化學發光免疫分析技術在跟蹤兒童乙型肝炎疫苗免疫效果中的動態觀察

李華榮

化學發光免疫分析法(CLIA)是把免疫反應與發光反應結合起來的一種定量分析技術。既具有發光檢測的高度靈敏性，又具有免疫分析法的高度特異性。該技術其靈敏度高于包括放射免疫(RIA)、酶聯免疫(EIA)在內的傳統檢測方法。在以往評定乙型肝炎(乙肝)疫苗免疫效果，檢測人群中乙肝表面抗體(抗-HBs)陽性率及濃度值沒有理想的定量檢測手段，只能采取定性或半定量方法，使之在制訂乙肝免疫規劃時受到制約。吉林省白城市疾控中心2011年8月首次應用化學發光免疫分析新技術，跟蹤兒童乙肝疫苗免疫效果的動態指標。使吉林省白城市3～11歲兒童抗-HBs的陽性率及抗體濃度雙項指標得以量化，為乙肝免疫規劃工作提供了科學、客觀、動態的參考數據。下面就其新技術應用情況簡述如下。

1 材料與方法

1.1 儀器設備 化學發光免疫分析儀，由安圖實驗儀器(鄭州)有限公司生產，產品型號Lumo，化學發光法抗-HBs檢測試劑盒由鄭州安圖生物工程股份有限公司生產。

1.2 檢測對象 采用多階段、分層、整群抽樣方法，對2003～2010年出生兒童為檢測對象。在注射疫苗前檢測抗-HBs濃度，由專職護士采取靜脈血3 ml，送檢驗室檢測，檢測結果以＜10 mIU/ml為陰性，對乙肝病毒(HBV)感染無保護性，需注射乙肝疫苗。≥10 mIU/ml為陽性，對普通人群具有足夠的保護作用［1］。暫時無需注射乙肝疫苗。除此之外，要登記其姓名、性別、出生年月、乙肝疫苗初免完成情況 、初免注射乙肝疫苗劑量、乙肝患病家族史等相關內容。2年期間，共檢測3～11歲兒童1248名，其中男性575名，女性673人，男女性別比為1∶1.17。

1.3 檢測方法 將3 ml靜脈血離心沉淀，取無溶血、無乳糜的血清檢測。使用上述專用儀器，專用試劑盒，嚴格按操作規程檢測。試劑盒效期內使用。

2 結果

2.1 被檢測兒童，抗-HBs陽性率達73.56%，抗-HBs≥10 mIU/ml，平均濃度771.63 mIU/ml，并隨著年齡增長雙項指標均呈下降趨勢，見表1。

表1 1248名兒童抗-HBs陽性、濃度值檢測結果

3個年齡組間抗-HBs陽性率，經統計學處理χ2=51.86，P＜0.01差異有統計學意義。

2.2 男女性別間抗-HBs陽性率及抗體濃度值檢測結果，見表2。

表2 1248名兒童男女性別間抗-HBs陽性、抗體濃度檢測結果

男女性別間陽性率經統計學處理，χ2=1.36，P＞0.05，差異無統計學意義。

3 討論

進入21世紀以來，乙肝疫苗不但在新生兒中普種，并已在成人中廣泛應用，其免疫效果已經得到了充分肯定。隨著衛生知識的普及及人群對身體健康的關注，人們逐漸認識到，用注射疫苗預防疾病是最經濟、最有效的手段。實踐證明通過接種乙肝疫苗而產生的保護性抗體不但可以預防乙肝，又可以減少因乙肝而引起的肝硬化、肝癌的發生。可以說，它不但是乙肝疫苗，它也是肝硬化疫苗、肝癌疫苗。

吉林省白城市于1991年按衛生部《全國乙肝疫苗免疫接種方案》的要求，已把乙肝疫苗納入新生兒計劃免疫方案。乙肝計劃免疫20年來，對于兒童的抗-HBs免疫效果，一直沒有確切的量化指標。本次檢測方法采用最先進的化學發光免疫分析技術，搜集2年來的1248名3～11歲兒童血清樣本，跟蹤檢測，使本市兒童乙肝計免結果科學客觀地反映出來，為今后制定免疫規劃提供了科學依據。

乙肝傳播途徑主要是血液、胎傳和接觸性傳播。經口腔傳播乙肝的問題已經得到證實［2］。白城市中小學生吃“小飯桌”的比較多，又有生日聚會或經常光顧德克士、肯德基快餐、街頭食品作坊等餐飲場所，除需預防血液傳播和母嬰途徑傳播外，更要防止“密切接觸”中的經口傳播乙肝。這就需要計免工作者對兒童中抗-HBs濃度值＜10 mIU/ml的陰性易感者實施加強免疫措施。對于抗-HBs≥10 mIU/ml的兒童，什么時間需加強乙肝疫苗免疫則視其抗-HBs濃度的高低而定，濃度值越高，加強免疫的時間可適當延長。此次檢測結果顯示，在男女性別的抗-HBs陽性率分別為71.48%和75.33%，χ2=1.36，P＞0.05，其差異無統計學意義，這一結果與相關報道不相一致［3］，可能存在地區間差異，或者與使用的疫苗生產廠家不同及與抽樣誤差有關。

在乙肝計劃免疫實施以前，我國人口平均乙肝表面抗原(HBsAg)感染率為10%［4］，可謂是“肝炎大國”，計免實施后的2009年白城市3～5歲兒童HBsAg感染率就降至0.55%［5］取得驕人的計劃免疫成果。然而，這不應該是引為驕傲的理由，要想鞏固這一成果是要付出艱辛的努力。因為通過本次檢測結果得知，雖然新生兒出生后按免疫程序接種了3針5 μg乙肝疫苗。并且到3～5歲時保護性抗體陽性率仍達83.38%，抗體濃度在878.04 mIU/ml。但是隨著年齡的增長，到6～8歲、9～11歲兩個年齡段時，乙肝抗體保護率下降至78.00%和62.34%，抗-HBs平均濃度值分別降至732.48 mIU/ml和704.36 mIU/ml，并且各年齡組間抗-HBs陽性率差異有統計學意義，(χ2=51.86，P＜0.01)。這說明出生后雖然全程接種了乙肝疫苗，但當生長至3～5歲、6～8歲、9～11歲三個年齡段時分別有 16.62%、22.00%和37.66%的兒童有感染HBV的風險。全國高等醫藥院校教材，《傳染病學》第八版，認為接種后隨著時間的推移，部分人抗-HBs水平會逐漸下降，如果少于10 mIU/ml，需加強注射一次［6］，為了掌握這部分人的抗-HBs水平，就必須實施跟蹤監測，以掌握其抗-HBs的動態指標，適時加強注射乙肝疫苗，提高這部分易感者的抗-HBs免疫水平是我們疾控工作者需要努力的目標。

［1］鄭州安圖生物工程股份有限公司.乙型肝炎病毒表面抗體定量檢測試劑盒(化學發光法)說明書，2013.

［2］薛承巖.經口腔途徑傳播和感染乙型肝炎病毒的調查.中華流行病學雜志，1988(1):21-22.

［3］林平，朱靈芝.365名小學生接種國產酵母乙肝疫苗5年免疫效果觀察.疾病控制雜志，2004，8(1):79.

［4］駱抗生.乙型肝炎基礎與臨床.北京:人民衛生出版社，1997:187.

［5］劉權，周湛，崔柏峰，等.白城市3～5歲兒童乙型肝炎疫苗免疫效果評價.中國計劃免疫，2007，13(1):53.

［6］李蘭娟，任紅.傳染病學.北京:人民衛生出版社，2013:43.