蛋白質(zhì)的反相液相色譜保留方程研究

摘要 要以胰島素、細(xì)胞色素C、溶菌酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白和肌紅蛋白5種標(biāo)準(zhǔn)蛋白為研究對(duì)象，將6種濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白在反相色譜（Waters Symmetry 300 C4、Waters Symmetry 300 C18、C8HC）的保留時(shí)間非線性擬合（CSASS軟件），獲得了5種蛋白質(zhì)在3種色譜柱的B方程，15個(gè)方程的回歸系數(shù)均大于0.999，證實(shí)方程可準(zhǔn)確地描述蛋白質(zhì)在反相色譜的保留規(guī)律。運(yùn)用該方程可預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)在其它梯度條件下的保留時(shí)間，預(yù)測(cè)值和實(shí)驗(yàn)值的相對(duì)誤差均小于5%。該方程還可用于蛋白質(zhì)混合物的梯度分離的優(yōu)化，20 min內(nèi)可實(shí)現(xiàn)5種標(biāo)準(zhǔn)蛋白的基線分離。

關(guān)鍵詞 蛋白質(zhì)； 反相色譜； 保留方程； 預(yù)測(cè)； 優(yōu)化