新型氨基甲酸乙酯人工抗原的分析表征方法研究

摘要 采用1（3二甲氨基丙基）3乙基碳二亞胺方法合成氨基甲酸乙酯（Ethyl carbamate， EC）新型人工抗原。將衰減全反射紅外光譜法（ATRFTIR）應用于人工合成抗原的表征分析，并結合熒光光譜分析EC人工抗原的偶聯效果以及載體蛋白質分子的二級結構變化；通過質譜結合紫外光譜、電泳方法進行人工抗原的系統表征，計算新型人工抗原中半抗原分子與載體蛋白質分子的偶聯比。結果表明： 合成路線合理，成功獲得了氨基甲酸乙酯新型人工抗原。人工抗原分子的α螺旋、β折疊和β轉角結構與載體蛋白質分子相比含量發生變化，人工抗原的熒光相圖滿足線性型態變遷關系，符合“二態模型”。氨基甲酸乙酯人工抗原分析表征的紅外衰減全反射方法、基質輔助激光解析飛行時間質譜法獲得的檢測結果與其它光譜方法、電泳方法表征結果一致，獲得人工抗原的偶聯比為15∶1～19∶1，EC新型人工抗原免疫小鼠抗血清的效價為1∶25600。

關鍵詞 氨基甲酸乙酯；人工抗原；紅外光譜；二級結構