Ghrelin對膿毒癥肺損傷大鼠肺泡巨噬細胞及肺組織iNOS表達的影響*

何婉媚， 曾 勉， 易 慧， 蔣玉潔， 常敏嬋

(中山大學附屬第一醫院MICU，廣東 廣州 510080)

Ghrelin對膿毒癥肺損傷大鼠肺泡巨噬細胞及肺組織iNOS表達的影響*

何婉媚， 曾 勉△， 易 慧， 蔣玉潔， 常敏嬋

(中山大學附屬第一醫院MICU，廣東 廣州 510080)

目的觀察ghrelin對膿毒癥肺損傷大鼠肺泡巨噬細胞及肺組織誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表達的影響。方法SD雄性大鼠分為假手術組、膿毒癥組及ghrelin治療組，前2組各設術后6 h、12 h和20 h亞組。通過盲腸結扎穿孔術(cecal ligation and puncture, CLP)建立膿毒癥模型，ghrelin治療組于術后3 h及15 h腹腔注射ghrelin，術后20 h取材。各組按術后既定時間行支氣管肺泡灌洗收集肺泡巨噬細胞，RT-PCR檢測肺泡巨噬細胞中iNOS mRNA的表達水平。另一部分大鼠則在術后20 h采集右肺，行肺病理學檢查及Western blotting檢測肺組織iNOS蛋白表達。結果膿毒癥組在CLP術后6 h、12 h和20 h肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達水平分別為1.33±0.05、1.44±0.08和1.57±0.11，均高于假手術組(P<0.05)，并不隨時間延長而升高；但在術后20 h卻低于ghrelin治療組(2.27±0.37；P<0.05)。Ghrelin治療組CLP術后20 h肺組織iNOS蛋白表達水平(0.87± 0.03)低于膿毒癥組(P<0.05)。Ghrelin治療組肺組織病理學評分(5.83±0.477)較膿毒癥組(7.83±0.75)低，2組均高于假手術組(P<0.05)。結論CLP術后6～20 h，大鼠肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達水平升高，但無時間依賴性。Ghrelin對膿毒癥大鼠肺泡巨噬細胞iNOS mRNA表達起上調作用，而對肺組織iNOS蛋白表達起抑制作用，減輕肺損傷程度。

Ghrelin； 膿毒癥； 肺損傷； 一氧化氮合酶； 肺泡巨噬細胞

生長激素釋放肽ghrelin是1999年在大鼠體內發現的一種由28個氨基酸組成的內源性的生長激素釋放激素受體的配體。人們發現外源性給予ghrelin可使急性肺損傷(acute lung injury, ALI)動物的肺損傷程度和死亡率下降[1-2]，這與ghrelin抑制NF-κB活化的作用有關[2]。NF-κB調控包括誘導型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在內的多種物質的轉錄，激活NF-κB可增加iNOS mRNA的表達[3]。Chen等[1]在含肺泡巨噬細胞的培養皿中加入脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)和ghrelin后發現，培養液中的一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS)活性提高。iNOS與ALI的發生發展關系密切。敲除iNOS基因的小鼠在注射LPS后，肺損傷的程度較野生型小鼠顯著減輕[4]。此外，肺泡巨噬細胞等炎癥細胞內iNOS的活性可影響膿毒癥肺部微血管的通透性與氧化應激的程度[5]。這與ghrelin改善肺損傷的作用似乎存在矛盾。另一方面，目前的研究顯示ghrelin對iNOS表達的影響不一[6-9]，國內外尚未見ghrelin對ALI肺泡巨噬細胞和肺組織iNOS表達的影響的研究報道。為更好了解ghrelin對膿毒癥肺組織iNOS表達的影響，我們建立盲腸結扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)所致的膿毒癥肺損傷大鼠模型，擬通過體內實驗觀察不同時點肺泡巨噬細胞iNOS的表達水平變化以及外源性給予ghrelin對肺泡巨噬細胞和肺組織iNOS表達的影響，探討ghrelin對ALI的影響程度，為其應用于臨床提供更多的理論依據。

材 料 和 方 法

1動物和實驗分組

動物選自中山大學北校區動物實驗中心提供的SPF級健康雄性SD大鼠，體重280～330 g，動物使用許可證分別為SCXK(粵)2009-0011和SYXK(粵)2007-0081。將80只大鼠隨機分配至10個組，分別為A、B、C、D、E、F、G、H、I和J組，每組8只大鼠。B、D、F和I組均通過CLP建立膿毒癥模型[膿毒癥組(CLP組)]，G和J組在建立CLP模型后3 h及15 h給予ghrelin干預[ghrelin治療組(CLP+ghrelin組)]，A、C、E和H組行假手術[假手術組(sham)]。A和B組及C和D組分別在術后6 h及12 h行支氣管肺泡灌洗，E、F和G組則在術后20 h行支氣管肺泡灌洗。H、I和J組各組均于術后20 h處死大鼠，采集右上肺葉存于-80 ℃備用，右下肺葉置于10%中性甲醛固定液中。

2膿毒癥模型制作

采用CLP制作膿毒癥模型，術前不禁食、水。實驗過程中動物處置方法符合動物倫理學標準。1%戊巴比妥 50 mg/kg腹腔注射麻醉，常規消毒，沿腹正中線作2 cm切口，距回盲瓣0.5 cm的部位予3/0縫合線環形結扎盲腸，用18號注射器針頭貫通穿刺盲腸2次，輕輕擠壓腸管使腸道內容物自穿刺孔溢出，原位回納盲腸，逐層縫合關腹。術后立即皮下注射無菌生理鹽水30 mL/kg，以補充術中體液丟失及抗休克。假手術組則在找到盲腸后，將其外置于腹外2 min后按原位回納腹腔，余步驟同手術組。

3藥物干預

G組及J組于術后3 h及15 h腹腔內注射ghrelin(Enzo產品)。按文獻資料[2,10]，注射藥物總劑量為40 nmol/kg，按時點每次給予20 nmol/kg，溶解于1 mL生理鹽水后注射；其余各組注射1 mL生理鹽水作為對照。

4標本采集

4.1支氣管肺泡灌洗及肺泡巨噬細胞的收集與純化 參照文獻[1]方法提取及純化肺泡巨噬細胞。按既定時間將大鼠的氣管切開插入氣管導管，分3次經導管緩慢注入無菌生理鹽水，共15 mL，支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)回收率大約85%～90%。將BALF離心(4 ℃、800 r/min)10 min，棄上清，無菌PBS液洗滌細胞沉淀物2次，加入含10%胎牛血清的完全DMEM培養液制成細胞懸液，臺盼藍染色判斷細胞存活率>90%。調整細胞數為2×109/L后種板(35 mm細胞培養皿)，于5% CO2、37 ℃培養箱中孵育2 h后，獲得貼壁的純化肺泡巨噬細胞。經瑞氏-姬姆薩染色鑒定該方法獲得的貼壁肺泡巨噬細胞純度>90%。

4.2肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的檢測 按Trizol試劑說明書提取細胞總RNA，按RT試劑盒合成cDNA，PCR擴增：PCR引物由上海生工生物公司合成，iNOS上游引物5′-CCT GGA GGT TCT AGA TGA GAG T-3′,下游引物5′-CTT CAG GTT ATT GAT CCA AGT G-3′；iNOS擴增片段為451 bp。β-actin上游引物5′-CCA TTG AAC ACG GCA TTG-3′,下游引物5′-TAC GAC CAG AGG CAT ACA-3′。β-actin擴增片段為234 bp。反應條件：94 ℃預變性3 min，94 ℃ 45 s，60 ℃ 30 s，72 ℃ 45 s，72 ℃補平5 min，內參照基因28個循環，目的基因38個循環。2%瓊脂糖凝膠電泳，溴化乙啶染色，紫外線燈下觀察拍照，用Gel-Pro Analyzer圖像分析軟件進行半定量分析，以iNOS/β-actin比值表示iNOS mRNA表達的相對水平。

4.3Western blotting測定肺組織iNOS 研磨、裂解右上肺葉提取組織總蛋白，取20 μg變性后蛋白提取液進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，轉至PVDF膜，封閉，I抗(Abcam公司的抗iNOS多克隆抗體1∶500或β-actin單克隆抗體1∶1 000)4 ℃孵育過夜，兔II抗(1∶2 000)(廣州昂科公司)室溫孵育1 h，洗膜；應用增強的化學放射發光法(ECL)標記結合信號，X線曝光，以上操作每一樣品重復2次。采用Quantity One軟件進行圖像分析，以iNOS蛋白條帶吸光度值與對應β-actin蛋白條帶吸光度值間的比值對iNOS蛋白表達量進行半定量分析。

4.4肺組織病理檢查 右下肺葉組織予10%中性甲醛固定48 h后，脫水石蠟包埋制備石蠟切片，經透明、水化后，予蘇木素、伊紅染色，最后中性樹膠封片。光學顯微鏡下觀察支氣管黏膜、黏膜下、肺組織形態和炎癥細胞浸潤情況，于×200鏡下隨機選擇視野進行觀察，拍照，參照文獻[11]方法進行各項評分：分別對毛細血管內紅細胞、肺泡腔纖維蛋白及中性粒細胞滲出、氣道黏膜上皮細胞脫落以及肺泡間隔情況評分后計算各項的總分。

4.5CLP術后20 h的死亡率 觀察H、I和J 3組大鼠在CLP術后20 h內的死亡情況，并統計死亡率。

5統計學處理

統計分析用SPSS 13.0 for Windows 軟件處理，各組數據以均數±標準誤(mean±SEM表示)，方差齊者，采用方差分析進行分析；各組間多重比較采用LSD法進行分析，分類資料采用卡方檢驗分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1膿毒癥模型檢驗

于術后10 h隨機抽取模型組大鼠進行血培養，可見大腸埃希氏菌，本實驗成功復制了大鼠膿毒癥模型。

2肺泡巨噬細胞活力和純度的測定

臺盼藍染色后，倒置顯微鏡下計數100個細胞。鏡下巨噬細胞大部分呈圓形，折光性強。活細胞不著色，死細胞藍染，活細胞占計數細胞的百分比表示細胞活力，經檢測肺泡巨噬細胞活力均>90%，見圖1A。高倍鏡下觀察瑞氏-吉姆薩染色后的細胞形態，見圖1B，可見肺泡巨噬細胞細胞大小不一，核大藍染，呈腎形或橢圓形，多偏一側；胞質呈灰藍色，部分胞質內可見吞噬顆粒，如白色箭頭所示。計數100個細胞，肺泡巨噬細胞的百分比表示細胞純度，本實驗方法所得肺泡巨噬細胞純度均>90%。

Figure 1. Alveolar macrophages. A: trypan blue staining; B: Wright-Giemsa staining.

圖1肺泡巨噬細胞

3肺泡巨噬細胞iNOSmRNA表達

經紫外分光光度儀測定所提取RNA的A260/A280在1.8～2.0；經1%瓊脂糖凝膠電泳，可見各處理組總RNA 28S和18S區帶，且28S區帶亮度約為18S的2倍。

與假手術組比較，在6、12和20 h，膿毒癥組iNOS mRNA顯著升高(P<0.05，P<0.05，P<0.01)；術后20 h，ghrelin治療組較假手術組(P<0.01)及膿毒癥組(P<0.05)升高。然而在20 h內，膿毒癥組各時點之間的iNOS mRNA的表達無顯著差異，見圖2、表1。

Figure 2. RT-PCR analysis of iNOS mRNA expression in alveolar macrophages from each group. A, C, E: sham group; B, D, F: CLP group; G: CLP+ghrelin group.

圖2各組iNOSDNA瓊脂糖電泳條帶

表1肺泡巨噬細胞iNOSmRNA的表達水平

Table 1. The level of iNOS mRNA in alveolar macrophages(mean±SEM.n=8)

Group6h12h20hSham0．74±0．140．68±0．180．63±0．19CLP1．33±0．05#1．44±0．08#1．57±0．11#GLP+ghrelin//2．27±0．37#?

#P<0.05vssham；*P<0.05vsCLP.

4Ghrelin對CLP大鼠肺組織iNOS蛋白表達水平的影響

術后20 h，膿毒癥組(I組)與ghrelin治療組(J組)肺組織iNOS蛋白的表達水平較假手術組(H組)升高，差異有統計學意義(均P<0.01)；ghrelin治療組較膿毒癥組稍有降低，差異有統計學意義(P<0.01),見圖3、表2。

Figure 3. The expression of pulmonary iNOS protein in each group detected by Western blotting assay.

圖3各組大鼠肺組織iNOS蛋白的表達水平

5病理學HE染色

在大體肺組織中，可見膿毒癥組大鼠的肺組織腫脹，個別大鼠胸腔內有少量血性積液；假手術組肺組織表面光潔，呈粉紅色，未見出血點，無胸腔積液。Ghrelin治療組的肺組織腫脹，少許胸腔積液。在光學顯微鏡下可見，假手術組肺組織結構完整，氣道上皮細胞排列整齊，間質無水腫，個別標本可見小灶性炎癥細胞滲出，無出血，肺泡腔無水腫液、無透明膜(圖4A)。而膿毒癥組(圖4B)部分肺泡結構受到破壞，部分上皮細胞變形脫落，肺泡間質和肺泡腔有大量炎癥細胞浸潤，間質水腫明顯，部分有出血，有一例大鼠可見血管內微血栓形成，部分肺泡腔可見少許水腫液，具有ALI的病理改變。與假手術組比較，膿毒癥組、ghrelin治療組肺病理評分增加，有顯著差異，均P<0.01。而ghrelin治療組(圖4C)與膿毒癥組比較，肺組織病理損傷程度有所減輕(P<0.05)。各組病理學改變評分見表2。

6CLP術后20h大鼠的死亡率

CLP術后20 h，假手術組(H)大鼠無死亡(0/25)，膿毒癥組(J)和ghrelin治療組(J)的死亡率分別為68%(17/25)和45%(14/25)，2組間比較無顯著差異(P>0.05)。

Figure 4. Histopathological changes of the right lower lobe of lung (HE staining,×200) A: sham; B: CLP; C:CLP+ghrelin.

圖4右下肺組織HE染色

表2肺iNOS蛋白表達及肺組織病理學評分

Table 2. The expression of pulmonary iNOS protein and pulmonary histopathological score (mean±SEM.n=8)

GroupiNOSHistopathologicalscoreSham0．53±0．033．00±0．36CLP1．08±0．05#7．83±0．75#CLP+ghrelin0．87±0．03#?5．83±0．477#?

#P<0.05vssham；*P<0.05vsCLP.

討 論

膿毒癥是肺損傷最常見的病因[12]，CLP模型則一直被認為是膿毒癥的“金標準”模型[13]。經血流動力學監測，大鼠CLP術后5 h與20 h分別出現高動力循環與低動力循環表現，這2個時點分別被認為是膿毒癥的早期和晚期階段[14]。因此,實驗中我們主要觀察CLP術后6～20 h的大鼠肺內iNOS表達水平的變化。

肺內多種細胞，如肺泡巨噬細胞、血管內皮細胞、平滑肌細胞可表達iNOS[15]，后者在炎癥病理狀態下表達增加，并參與一系列病理生理的發生、發展。雖然肺泡巨噬細胞占肺泡灌洗液細胞總數95%，但在重癥感染下，卻以中性粒細胞為主，占90%以上[16]。本實驗中可獲得的肺泡巨噬細胞數目較少，因此本研究通過RT-PCR方法檢測肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達，結果顯示CLP術后6 h大鼠肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達水平已升高，提示炎癥感染刺激肺泡巨噬細胞活化，iNOS表達增加。然而隨著時間推移，膿毒癥組肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達水平在術后6～20 h內并沒有明顯變化。我們認為可能與細胞凋亡數目增加以致肺泡巨噬細胞 iNOS mRNA表達的總體水平不再上升有關。有文獻報道，CLP術后9 h和20 h大鼠肺泡巨噬細胞的凋亡數目比假手術組分別增加2.5倍和3.2倍[17]。我們在大鼠CLP術后3 h給予外源性ghrelin，觀察到術后20 h ghrelin治療組大鼠肺泡巨噬細胞iNOS mRNA的表達水平較膿毒癥組增高，提示ghrelin上調肺泡巨噬細胞 iNOS mRNA的表達。Chen等[1]則在孵育有原代肺泡巨噬細胞的培養基中同時加入LPS和ghrelin后也發現，培養上清液NOS活性較非ghrelin干預組增高。對于我們的研究結果與設想不一致，我們認為ghrelin除通過調控NF-κB抑制炎癥因子產生外，還可能通過某些機制抑制肺泡巨噬細胞的凋亡。目前有研究發現ghrelin可以減輕小鼠嚴重缺血肌皮組織細胞及糖尿病大鼠垂體泌乳細胞凋亡[7, 18]。Sudar等[9]對大鼠采用腦室內注射ghrelin后發現，大鼠心臟iNOS mRNA和蛋白表達上調，磷酸化Akt和ERK1/2增加，認為ghrelin通過Akt和ERK1/2信號通路途徑調控iNOS的表達。ERK及Akt信號通路可通過對抗凋亡蛋白或促凋亡蛋白的磷酸化作用參與抑制細胞凋亡的作用[19-20]。但凋亡是否在此起到作用，仍需進一步行相關實驗證實。

另一方面，我們發現ghrelin減弱膿毒癥急性肺損傷肺部iNOS蛋白表達，這可能是ghrelin對肺內不同細胞iNOS蛋白表達的影響不一所致。肺內多種細胞可以表達iNOS[15]，現有資料顯示ghrelin對iNOS既有上調也有抑制作用，提示ghrelin對不同細胞所產生的作用可能不同。譬如Minici等[6]的實驗結果顯示ghrelin有下調人血管內皮細胞iNOS的作用。肺組織病理結果顯示ghrelin治療組的肺損傷程度較膿毒癥組減輕，提示ghrelin有減輕肺損傷的作用，這可能與肺部iNOS的表達下調有關。此外，研究還發現ghrelin治療組與膿毒癥組在CLP術后20 h內的死亡率無明顯差異，但我們認為這與盲腸穿孔的病因未去除有關，日后的研究需要結合感染菌的毒力和菌負荷情況進一步分析。

[1] Chen J, Liu X, Shu Q, et al. Ghrelin attenuates lipopolysaccharide-induced acute lung injury through NO pathway[J]. Med Sci Monit,2008,14(7):BR141-BR146.

[2] Wu R, Dong W, Zhou M, et al. Ghrelin attenuates sepsis-induced acute lung injury and mortality in rats[J]. Am J Respir Crit Care Med,2007,176(8):805-813.

[3] Liu SF, Malik AB. NF-kappa B activation as a pathological mechanism of septic shock and inflammation[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol,2006,290(4):L622-L645.

[4] Kristof AS, Goldberg P, Laubach V, et al. Role of inducible nitric oxide synthase in endotoxin-induced acute lung injury[J]. Am J Respir Crit Care Med,1998,158(6):1883-1889.

[5] Farley KS, Wang LF, Law C, et al. Alveolar macrophage inducible nitric oxide synthase-dependent pulmonary microvascular endothelial cell septic barrier dysfunction[J]. Microvasc Res,2008,76(3):208-216.

[6] Minici F, Miceli F, Tiberi F, et al. Ghrelininvitromodulates vasoactive factors in human umbilical vein endothelial cells[J]. Fertil Steril,2007,88(4 Suppl):1158-1166.

[7] Granado M, Chowen JA, Garcia-Caceres C, et al. Ghrelin treatment protects lactotrophs from apoptosis in the pituitary of diabetic rats[J]. Mol Cell Endocrinol,2009,309(1-2):67-75.

[8] El Eter E, Al Tuwailiri A, Hagar H, et al.Invivoandinvitroantioxidant activity of ghrelin: Attenuation of gastric ischemic injury in the rat[J]. J Gastroenterol Hepatol,2007,22(11):1791-1799.

[9] Sudar E, Dobutovic B, Soskic S, et al. Regulation of inducible nitric oxide synthase activity/expression in rat hearts from ghrelin-treated rats[J]. J Physiol Biochem,2011,67(2):195-204.

[10] 謝襯梨，肖正倫，黎毅敏，等. 生長素釋放肽對急性肺損傷小鼠核因子κB和纖溶系統的干預作用[J]. 國際呼吸雜志,2010,30(6):333-336.

[11] Zhou X, Xue C. Ghrelin attenuates acute pancreatitis-induced lung injury and inhibits substance P expression[J]. Am J Med Sci,2010,339(1):49-54.

[12] Ware LB. Pathophysiology of acute lung injury and the acute respiratory distress syndrome[J]. Semin Respir Crit Care Med,2006,27(4):337-349.

[13] Buras JA, Holzmann B, Sitkovsky M. Animal models of sepsis: setting the stage[J]. Nat Rev Drug Discov,2005,4(10):854-865.

[14] Wu R, Zhou M, Cui X, et al. Ghrelin clearance is reduced at the late stage of polymicrobial sepsis[J]. Int J Mol Med,2003 ,12(5):777-781.

[15] Villanueva C, Giulivi C. Subcellular and cellular locations of nitric oxide synthase isoforms as determinants of health and disease[J]. Free Radic Biol Med,2010,49(3):307-316.

[16] 劉振千，俞森洋，劉 巖. 急性肺損傷大鼠肺泡內中性粒細胞凋亡的延遲[J]. 中國病理生理雜志,2003，19(5):636-638.

[17] Lu MC, Liu TA, Lee MR, et al. Apoptosis contributes to the decrement in numbers of alveolar macrophages from rats with polymicrobial sepsis[J]. J Microbiol Immunol Infect,2002,35(2):71-77.

[18] Rezaeian F, Wettstein R, Scheuer C, et al. Ghrelin protects musculocutaneous tissue from ischemic necrosis by improving microvascular perfusion[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol,2012,302(3):H603-H610.

[19] 馬蓮環，劉 建. ERK1/2的研究進展[J]. 國外醫學：生理、病理科學與臨床分冊,2005， 25(3):279-282.

[20] 韓彩萍，胡長林. PI3K/AKT信號通路與腦缺血神經細胞凋亡[J]. 國際神經病學神經外科學雜志,2006,33(1):88-91.

EffectofghrelinoniNOSexpressioninalveolarmacrophagesandlungtissuesinratswithsepsis-associatedlunginjury

HE Wan-mei, ZENG Mian, YI Hui, JIANG Yu-jie, CHANG Min-chan

(MedicalIntensiveCareUnit,TheFirstAffiliatedHospital,SunYat-senUniversity,Guangzhou510080,China.E-mail:zengmian2004@163.com)

AIM: To investigate the effect of ghrelin on inducible nitric oxide synthase (iNOS) expression in alveolar macrophages and lung tissues in sepsis-induced acute lung injury (ALI) rats.METHODSThe septic rat model was established by cecal ligation and puncture (CLP). Male SD rats were divided into sham group, CLP group and CLP+ghrelin group. The rats in the former 2 groups were further divided into 3 subgroups, which were 6 h, 12 h and 20 h post-operation groups. Ghrelin was administered by intraperitoneal injection at 3 h and 15 h after operation in ghrelin group. The samples were harvested 20 h after operation. The mRNA expression of iNOS in alveolar macrophages collected from bronchoalveolar lavage was detected by RT-PCR. The protein levels of lung iNOS were measured by Western blotting. The lung pathological examination was performed 20 h after operation.RESULTSIn CLP group, the mRNA expression levels of iNOS in the alveolar macrophages were 1.33±0.05, 1.44±0.08, 1.57±0.11 at 6 h, 12 h and 20 h after CLP, respectively, which were higher than that in sham group, but did not show time correlation. However, it was lower in CLP group than that in CLP+ghrelin group at 20 h after CLP (2.27±0.37,P<0.05). At 20 h after CLP, the protein level of lung iNOS was decreased in CLP+ghrelin group (0.87± 0.03) as compared with CLP group (1.08±0.05). Compared with sham group, the histopathological score was increased in both CLP group and CLP+ghrelin group, but it was lower in CLP+ghrelin group (5.83±0.477) than that in CLP group (7.83±0.75).CONCLUSIONGhrelin treatment improves the degree of ALI. During 6 h to 20 h after CLP, the mRNA expression of iNOS in alveolar macrophages was elevated, but the difference was not seen as the time went on. Ghrelin up-regulates the mRNA expression of iNOS in alveolar macrophages and inhibits iNOS expression in lungs of septic rats.

Ghrelin; Sepsis; Lung injury; Nitric oxide synthase; Alveolar macrophages

R515.3

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2013.05.022

1000- 4718(2013)05- 0895- 05

2012- 12- 30

2013- 04- 28

廣東省科技計劃(No.2008B030301057)

△通訊作者 Tel： 020-87755766； E-mail: zengmian2004@163.com