二維混合法在尿液沙眼衣原體和淋球菌聚合酶鏈反應檢測中的應用

牛奇山

(鐵嶺衛生職業學院 1招生處， 2臨床教研室，遼寧 鐵嶺 112000)

沙眼衣原體感染是引起非淋球性尿道炎的主要原因，其所致的泌尿生殖道感染占非淋菌性尿道炎的40%～50%[1]。美國每年約有300萬青年與成人感染沙眼衣原體，我國近年來病例數也不斷增加。用核酸擴增方法檢測沙眼衣原體和淋球菌具有較高的靈敏度和特異度。研究發現，一維混合樣本檢測沙眼衣原體與單獨檢測的結果基本一致[2]。目前關于沙眼衣原體和淋球菌的二維混合樣本的設置及準確度還沒有文獻進行過評估，所以本研究對尿液標本進行沙眼衣原體和淋病的二維混合法研究。

1 材料和方法

1.1一般資料 99例男性性病患者均為2012年6月至2013年1月在開遠市勞教所服刑者(患者資料不宜公開)。所有患者均經病原學確診。

1.2方法

1.2.1基本步驟 每例患者留取清晨中段尿。分別用單獨檢測法、一維檢測法[2]和二維混合法對99份樣本進行檢測，檢測結果與病原學檢測結果進行比較，以判斷結果的特異度和靈敏度；同時，記錄每種方法消耗檢測池的個數，以根據經濟效益判斷方法的可行性。

1.2.2二維混合法 將待檢測樣本在第一次混合的基礎上再次進行交叉混合。按“9樣本一組”構成待檢測混合樣本。如果該混合樣本檢測為陰性，則9份樣本只需檢測一次；如果該混合樣本為陽性或抑制(抑制是由于尿液樣本中存在聚合酶鏈反應抑制因子而降低其檢測效率)，則按圖1方式進行二維交叉混合，即將9份樣本排列成3行3列的矩形(9=3×3)，然后將同行、同列的樣本分別進行第二次混合。……