系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血淋巴細(xì)胞亞群分析

潘誠(chéng)志 施宗明 楊國(guó)宗

福建省漳州市中醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建漳州 363000

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）系一種自身免疫性疾病，表現(xiàn)為免疫系統(tǒng)紊亂，其病因和發(fā)病機(jī)制尚不明確。國(guó)外的Besedovsky等認(rèn)為SLE發(fā)病機(jī)制可能是內(nèi)外因素激發(fā)存在遺傳易感性個(gè)體，致機(jī)體免疫系統(tǒng)紊亂而發(fā)病，紊亂以產(chǎn)生自身抗體為主要特征，還包括免疫系統(tǒng)、細(xì)胞因子的免疫異常。為深入了解外周血淋巴細(xì)胞亞群變化規(guī)律，我院采用特異性熒光抗體標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)，探討SLE患者不同階段T淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞數(shù)變化，旨在為探討SLE發(fā)病機(jī)制提供一些的參考。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年11月—2012年9月該院內(nèi)科收治的33例SLE患者，其中男10例，女23例；年齡16～55歲，平均28.3歲。全部病例均符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的關(guān)于SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。采用1992年歐洲SLE活動(dòng)性評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)判定SLE病情活動(dòng)性。其中18例為活躍期，15例為緩解期（非活動(dòng)期）。同時(shí)選取前來(lái)檢查的健康體檢者13例作為對(duì)照組。2組在年齡、性別等方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑及儀器 選用美國(guó)BD公司生產(chǎn)的FACS Calibur流式細(xì)胞儀，F(xiàn)ACS溶血素。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)方法 抽取樣本外周血2 mL保存于肝素鈉抗凝管。在TrueCount管內(nèi)分別添入20 μL抗體和50 μL抗凝全血，充分搖勻后避光放置15 min。添入FACS溶血素2 mL，混勻后室溫避光10 min,1000 rpm/min離心5 min，離去上清，再加入2 mL PBS洗一次；1000 rpm/min離心5 min，離去上清。最后采用流式細(xì)胞儀上機(jī)檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+、CD19+等細(xì)胞。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

SLE活動(dòng)期、緩解組與健康對(duì)照組外周淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)情況比較，活動(dòng)期CD4+細(xì)胞數(shù)明顯少于健康對(duì)照組（P＜0.05），CD4+/CD8+比值也明顯降低（P＜0.05）；而CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞對(duì)對(duì)照組比較則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），CD19+（B）細(xì)胞數(shù)則均高于緩解組和對(duì)照組（P＜0.05），見表1.

表1 SLE活動(dòng)期、緩解組與健康對(duì)照組外周淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果比較

3 討論

SLE典型表現(xiàn)是免疫調(diào)節(jié)紊亂，導(dǎo)致體內(nèi)產(chǎn)生大量自身抗體和多系統(tǒng)受累，體內(nèi)T、B細(xì)胞異常活化[1]。一般情況下，正常免疫應(yīng)答是基于各種免疫細(xì)胞，尤其是T、B、NK等細(xì)胞亞群間的互相協(xié)作及制約。有研究證實(shí)[3]，淋巴細(xì)胞亞群在參與SLE發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的促進(jìn)作用。其中作為T細(xì)胞亞群的CD3+用于表達(dá)所有成熟T細(xì)胞表面，而其他的CD4+與CD8+細(xì)胞間的相互平衡和制約則主要調(diào)節(jié)對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答。若某一個(gè)T細(xì)胞亞群數(shù)量和功能出現(xiàn)異常，則可能就會(huì)出現(xiàn)免疫紊亂，隨即產(chǎn)生一系列病理變化。

關(guān)于淋巴細(xì)胞亞群異常與SLE發(fā)病之間存在的關(guān)系，目前成為國(guó)內(nèi)外臨床界研究的熱點(diǎn)。曾經(jīng)多數(shù)認(rèn)為CD4+或CD8+細(xì)胞增減變化會(huì)使CD4+/CD8+細(xì)胞比例失調(diào)，就此得出了SLE系CD8+細(xì)胞亞群數(shù)量減少而導(dǎo)致免疫功能亢進(jìn)所致這一結(jié)論。但本組資料顯示，SLE活動(dòng)期CD4+細(xì)胞數(shù)明顯減少，引起CD4+/CD8+比值隨之明顯降低（P＜0.05），而其他細(xì)胞亞群，除CD19+外，則在活動(dòng)期、緩解期和對(duì)照組間對(duì)比均無(wú)差異（P＞0.05）。Filaci G等[2]關(guān)于CD8+細(xì)胞數(shù)減少后果的研究報(bào)道認(rèn)為，SLE活動(dòng)期CD8+Ts細(xì)胞抑制功能受損，以至機(jī)體無(wú)法生成CD8+Ts細(xì)胞，而由于CD8+Ts細(xì)胞抑制功能受損屬可逆反應(yīng)，故SLE緩解期機(jī)體又會(huì)重新生成CD8+Ts細(xì)胞，這或許就是為何緩解組與健康對(duì)照組在CD8+對(duì)比差異不明顯的原因所在。

綜上所述，SLR在活動(dòng)期存在明顯的T細(xì)胞及其亞群數(shù)量分布異常現(xiàn)象，而T、B細(xì)胞亞群異常變化在SLE發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群對(duì)了解機(jī)體免疫狀態(tài)，并作出病情準(zhǔn)確判斷和治療意義重大。

[1] 張琳，張偉.系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)的生物標(biāo)志[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志，2010，23(9):783-785.

[2] 許坤，張永亮，張敬然.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的變化[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2010，14(29):391-393.

[3] 張福江.系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者外周血中淋巴細(xì)胞亞群變化[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9(14):1097-1098.