并發(fā)癥，降低病死率。

本研究中HFMD組較對照組血清NSE水平升高，提示NSE水平對HFMD的病情評判是一個重要的實驗室指標。EV71抗體陽性組較陰性組NSE水平高，表明EV71較其他感染病毒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有更明顯的傷害。HFMD重癥組較輕癥組NSE水平升高，提示NSE水平可作為衡量HFMD病情嚴重程度的重要指標。重癥顱內(nèi)感染者恢復期血清NSE水平低于發(fā)病期，表明NSE水平與顱內(nèi)感染損傷程度呈正相關，是評判病情恢復情況的重要指標。

綜上所述，血清NSE水平升高提示HFMD患者可能存在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷，NSE水平變化和HFMD病情程度直接相關，血清NSE水平顯著上升可反映HFMD患者的愈后相對不良。由此可見，血清NSE水平可作為早期診斷、治療和病情程度判斷的重要指標，如結合腦脊液檢查結果對顱內(nèi)感染進行早期診治，對減少重癥HFMD的并發(fā)癥，降低病死率有十分重要的意義。

[1]胡南方.湖南省永興縣2008—2011年手足口病流行病學分析［J］.傳染病信息，2012，25(1):34-36.

[2]劉澤，劉紅雁，楊汝松，等.玉溪市2010—2011年重癥手足口病調(diào)查分析［J］.傳染病信息，2012，25(4):249-251.

[3]楊秀惠，嚴延生.手足口病的病原學研究進展［J］.傳染病信息，2008，21(3):129-131.

[4]王艷榮，潘東明，吳亞瓊，等.1323例手足口病流行病學特征及EV71檢測結果分析［J］.傳染病信息，2012，25(4):246-249.

[5]國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.手足口病診療指南（2010年版）［EB/OL］.［2013-06-10］.http://www.moh.gov.cn/publicfiles/business/htmlfiles/mohyzs/s-3586/201004/46884.htm.

[6]呂元聰.手足口病研究新進展［J］.應用預防醫(yī)學，2008，14(3): 189-192.

[7]何俊峰，山峰，趙娜，等.白細胞介素10-1082位點基因多態(tài)性與手足口病合并腦炎易感性研究［J］.中國實用兒科雜志，2011，26(8):578-581.

[8]韓偉平，陳宗波，韓振靚，等.白介素18啟動子區(qū)基因多態(tài)性與兒童EV71感染相關性研究［J］.現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2013，13(13): 2445-2449.

[9]李玉運，朱汝南，錢淵，等.腸道病毒71型北京分離株VP4基因序列及蛋白抗原性分析［J］.病毒學報，2011，27(3):207-214.

[10]Schmidt NJ,Lennette EH,Ho HH.An apparently new enterovirus isolated from patients with disease of the central nervous system［J］.J Infect Dis,2008,129(3):304-309.

[11]Chang LY,Hsiung CA,Lu CY,etal.Status of cellular rather than humoral immunity is correlated with clinical outcome of enterovirus 71［J］.Pediatr Res,2006,60(4):466-471.

[12]Nagata N,Iwasaki T,Ami Y,et al.Differential localization of neurons susceptible to enterovirus 71 and poliovirus type 1 in the central nervous system of cynomolgus monkeys after intravenous inoculation［J］.JGen Virol,2004,85(10):2981-2989.

[13]Waelgaard L,Dahl BM,Kvarstein G,etal.Tissue gas tensions and tissuemetabolites for detection oforgan hypoperfusion and ischemia［J］.Acta Anaesthesiol Scand,2012,56(2):200-209.

[14]Celtik C,Acuna?B,Oner N,et al.Neuron-specific enolase as a markeroftheseverityandoutcomeofhypoxic ischemic encephalopathy［J］.Brain Dev,2004,26(6):398-402.

（2013-07-23收稿 2013-10-03修回）

（責任編委 趙敏 本文編輯 陳玉琪）

Clinical significance ofmeasuring neuron-specific enolase in early diagnosis of severe hand,foot and mouth disease

WEN Da-ke,XU Xiao-hua,CHEN Xu-guang,LITian-yu*
Pediatric Department,Wuxi Children's Hospital,Wuxi,Jiangsu 214023,China
*Corresponding author,E-mail:wdkbaby@hotmail.com

Objective To evaluate clinical significance of the level ofneuron-specific enolase(NSE)in the diagnosis of children with severe hand,footandmouth disease(HFMD).M ethods The clinical data of 320 HFMD patients treated in the department of pediatrics of our hospital from Apr.2011 to Nov.2012 were collected.The patients were divided into a mild group(n=235)and a severe group(n=85)according to clinicalmanifestations,and an enterovirus(EV)71 antibody positive group(n=89)and an EV71 antibody negative group(n=231)according to the detection of antibodies against EV71.Seventy-five healthy children receiving physical examination in health care department of our hospital were selected as a control group.Chemiluminescence methods were used to detect serum NSE level in different groups,and the serum NSE levelwas compared between the HFMD group and the control group, between the EV71 antibody positive group and the EV71 antibody negative group,between themild group and the severe group,and between the onset phase and the recovery phase of HFMD complicated by intracranial infection.Results Serum NSE level in the HFMD group was significantly higher than that in the control group,that in the EV71 antibody positive group was significantly higher than that in the EV71 antibody negative group,that in the severe group was significantly higher than that in themild group,and that in the onset phase of HFMD complicated by intracranial infection was significantly higher than that in the recovery phase(P＜0.05).Conclusions The serum NSE level in HFMD children is significantly higher,especially in the EV71 antibody positive children.The higher the serum NSE level,the severer the condition.Serum NSE level is not only a reliable indicator reflecting the disease course of HFMD,but also an effective indicator predicting the severity of HFMD.

hand,foot and mouth disease;phosphopyruvate hydratase;central nervous system

R512.57；R345.5

A

1007-8134(2014)01-0035-03

214023，無錫市兒童醫(yī)院兒內(nèi)科（溫大科、徐曉華、陳旭光、李天宇）

李天宇，E-mail:wdkbaby@hotmail.com