不同制備方法制備冰凍解凍去甘油紅細胞質量研究

王惟

不同制備方法制備冰凍解凍去甘油紅細胞質量研究

王惟

目的 考察全自動細胞處理儀ACP215和傳統(tǒng)手工制備冰凍解凍去甘油紅細胞的質量差異。方法 將采集40袋400ml全血隨機分2組, 全自動細胞處理儀ACP215組和傳統(tǒng)手工法分離組, 對制備成的冰凍解凍去甘油紅細胞進行血紅蛋白質量、游離血紅蛋白、白細胞殘留量、甘油殘留量的質量檢測。結果 全自動細胞處理儀ACP215制備血紅蛋白含量顯著高于傳統(tǒng)手工制備法, 甘油殘留量和游離血紅蛋白顯著低于傳統(tǒng)手工制備法, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05), 兩種制備方法的白細胞殘留量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。結論 全自動細胞處理儀ACP215制備的冰凍解凍去甘油紅細胞質量比傳統(tǒng)手工制備冰凍解凍去甘油紅細胞質量更好。

冰凍解凍去甘油紅細胞；質量差異；全自動細胞處理儀ACP215

冰凍解凍去甘油紅細胞主要適用于Rh(-)稀有血型紅細胞的長期保存, 供臨床稀有血型患者應急使用以及自身輸血提供方便［1］。加入甘油后紅細胞處于高滲狀態(tài), 必須用梯度洗滌方法去除甘油, 目前臨床應用的冰凍解凍去甘油紅細胞主要是機器和手工兩種制備方法, 隨著科技高速發(fā)展, 機洗冰凍紅細胞, 因其操作時間短, 洗滌后的Rh(-)紅細胞安全性及有效性均良好, 逐漸取代手工制備, 現將機洗ACP215制備冰凍解凍去甘油紅細胞和傳統(tǒng)手工制備冰凍解凍去甘油紅細胞進行質量比較, 現報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 復方甘油試劑(北京博德桑特)、三珠袋(北京博德桑特)、ACP215紅細胞洗滌耗材(美國血技)、9%氯化鈉(北京博德桑特)、0.9%氯化鈉(山東威高)、輸血器(江西洪達)、離心機(賀利氏6000I)、振蕩器(金壇市)、-80℃冰箱(三洋)、無菌接駁機(泰爾茂)、恒溫水浴箱(余姚市東方電工儀器廠)鎢酸鈉(天津化學試劑四廠)、氫氧化鈉(天津博迪化工)、乙二醇(天津富宇精細化工)、無水乙醇(沈陽華東試劑廠)、稀釋液(希森美康醫(yī)用電子有限公司)、酚酞(沈陽華東試劑廠)、高碘酸鈉(天津福晨化學試劑廠)、血漿游離血紅蛋白試劑盒(北京瑞爾達生物科技)、溶血劑(希森美康醫(yī)用電子有限公司)、山東威高濾白血袋。

1.2 取樣 采集40袋400 ml, 分A、B兩組。

1.3 方法

1. 3.1 甘油化方法 將去白細胞懸浮紅細胞或全血離心去上清, 將紅細胞移至三珠袋中加甘油, 在振蕩器上操作, 動作需輕柔。200 ml紅細胞加甘油160 ml, 控制加甘油速度先慢后快, 前8 min40滴/ min左右, 逐漸提高滴速80滴/min左右, 25 min左右加完。在室溫靜止30 min送-80℃速凍保存。1. 3.2 洗脫甘油(手工)：用梯度洗滌方法, 先用9%NaCl溶液每200 ml全血一袋80ml濃鹽, 先40滴/min左右,2 min后80滴/ min, 7-8 min加完, 靜止5 min, 再加入50 ml左右的0.9%NaCl, 速度控制在60滴/ min, 靜止5 min后離心,離心轉速2300轉, 離心時間為6 min。離心后去除上清, 再加0.9%NaCl 80~100滴/ min, 加150 ml左右離心, 離心轉速2300轉, 離心時間為6 min, 反復三次, 最后成品冰凍解凍去甘油紅細胞毛重為240 ml/U。

1. 3.3 ACP215制備：-80℃取出冰凍紅細胞, 放入37~42℃水浴箱內融化, 4~5 min/袋, 融化后靜止5 min, 利用無菌接駁機將血袋和ACP215全自動細胞處理儀的專用耗材連接,所使用洗滌耗材同手工制備。按照預先編制的程序, 自動洗滌冰凍解凍去甘油紅細胞。

1.4 統(tǒng)計學方法 數據采用t檢驗(P＜0.05)有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 檢測結果見表1。

表1 全自動細胞處理儀、手工制備質量比較

2.2 質量控制標準

血紅蛋白含量：≥32 g/L；游離血紅蛋白含量≤1g/L；白細胞殘留量≤4×107/L；甘油殘留量≤10 g/L［2］。

3 討論

-80℃冰凍保存紅細胞具有保存時間長、保存效果好的特點, 是目前最有效的紅細胞長期保存方法［3］, 是稀有血型輸血以及自身輸血重要手段。冷凍保存紅細胞, 既爭取了搶救時間, 又極大方便了臨床用血, 近年來ACP215全自動細胞處理儀在我國使用已逐步取代手工制備, 手工制備存在消耗時間比較長, 每U4 h左右, 并且是半開放式制備, 存在被污染的安全隱患。而全自動處理儀制備出冰凍解凍去甘油紅細胞屬全封閉式, 制備時間短, 耗時1 h左右, 縮短臨床患者等待搶救時間, 減少血液污染機率, 降低勞動強度, 洗滌效果良好, 實現血站自動化、標準化、規(guī)范化的制備模式, 機器制備是有效保證血液質量的前提。

［1］ 康惠軍, 葉萍. 臨床輸血等.北京:科學技術文獻出版社, 2006.

［2］ 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.全血及成分血質量要求. 2012.

［3］ 靳鵬, 劉安, 曹偉, 等.新型冰凍紅細胞洗滌機洗滌效果的研究.中國輸血雜志, 2005, 18(3):212-213.

130033 長春市中心血站