臨床生化檢驗中的溶血因素探討

摘要：目的：探討溶血對臨床生化檢驗結(jié)果的影響及對策。

方法：采用神州英諾華D320型全自動生化分析儀檢測門診體檢52人不溶血和溶血血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、Na+、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）及血鉀（K+）等生化指標，并對結(jié)果作對比分析。

結(jié)果：不溶血與溶血標本對生化檢驗結(jié)果影響有顯著性差異。

結(jié)論：溶血對較多的生化檢驗項目有明顯的干擾和影響，臨床檢驗工作中應采取相應的措施避免標本溶血的發(fā)生。

關鍵詞：診斷實驗室生化檢驗溶血原因

【中圖分類號】R4【文獻標識碼】B【文章編號】1008-1879（2012）11-0163-01

隨著現(xiàn)代醫(yī)學的迅猛發(fā)展，醫(yī)學檢驗對臨床的指導作用越來越高，已成為臨床醫(yī)學中不可缺少的部分，在臨床診斷、治療及預后判斷上發(fā)揮重要作用。國內(nèi)外調(diào)查顯示，由分析前環(huán)節(jié)不規(guī)范造成檢驗結(jié)果誤差至少占檢驗全過程總誤差的60%以上。然而檢驗工作分析前質(zhì)量控制始終是醫(yī)務人員所忽視的最薄弱、最難控制的環(huán)節(jié)。由于導致檢驗質(zhì)量的因素復雜，所以分析前質(zhì)量控制成為整個檢驗質(zhì)量控制最難保證的階段。本文采用全自動生化分析儀分析52位健康人11項生化檢驗，觀察標本溶血前后的變化?，F(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料。隨機抽取2011年12月-2012年6月間門診體檢者52人，年齡11-51歲，其中女性21人、男性31人；抽取空腹靜脈血4ml，分別至于2個試管中各2ml。其中，1個試管水浴30min，2000rpm，離心10min；另1個試管人工方法使其溶血，相同條件離心，分離制備血清備用。隨機抽取健康人52例血液標本，如發(fā)現(xiàn)不合標準的采血，立即隨機更換。

1.2方法。采用北京北檢·新創(chuàng)源生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的試劑，神州英諾華D320型全自動生化分析儀測定血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、總膽紅素（TBIL）、Na+、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、尿素氮（BUN）、葡萄糖（GLU）及血鉀（K+）等生化指標。檢驗之后對標本進行人為地攪拌直至其溶血，經(jīng)離心后得重度溶血標本52例并進行同樣的指標檢測。并對結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。

1.3統(tǒng)計學方法。采用SPSS18.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以X±S表示，組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

52份標本溶血后AST、TP、TBIL、BUN、K+、Na+、CK檢驗值高于溶血前，GLU低于溶血前，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。但溶血前、后ALT、CK-MB、HDL檢驗值比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

3討論

3.1原因分析。紅細胞中的ALT、AST、TBIL、LDH、K+等高濃度物質(zhì)進入血清。紅細胞中的LDH是血漿的180倍，而CK、AST、ALT分別是15倍、38倍和7倍，導致其分析濃度高于實際濃度，造成結(jié)果偏高。血紅蛋白對蛋白質(zhì)的干擾使TP的分析濃度高于實際濃度。CK、Cr、BUN等物質(zhì)在紅細胞內(nèi)的含量很低或不含，但是紅細胞內(nèi)存在大量的維生素C、腺苷酸激酶（AK）、假肌酐類等干擾物質(zhì)[1]，這些干擾物質(zhì)引起假陽性，使生化結(jié)果偏高。血紅蛋白的紅色對比色分析法的干擾。采用終點比色法受血紅蛋白的吸光度影響最大，例如CHO的測定[2]。溶血的標本采用動力學法受血紅蛋白吸光度的影響最小。例如BUN、Cr的測定采用動力學法對結(jié)果影響沒有顯著性差異。血紅蛋白還可以競爭性地抑制分析物與試劑中的反應物結(jié)合，使測定結(jié)果低于實際值，例如偶氮反應法測血清總膽紅素、尿酸氧化酶-過氧化物酶聯(lián)法測尿酸、葡萄糖氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法測定血糖等都會引起實際值偏低。

3.2對策。

3.2.1防止體外溶血。可以通過制定操作技術(shù)標準化來實現(xiàn)：①抽血器和容器必須干燥潔凈，盡量使用一次性抽血器；②不用或短時間使用止血帶；③抽血不宜過快，以免產(chǎn)生大量的泡沫[3]；④抽血后取下針頭再將血液沿試管口壁徐徐注入容器內(nèi)；⑤若用血漿應輕輕倒轉(zhuǎn)容器與抗凝劑混勻，切勿用力振搖。

3.2.2方法學上克服和減少溶血對結(jié)果的干擾。對于血紅蛋白紅色的干擾，設置樣品空白進行糾正；溶血可造成可見光譜300～500nm的吸光度顯著增高，因此可采用雙波長比色法、離子選擇性電極法等進行測定。例如在340nm檢測溶血標本ALT結(jié)果有顯著性差異，而在340/660nm溶血標本ALT結(jié)果無顯著性差異；選用離子選擇電極法測定二氧化碳結(jié)合力（CO2CP），回避比色法，例如用已糖激酶測定血糖就可以回避溶血對血糖的干擾。屬于參與其分析法化學反應的溶血干擾，通過改變所用試劑的類型，改進試劑組配的方法進行糾正。標本嚴重溶血時建議重新采集。

總之，溶血標本是生化檢驗中對檢驗結(jié)果影響較為嚴重的因素之一，因此，在臨床檢驗操作中應將檢驗允許存在的誤差、統(tǒng)計學結(jié)果以及醫(yī)學水平三者綜合比較進行分析與應用。以提高檢驗結(jié)果的準確性，為臨床的診療提供科學可靠的依據(jù)。

參考文獻

[1]周平.標本溶血對TP、AST測定的干擾及糾正[J].江西醫(yī)學檢驗，2004，22（1）：79-85

[2]劉海燕.溶血現(xiàn)象對臨床生化檢驗項目影響的觀察及預防對策[J].當代醫(yī)學，2011，17（27）：33-34

[3]文家遠.生化檢驗結(jié)果異常的原因分析[J].吉林醫(yī)學，2010，31（17）：2638