腦膠質(zhì)瘤中VEGF、EGFR表達(dá)意義研究

韓 影，刁文卓，陳 萍

（吉林市中心醫(yī)院1.病理科；2.神經(jīng)外科，吉林 吉林 132011）

腦膠質(zhì)瘤中VEGF、EGFR表達(dá)意義研究

韓 影1，刁文卓2，陳 萍1

（吉林市中心醫(yī)院1.病理科；2.神經(jīng)外科，吉林 吉林 132011）

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，腦膠質(zhì)瘤的主要特征是在腦實(shí)質(zhì)中浸潤性生長，可通過破壞血腦屏障向腦組織侵襲性生長，其侵襲性強(qiáng)、術(shù)后復(fù)發(fā)快、病死率高，臨床通過手術(shù)、放化療及中醫(yī)治療療效仍不盡人意。其預(yù)后的關(guān)鍵是腫瘤的分級，大量研究結(jié)果表明腦膠質(zhì)瘤的惡性程度與腫瘤血管的生長密切相關(guān)。腫瘤血管的生成是一個復(fù)雜的過程，受多種因子的調(diào)節(jié)。VEGF是目前已知的作用最強(qiáng)的腫瘤血管生成誘導(dǎo)因子，并可使血管通透性增加。EGFR是一種酪氨酸激酶活性的膜表面受體，在人腦惡性膠質(zhì)瘤中常常出現(xiàn)擴(kuò)增、重排、突變和過度表達(dá)，借助于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)使細(xì)胞生長失控和轉(zhuǎn)化。本研究通過分析腦膠質(zhì)瘤中VEGF和EGFR的表達(dá)，進(jìn)一步探討其在腦膠質(zhì)瘤中的發(fā)生、發(fā)展和侵襲的意義。

1 材料與方法

1.1 材料收集我院2007－2010年間病理科診斷為膠質(zhì)瘤的存檔蠟塊48例，年齡6－70歲，中位年齡43歲，其中男性31例，女性17例，以2000年WHO腦膠質(zhì)瘤分類標(biāo)準(zhǔn)，中低度惡性即低級別組（WHO I、II級）膠質(zhì)瘤28例；高度惡性即高級別組（WHO III、IV級）膠質(zhì)瘤20例。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑 VEGF鼠抗人單克隆抗體、EGFR鼠抗人單克隆抗體，SP染色試劑盒和DAB試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

1.2.2 主要儀器 免疫組化配套儀器，石蠟切片機(jī)，電熱恒溫干燥箱，光學(xué)顯微鏡。

1.2.3 免疫組化染色 所有切片均為2.5μm厚連續(xù)切片，取一組行HE染色并校對腦膠質(zhì)瘤病理級別，再行SP免疫組化法檢測VEGF和EGFR。

1.2.4 結(jié)果判定 采用半定量雙盲法，根據(jù)顯微鏡下免疫組化陽性細(xì)胞染色進(jìn)行評價(jià)，EGFR陽性反應(yīng)為細(xì)胞膜和細(xì)胞漿呈棕褐色、顆粒狀；VEGF陽性反應(yīng)為細(xì)胞膜或細(xì)胞漿呈棕褐色。每張切片隨機(jī)觀察5個高倍視野，每個視野計(jì)數(shù)100個腫瘤細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)≥50%為強(qiáng)陽性（＋＋＋），49%～25%為陽性（＋＋），25%～5%為弱陽性（＋），＜5%為陰性（－）。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)方法 本實(shí)驗(yàn)采用SAS 6.12統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有顯著性，P＜0.01為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 VEGF在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)VEGF免疫組化表達(dá)陽性顆粒呈棕褐色。彌散分布于腫瘤細(xì)胞膜或細(xì)胞漿內(nèi)。結(jié)果表明：VEGF在正常腦組織中陽性率表達(dá)為9.62%，在膠質(zhì)瘤組織中陽性率表達(dá)為60.00%，統(tǒng)計(jì)學(xué)P＜0.01，具有顯著性差異性。低級別組與高級別組差異具有顯著性（χ2＝14.69，P＜0.05），見表1。

表1 VEGF在各級腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)

2.2 EGFR在腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)EGFR免疫組化表達(dá)陽性顆粒呈棕褐色顆粒。主要位于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿內(nèi)，結(jié)果表明：EGFR在正常腦組織中無表達(dá)，在膠質(zhì)瘤組織中陽性率表達(dá)為54.17%，統(tǒng)計(jì)學(xué)P＜0.01，具有顯著性差異性。低級別組與高級別組差異具有顯著性（χ2＝14.13，P＜0.01），見表2。

2.3 VEGF與EGFR表達(dá)相關(guān)經(jīng)χ2檢驗(yàn)?zāi)z質(zhì)瘤組織中VEGF的表達(dá)與EGFR的表達(dá)χ2＝21.78，P＜0.05，有相關(guān)性，見表3。

表2 EGFR在各級腦膠質(zhì)瘤中表達(dá)

表3 VEGF、EGFR相關(guān)分析

3 討論

VEGF是體外血管內(nèi)皮細(xì)胞生長特異的有絲分裂原和血管通透性因子。腫瘤細(xì)胞生長依賴于供應(yīng)血管提供氧氣和營養(yǎng)，運(yùn)走代謝產(chǎn)物。最近研究表明VEGF在組織器官的發(fā)生、正常狀態(tài)的維持、多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移中都發(fā)揮著重要作用。Bruce和Criscuolo首先證實(shí)膠質(zhì)瘤細(xì)胞合成與分泌VEGF［1］。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果提示VEGF的陽性表達(dá)對于判斷腫瘤的惡性程度非常有意義，同時本實(shí)驗(yàn)還觀察到，不但腫瘤細(xì)胞胞漿內(nèi)有棕黃色染色，新生血管旁也有較強(qiáng)染色，為解釋該現(xiàn)象，Disalvo等人對VEGF結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行了超微研究，表明VEGF是以旁分泌方式作用于腫瘤旁血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的靶受體，揭示VEGF是一種重要的旁分泌血管生長因子，說明VEGF在腦腫瘤的發(fā)生過程中發(fā)揮作用。

EGFR在大多數(shù)腫瘤中的表達(dá)和突變，借助于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)使細(xì)胞生長失控和惡性化［2］。PM Ganigi［2］等研究了EGFR在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)率為25%，有EGFR基因的擴(kuò)增。近期國外文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)用EGFR基因單克隆抗體治療膠質(zhì)瘤［4］，在膠質(zhì)瘤治療方面應(yīng)用酪氨酸激酶抑制劑和單克隆抗體治療膠質(zhì)瘤在實(shí)驗(yàn)室中已取得很好的療效。本實(shí)驗(yàn)表明EGFR的陽性表達(dá)與膠質(zhì)瘤的惡性度呈正相關(guān)，是膠質(zhì)瘤分化不良的重要標(biāo)志，EGFR陽性表達(dá)的腫瘤可能具有更強(qiáng)的分裂增殖活性。EGFR作為膠質(zhì)瘤惡性程度的生物學(xué)指標(biāo)，也可作為判斷預(yù)后的重要參數(shù)之一。

研究表明EGFR在膜信息轉(zhuǎn)換中期重要的作用，過度表達(dá)的EGFR不斷將VEGF刺激導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，引起細(xì)胞持續(xù)分裂增殖，最終導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生，本實(shí)驗(yàn)研究經(jīng)相關(guān)分析認(rèn)為膠質(zhì)瘤組織中VEGF的表達(dá)與EGFR的表達(dá)（P＜0.05）有相關(guān)性。這進(jìn)一步說明了，二者在膠質(zhì)瘤發(fā)生中有協(xié)同作用。

［1］Bruce JN，Criscuolo GR，M errrili MJ，et al.Vascular permeability induced by protein product of malignant brain tumors：inhibition by dexamethasone［J］.J Neuro surg，1987，67：880.

［2］Roy SH.Monoclonal antibody to target epidermal growth factor receptor positive tumors［J］.Cancer，2002，94（5）：1593.

［3］PM Ganigi，V Santosh，B Anandh，et al.Expression of P53、EGFR、pRd and bcl-2protens in pediatric Glioblastoma Multiforme：A Study of 54Patients［J］.pediatric Neuosurgery，2005，41：292.

［4］Kies MS，Arquette ma，Nabell L，et al，F(xiàn)inal report of the efficacy and safety of the antiepidermal growth factor antibody Erbitux（IMC2C225），in combination with cisplatin inpatients with recurrent squamous cell carcinoma of the head and neck（SCCHN）refractory to cisplatining chemotherapy［J］.proc Am Soc Clin Oncol，2002，21：232.

1007－4287（2012）02－0320－02

2010－10－17）