基于核酸分子雜交的免疫芯片抗體固定新方法
2013-04-12 00:00:00沙莎殷赟高曉蓮黃莊榮余挺鄭曉冬
分析化學(xué) 2013年2期
摘要 基于核酸分子雜交原理構(gòu)建了一種新型抗體固定方法。先將抗體與寡核苷酸單鏈交聯(lián)，再將兩者的復(fù)合物與固相載體表面上的互補(bǔ)寡核苷酸鏈結(jié)合，從而將抗體固定到載體的表面。在磁珠表面對(duì)該固定方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，證明了方法的可行性。以本方法構(gòu)建了針對(duì)轉(zhuǎn)基因Bt Cry1Ac蛋白的免疫芯片，用Cy3標(biāo)記二抗對(duì)其探針固定效果進(jìn)行分析，并且在芯片上對(duì)Bt Cry1Ac蛋白進(jìn)行梯度濃度檢測(cè)試驗(yàn)。結(jié)果表明，以本方法構(gòu)建的抗體芯片，探針?lè)植季哂辛己玫奶禺愋裕惶结槍臃植季鶆颍翘禺愇叫。粰z測(cè)靈敏度達(dá)到0.01～0.05
SymbolmA@ g/L；此外，通過(guò)雜交核酸雙鏈的解離成功實(shí)現(xiàn)了芯片的再生，有助于解決傳統(tǒng)抗體固定方法中芯片不可再生的問(wèn)題。
關(guān)鍵詞 免疫芯片；抗體固定；抗體寡核苷酸復(fù)合物；核酸雜交
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