流式細胞術在醫學檢驗教學中的實踐

李 巖，徐雪松

（1.首都醫科大學附屬北京友誼醫院臨床檢驗中心，北京100050；2.吉林大學中日聯誼醫院）

流式細胞術在醫學檢驗教學中的實踐

李 巖1，徐雪松2

（1.首都醫科大學附屬北京友誼醫院臨床檢驗中心，北京100050；2.吉林大學中日聯誼醫院）

流式細胞術是以免疫熒光標記技術為基礎，集光電檢測技術、計算機技術與單克隆抗體等技術為一體的現代檢測手段。該技術以其分辨率高、敏感性與特異性強、應用范圍廣泛、技術密集度高等特點，現已成為臨床診斷與科研領域廣受好評與不可或缺的一項新技術。

目前，在臨床實驗教學工作中，對于這項新型的重要實驗技術，仍較少被列入高等醫學院校的常規教學安排中，本單位針對此現象，對于2009－2010級首都醫科大學、北華大學醫學部與哈爾濱醫科大學的共21名臨床檢驗專業本科生，在其生產實習過程中安排了此項教學實踐，現將結果報告如下。

1 課程設計思路

由于流式細胞術是綜合了光學、電子學、流體力學、細胞化學、生物學、免疫學以及激光和計算機等多門學科和技術，因此涉及的知識點與基礎知識較多，而授課對象則是科研經歷與臨床知識相對比較薄弱的大學本科學生，因此需要有所取舍、突出重點進行講解。教學中，既要對相關基礎知識與概念進行理論介紹與闡述，同時也應安排相應的實驗與見習時間使學生對這項技術手段有更直觀了解與切身的體會，從而有助于其對所學理論知識的認識與深化，同時也能在實踐中提高學生的動手操作能力與科研意識。因此我們將課程設計為理論課以及實驗操作與見習課兩部分進行。其中理論課教學以流式細胞術的基本概念、檢測原理、應用領域等方面為重點進行講解。實驗操作與見習課則分別安排實驗操作部分與實驗報告解讀部分等內容。目的是通過這些課程設計，幫助學生直觀的了解和認識流式細胞術分析的全過程，從而為學生拓展思路、未來從事臨床與科研工作奠定基礎。

2 課程安排與授課要點

2.1 理論課教學：3學時

內容包括流式細胞術基本概念、檢測原理、實驗操作、結果分析、應用領域等方面。其中流式細胞術所用儀器的檢測機理與應用領域被作為講述重點。同時針對涉及到的基本概念也需要予以介紹。

流式細胞術所用儀器采用激光與電子技術，以單克隆抗體和熒光標記技術為反應體系，并用計算機系統對單個細胞進行多參數檢測并進行數據處理分析，具有檢測速度快、測量指標多、采集數據量大、分析全面、方法靈活等特點，具有分析的精確性、特異性和靈敏度高的特點。此儀器結構與技術復雜、先進，且不易掌握。因此，應制作形象直觀的儀器的結構圖與檢測的流程圖，結合動畫幻燈課件進行講解，以期使學生對于技術要點得到直觀與形象的了解與認識。

流式細胞術可以在短時間內分析數以百萬計的大量細胞，因此，如何對于海量數據進行后期分析，以及如何充分的發揮這項技術在臨床與科研活動中的價值，則是授課工作中的難點。在授課過程中，應將數據分析時不同細胞群的確認與設門原則作為講解重點，對于不同細胞群的抗原表型的特點與分化規律，則應抓住重點，避免面面俱到，應以特殊細胞群的最有代表性的抗原特點進行介紹，并密切結合舉例、圖表加以講解，重點闡述結果分析時的分析思路與判定原則。從而在有限的時間內將分析的原則與重點傳授給學生。

2.2 實驗與見習教學：6學時

實驗操作：4學時

淋巴細胞亞群檢測：包括樣本處理、抗體標記、細胞分離、上機檢測、細胞群設門、結果確認、報告分析與實驗報告撰寫等。

本項實驗操作安排，以血液標本中的淋巴細胞亞群檢查為思路，設計“正常人”標本、免疫缺陷病患者標本與免疫增殖性疾病患者標本各1組，共3組實驗，在2009級臨床醫學檢驗專業21名學生中進行實驗安排，實驗3個人為1組，共分7組進行。

本課程在此部分所安排的教學內容具有操作相對簡易、技術較為成熟以及代表性強的特點。通過此項實驗操作，有助于學生直觀的了解和認識流式細胞術的樣本制備、免疫標記、儀器檢測與結果分析的全過程。

首先，指導教師先向學生系統性講授相關的知識要點，基本實驗技能，講清操作要點及注意事項，并做必要的操作演示。然后，在教師的指導下，學生根據已經掌握的基礎知識，親自動手進行實驗操作。在上機檢測并采集數據后，由教師指導學生進行設門，檢測目的細胞群，并分析檢測結果，從而使學生對淋巴細胞亞群的特點與分析思路有了更直觀、全面的認識，進一步加深對所學知識的融會貫通。

病例報告解讀：1學時：

解讀急性粒細胞性白血病2例，急性淋巴細胞性白血病、慢性粒細胞性白血病、淋巴瘤與多發性骨髓瘤的骨髓標本檢測結果各1例，共6例。

在此部分教學，由帶教老師根據典型臨床病例的檢測結果，結合學生所學的臨床基礎知識進行講解與分析，突出知識點與診斷要點，將患者標本所表現出的細胞分化抗原的特征行異常變化作為重點，聯系臨床表現進行闡述。

提問與討論：1學時。

通過師生互動與交流，誘導學生能夠主動聯系所學知識，緊跟老師思路，啟發學生的學習興趣并拓展思路，以期取得良好的教學效果。

3 教學考核

3.1 考核內容

理論部分：占40%，包括基本概念、檢測原理、結果分析原則、應用領域等。

實驗報告：占30%。

病例分析：占30%，內容包括淋巴細胞亞群、急、慢性白血病的檢測結果分析原則與結論。

3.2 考核結果

參與考核人數21人，90分以上3人，81－90分10人，71－80分7人，61－70分1人。合格率：100%。

4 討論

培養學生的科研素質及創新精神、創新能力是深化高等醫學教育教學改革根本性的指導思想［1］，在實驗醫學與檢驗醫學本科生及研究生的教學工作中開設流式細胞術課程，有利于拓寬學生的視野和改善學生的知識結構，提高學生的綜合素養、創新能力與科研素質，有利于培養更多的合格人才。同時可以培養學生的自學能力與科研能力，是提高學生綜合能力的有效方法。

本次教學工作將流式細胞術檢測方法、免疫學中的抗原抗體反應的基本原理、光電檢測技術、計算機技術、細胞化學與生物學、病理生理學等多門課程中的知識點聯系起來，讓學生體會到了知識的協調性、聯系性。調動了學生的主觀能動性，訓練了學生的實驗操作技能，同時加深了學生對理論知識的理解和掌握。教學過程中，教師講理論知識與實踐活動密切結合，既考察理論重點、知識點的掌握，也注重指導教學實踐活動中的動手能力、理論聯系實際的能力、實驗習慣、分析與解釋試驗結果的能力等。通過撰寫實驗報告，訓練學生的邏輯思維能力和歸納總結能力。

本次實驗選擇的實驗項目與臨床和科研的關系相對密切，提高了學習的趣味性，增加了學生動手的機會，培養了學生獨立思維能力與科研協作能力，幫助學生把多種不同學科的知識有機地融為一體，為未來的科研實驗活動打下基礎。

［1］王曉楠，吳正升，劉 淼.綜合性實驗在病原生物學與免疫學實驗教學中應用初探［J］.安徽醫藥，2012，16（6）：865.

2013－08－16）

1007－4287（2014）10－1740－02