CIK細胞經中心靜脈導管胸腔灌注治療惡性胸腔積液32例

孫春華 柏淳 許永萍 朱珍英

CIK細胞經中心靜脈導管胸腔灌注治療惡性胸腔積液32例

孫春華 柏淳 許永萍 朱珍英

惡性胸腔積液是惡性腫瘤侵犯胸膜或原發于胸膜本身的惡性腫瘤引發的并發癥，其出現提示腫瘤晚期[1]。常可引起患者呼吸困難、咳嗽、胸痛，嚴重影響患者生活質量，治療胸腔積液對改善患者生活質量及延長生存期有重要意義。應用單純胸腔穿刺抽液或全身化療及常規藥物胸腔內注射，療效較差，復發率高[2]。我院應用中心靜脈導管閉式引流聯合細胞因子誘導的殺傷細胞（CIK細胞）胸腔灌注治療惡性胸腔積液患者32例，效果滿意，現報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 2011-10—2012-06我院收治的32例惡性胸腔積液患者，均通過胸腔積液細胞學確診為惡性腫瘤，其中男19例，女13例；年齡40～76歲，中位年齡58歲?；颊逰PS評分＞60分，預計生存期＞3個月。原發腫瘤中肺癌19例，乳腺癌5例，食管癌2例，胃癌3例，結直腸癌2例，B細胞惡性淋巴瘤1例。所有患者均經X線胸片及B超檢查證實為中等量以上的胸腔積液，既往無胸腔內用藥史。治療前心電圖、血常規、肝、腎功能檢查正常，患者均簽署治療知情同意書及穿刺同意書。

1.2 CIK細胞的制備 采用人外周血淋巴細胞分離液分離并收集患者外周血單個核細胞，洗滌后將細胞以2×106個/ml的密度懸浮于RPMI 1640完全培養液中，加入γ-干擾素1 000U/ml，置于37℃、CO2體積分數為5%的條件下培養24h，再加入抗CD3單克隆抗體100ng/ml、IL-2 1 000U/ml繼續培養，每2～3d傳代一次，并補加完全培養液及IL-2。細胞培養至10～14d經檢測無污染后，收集CIK細胞，洗滌后以0.9%氯化鈉溶液40ml重懸。

1.3 CIK細胞的表型及病原學檢測 CIK細胞誘導培養至第10天時，以流式細胞儀檢測細胞表面CD3、CD4、CD8和CD56等表面抗原的表達情況，要求CD3+CD56+細胞比例不低于20%，CD3+CD8+細胞比例不低于40%，微生物學檢測結果為陰性。

1.4 治療方法 患者均取坐位或半臥位，根據B超定位選擇穿刺點，置入中心靜脈導管持續引流，控制速度＜200ml/h，引流完畢后，經中心靜脈導管注入CIK細胞3.3×109個/次，1次/3d，共3次，輸注完畢夾閉導管36h。注藥后囑患者變換體位使藥物與胸膜充分接觸。灌注前予吲哚美辛栓50mg塞肛，至胸腔積液引流量＜50ml/d時撤管。

1.5 療效評定 按照WHO癌性滲液療效判定標準分為：（1）完全緩解（CR）：胸腔積液完全消失并維持4周以上；（2）部分緩解（PR）：胸腔積液減少50%以上，癥狀緩解并維持4周以上；（3）無效（NC）：胸腔積液未減少或4周內復發，癥狀無好轉?？傆行剩≧R）=（CR+ PR）/總例數×100%。生活質量評價根據治療后患者KPS評分，改善：增加10分以上者；穩定：增加或減少未超過10分者；減退：減少10分以上者。

2 結果

2.1 近期療效 治療1個月后對患者進行X線胸片及B超復查以評價療效。32例患者RR為84.38%，其中CR 16例（50.00%），PR 11例（34.38%），NC 5例（15.62%）。

2.2 生活質量 治療后再次對患者進行一般狀況KPS評分，其中改善23例（71.88%），KPS評分增加10～30分；穩定7例（21.88%），KPS評分增加或減少未超過10分；減退2例（6.25%），KPS評分減少10分以上。

2.3 不良反應 治療中2例患者（6.25%）出現中低度發熱，1例體溫 37.8℃，4h后自行緩解；1例體溫38.7℃，經吲哚美辛栓50mg塞肛后緩解，無一例患者出現胃腸道反應及骨髓抑制。

3 討論

CIK細胞是將人外周血單個核細胞在體外用多種細胞因子共同培養一段時間后獲得的一群異質細胞[3]，具有T淋巴細胞強大的抗瘤活性和NK細胞非主要組織相容性復合體限制性抑制腫瘤生長的特點[4]，其主要效應細胞為CD3+CD56+雙陽性。CIK細胞通過下列幾種途徑殺滅腫瘤：（1）通過黏附因子LFA/ICAM-1途徑與腫瘤細胞結合后，分泌含大量BLT酯酶的顆粒，這些顆粒能穿透靶細胞膜，導致腫瘤細胞的裂解[5]。（2）CIK細胞能分泌IL-2、IL-6、TNF-α及粒單細胞集落刺激因子等細胞因子，增強細胞毒作用，直接抑制腫瘤細胞的增殖。還可通過對免疫系統的調節來間接殺傷瘤細胞[6]。（3）CIK細胞可以通過表達FasL誘導腫瘤細胞凋亡[7]。另外CIK細胞分泌的IL-2等細胞因子可以產生非特異性炎癥，使胸膜粘連固定，從而阻止胸腔積液的生成。

本結果顯示，CIK細胞經中心靜脈導管胸腔灌注治療惡性胸腔積液RR達84.38%，不良反應主要為中低度發熱，患者可耐受，無一例出現胃腸道反應及骨髓抑制，大部分患者生活質量均得到不同程度改善。

[1] 劉志聰,崔恩海,王斌,等.重組人血管內皮抑素聯合卡鉑治療惡性胸腔積液療效觀察[J].浙江中西醫結合雜志,2011,21(11):784-785.

[2] 陳碧茵,歐陽學農.惡性胸水的治療現狀[J].實用癌癥雜志,2006,21(2): 222-224.

[3]栗敏,梅家轉,劉桂舉.厄洛替尼聯合CIK細胞治療EGFR基因突變的肺腺癌[J].天津醫藥,2013,41(10):1017-1018.

[4]羅光華,馬鳴,郭莉莉,等.CIK細胞治療對腫瘤患者外周血免疫細胞亞型的影響[J].中國腫瘤生物治療雜志,2013,20(4):475-477.

[5] Sun S,LiXM,LiXD,et al.Studies on inducing apeptosis effects and mechanism of CIK cells for MGC-803 gastric cancer cell lines[J]. Cancer Biother Radiopharm,2005,20(2):173-180.

[6] Wei XC,Zhai XH,Han XR,et al.Biological activity of DC-CIK cells and its effect against leukemia cells in vitro[J].Zhongguo Shi Yan Xue Ye Xue Za Zhi,2008,16(5):1150-1153.

[7] 張輝,趙群,左連富,等.細胞因子誘導的殺傷細胞對卵巢癌耐藥細胞SKOV3/CDDP的作用機制[J].細胞與分子免疫學雜志,2007,23(12): 1167-1169,1171.

2013-06-25）

（本文編輯：胥昀）

314000 嘉興，武警浙江省總隊嘉興醫院腫瘤科