快速生物監測儀在高壓蒸汽滅菌效果監測中的應用

葉稱梅，華春燕（廣東省英德市人民醫院供應室，廣東 英德 513000）

生物監測是一種可靠的監測方法，是衡量滅菌質量的金標準，但傳統的生物監測手段需要進行細菌培養48 h才能出測試結果，特別是在植入物零風險管理應用上顯得時效性很差。2010年12月購置了一臺3M公司生產的快速培養自動閱讀器，并立即投入使用。對所有滅菌物品除進行1次/周常規傳統生物監測外，對植入性手術器械，植入物，外租手術器械進行每包每鍋次快速生物監測，自2010年12月～2012年5月開展253例次植入物及外租器械快速生物監測，全部合格，臨床沒有與植入物及滅菌后的無菌物品相關的感染報導。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：自2010年12月～2012年5月開展253例次植入物及外租器械快速生物監測，應用快速生物監測的同時，每周同時在同一標準包中放入傳統的生物監測指示劑進行生物監測1次，對2臺山東新華醫療器械有限公司生產的XG1.D型脈動真空壓力蒸汽滅菌器進行傳統生物監測分別為130次及123次。監測材料選用3M公司的3MTMAttestTM290快速生物培養監測/自動閱讀器及配套使用的3MTMAttseTM1292快速生物指示劑（嗜熱脂肪桿菌芽孢菌片）。滅菌器械是山東新華醫療器械有限公司生產的XG1.D型脈動真空壓力蒸汽滅菌器2臺，設定蒸汽壓力0.21 MPa、滅菌溫度132℃、脈動真空3次、滅菌時間10 min，測試包采用標準測試包。

1.2 監測方法

1.2.1 操作要求：具備醫院消毒員資格，持有高壓滅菌器操作上崗證，經過3M快速生物監測培養/自動閱讀器知識培訓。

1.2.2 標準測試包制作與器械包準備：取16條已洗滌的棉布巾（40 cm×65 cm），長邊折三折，然后對折，最后將折好的棉布巾疊放在一起（折疊邊左右擺放），制成15 cm×23 cm×23 cm的標準測試包，將嗜熱脂肪芽孢菌片小試管及第五類化學指示卡置于標準包的中心。為了證實該鍋的可靠性，在快速生物監測的同時，每周在同一標準包中放入傳統的生物監測指示劑進行生物監測1次，嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片用小試管裝好，芽胞菌片含量為（5×105～5×106）cfu/片，兩種生物指示劑放于標準包的中央。測試包放在排氣口上方的滅菌筐內。盡量將植入物或外來器械放于滅菌器上層，裝載時為便于蒸汽穿透，物品不得超過柜室容積的90%或＜5%。包與包之間需相隔2.5 cm，最上層滅菌包距柜室頂部至少7.5 cm。

1.2.3 快速生物監測自動培養/閱讀器準備：檢查快速生物監測培養/自動閱讀器性能是否良好，設置參數，并提前預熱半小時。

1.2.4 培養操作：待滅菌周期結束后，取出標準包內菌片試管。戴好護目眼鏡、手套，按壓關閉生物指示劑帽，在壓碎孔擠破含培養基的小試管，捏住指示劑帽端，在桌面上輕敲試管的底部，使培養基濕潤在試管底部的芽孢片，輕輕搖混勻，再將生物指示劑放進合適的培養/閱讀孔，同時設同一批次未經滅菌的嗜熱脂肪桿菌芽孢片試管為陽性對照管，插入對照培養/閱讀孔，關閉自動閱讀器孔蓋，等待綠色或紅色指示燈來顯示結果。放入培養/閱讀孔后不要移動地方，如果不小心取出生物指示劑，必須在10 s內放回原位，否則會導致監測結果丟失。傳統的生物監測嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片，送檢驗科在無菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養液中，使培養基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內培養48 h，同時接種陰性和陽性對照，觀察結果。

1.2.5 結果讀取：快速生物監測經3 h培養，自動培養/閱讀器顯示滅菌后試管為“綠色”陰性，對照管顯示“紅燈”為陽性。傳統的生物監測在48 h后觀察結果，判斷培養管內培養基不變色為無菌生長，培養基由紫色變為黃色時則滅菌失敗，滅菌處理后菌片和陰性對照培養全部無菌生長，陽性對照有菌生長，即可判定為滅菌合格。

1.2.6 記錄：植入物放行實施可追溯管理，可提高醫院無菌保證水平和實施植入物零風險[1]。根據WS/310.3-2009規范要求，我院消毒供應室設計了快速生物監測記錄本，內容包括手術器械名稱，包內器械總件數、植入物數量、生產廠家及外租器械廠家名、滅菌器爐號、爐次、滅菌溫度、壓力、時間、滅菌日期、失效日期、滅菌操作者及核對者姓名、快速生物監測結果陰性標簽、對照管陽性標簽、第五類化學指示卡。監測完成后由觀察者記錄生物監測結果，張貼生物監測標簽及化學指示卡，觀察者及核對者簽名，實行雙人簽名負責制。傳統的生物監測結果由檢驗科醫生監測，發放檢驗結果報告。每批次生物監測均歸檔留存，并保存B-D試驗結果、滅菌過程記錄、批量監測、化學監測，資料留存3年，一旦發生植入物術后感染可進行無過錯舉證[2]。

2 結果

253例次植入物及外租器械快速生物監測，全部合格，臨床沒有與植入物及滅菌后的無菌物品相關的感染報導。253管做對照的末經滅菌的快速生物指示劑均為陽性。經滅菌后的快速生物指示劑在培養3 h后即變為紫色，253次監測結果與傳統培養48 h監測結果相一致。

3 小結

傳統的生物監測是將生物指示劑經過一個滅菌周期，在無菌操作下從試管中取出并移種菌片溴甲酚紫蛋白胨培養液中，使培養基與菌片混合在一起，置于56℃恒溫箱內培養48 h，方可人工對比判斷結果?？焖偕锉O測指示劑與傳統方法相比，具有操作簡單、方便，并不需無菌移種和無菌配制培養基，可避免假陽性結果，準確性高，監測效果理想，結果可靠，所需時間短，與傳統生物監測方式相比，縮短了檢測等待報告時間45 h，能夠做到即時監測。它的使用意義在于出現不合格產品可以在4 h內召回，查找原因重新滅菌，確保滅菌物品使用安全，進而達到減少和控制感染的發生，為外科植入性手術急診手術器械的安全使用提供更有利保障，值得推廣應用。

[1] 李麗華,杜秋煥,王江濱,等.可追溯管理在消毒滅菌物品管理中的應用[J].中華感染學雜志,2009,19(7)：802.

[2] 趙香玉,邸 欣,生晶輝,等.骨科植入物器械在消毒供應室的安全管理[J].中華感染學雜志,2010,20(17)：2648.