PCNA及Mina53表達與非小細胞肺癌放射敏感性的關系

趙光日

（廣州醫學院附屬腫瘤醫院，廣東 廣州 510095）

PCNA及Mina53表達與非小細胞肺癌放射敏感性的關系

趙光日

（廣州醫學院附屬腫瘤醫院，廣東 廣州 510095）

本研究探討增殖細胞核抗原（Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA）與 Mina53在非小細胞肺癌中的表達極其與放療患者療效的相關性，從而為早期預測非小細胞肺癌放療敏感性提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月至2010年1月我院收治的非小細胞肺癌患者共59例。男41例，女18例。年齡51－77歲，平均62.5±9.3歲。病理類型中鱗癌26例，腺癌28例，鱗腺癌3例，大細胞癌2例。患者病理分期按UICC1997年肺癌術后病理分期標準劃分：Ⅰ期23例，Ⅱ期19例，Ⅲ期17例。伴有淋巴結轉移者21例，無淋巴結轉移者38例。高分化13例，中分化31例，低分化15例。所有入選患者符合以下條件：1）無手術指征或者未接受過放療。3）患者經臨床纖支氣管鏡或穿刺活檢證實為非小細胞肺癌。3）患者預計生存期＞3個月。

1.2 放療方法

放療設備：美國瓦里安公司，模擬機Acuity，計劃系統Eclipse，加速器Varian 23EX。對所有患者進行C4-L2椎體下緣行螺旋CT增強掃描，確定肉眼腫瘤區以及周圍正常組織的范圍，再進一步確定臨床靶區、計劃靶區以及需要保護的敏感器官。行常規分割放療，治療總劑量為60－70Gy／30－35f，6周完成放療。

1.3 免疫組化處理

所有切片來自于非小細胞肺癌患者行病理活檢后的標本，福爾馬林固定后行石蠟包埋并制成4μm厚的切片。每份標本分別行PCNA與Mina53蛋白免疫組化染色。鼠抗PCNA單克隆抗體購自福州邁新生物技術有限公司。鼠抗人Mina53單克隆抗體購自美國Invitrogen公司。抗原微波修復后進行免疫組織化學染色，PBS代替一抗作為陰性對照。PCNA與Mina53蛋白的表達均位于細胞核中，其中陽性細胞核為棕黃色。每例選取5個高倍視野，鏡下每視野中選取100個腫瘤細胞中的陽性細胞數，其中未見陽性細胞表示（－）、陽性細胞＜25%為（＋）、陽性細胞在25%～50%為（＋＋）、陽性細胞＞50%為（＋＋＋）。

1.4 療效評估

根據WHO的療效評估標準，放療結束后1－2個月行胸部增強CT檢查腫瘤消退情況，分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、無變化（NR）以及病情進展（PD），CR＋PR／總數＊100%為計算有效率。

1.5 統計學處理

應用統計軟件SPSS13.0對59例非小細胞肺癌患者與放療敏感相關性進行分析，資料以均數±標準差（±s）表示；資料采用卡方檢驗和非參秩和Mann-Whitney U檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 非小細胞肺癌患者放療有效率

所有59例患者中CR12例（20.3%），PR22例（37.3%），NR16例（27.1%），PD9例（15.3%），其中患者總放療有效率為54.8%。見表1。

表1 非小細胞肺癌患者放療有效率

2.2 PCNA蛋白表達與放療療效的相關性

PCNA蛋白表達按照染色結果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率依次為27.3%、46.1%、64.7%、77.8%，組間對比差異有統計學意義，P＜0.05。表示PCNA蛋白表達與放療療效呈正相關。見表2。

表2 PCNA蛋白表達與放療療效的相關性

2.3 Mina53蛋白表達與放療療效的相關性

Mina53蛋白表達與放療療效的相關性對比，患者按染色結果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率依次為83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，組間對比差異有統計學意義，P＜0.05。表示Mina53蛋白表達與放療療效呈負相關。見表3。

表3 Mina53蛋白表達與放療療效的相關性

3 討論

PCNA是由Miyachi于1978年在系統性紅斑狼瘡患者的血清中首次發現并命名，其因只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名。PCNA是一種36kDa的酸性無組蛋白細胞核多肽，其表達與細胞增殖周期密切相關，可以反映細胞增殖程度以及所處的周期，并用于對良惡性腫瘤鑒別及腫瘤惡性程度的評估［1］。既往研究表明PCNA指數與放療敏感性呈現正相關，本研究通過探討發現PCNA在非小細胞肺癌中免疫組化的陽性表達率與放療敏感性的相關性，研究結果顯示患者按染色結果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率分別為27.3%、46.1%、64.7%、77.8%。組間對比差異有統計學意義，P＜0.05。表示PCNA蛋白表達與放療療效呈現正相關。其可能的原因在于PCNA增殖指數較高的腫瘤組織中進入細胞增殖周期的腫瘤細胞數量較多，而此類進入增殖周期的細胞對放療更加敏感。

Mina53是分子量為53KD的一個新基因，其表達由C-myc直接誘導［2，3］。研究報道，人類結腸癌、胃癌、食管癌、淋巴結瘤、肺癌以及腎細胞癌中均存在著 Mina53的表達［4］，譚小平等人［5］研究 Mina53在結腸癌中的表達及與各臨床病理特征和腫瘤增殖活性的關系中，運用PCR分別檢測51例結腸癌、19例結腸腺瘤和20例正常結腸組織Mina53mRNA的表達，結果顯示結腸癌組織Mina53mRNA的表達明顯高于結腸腺瘤及正常結腸組織；而與腫瘤的組織分化程度、臨床分期、遠處轉移和淋巴結轉移均相關，表明Mina53的表達與腫瘤的惡性程度密切相關。而Mina53與非小細胞肺癌放療敏感性的相關性研究國內外并未涉及，本研究Mina53蛋白表達與放療療效的相關性對比中，患者按染色結果（－）、（＋）、（＋＋）、（＋＋＋）分組顯示，放療后患者有效率分別為83.3%、66.7%、42.8%、33.3%，組間對比差異有統計學意義，P＜0.05。表示Mina53蛋白表達與放療療效呈現負相關。

綜上所述，本研究探討了PCNA和Mina53蛋白在59例非小細胞肺癌組織中的表達及其與放療療效的相關性。結果顯示PCNA蛋白表達的增加放療效果較好，Mina53蛋白表達的增強放療效果較差，PCNA和Mina53蛋白在預測非小細胞肺癌的放療療效中均有一定的作用，從而為非小細胞放療敏感性的早期診斷提供依據。

［1］Zhao Y，Li XJ，Sui X，et al.Expression and significance of PCNA and Caspase-3in the tissue of lung cancer［J］.Xi Bao Yu Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi，2010，26（2）：154.

［2］Tsuneoka M，Koda Y，Soejima M，et al.A novel myc target gene，mina53，that is involved in cell proliferation［J］.J Biol Chem，2002，277（38）：35450.

［3］Fukahori S，Yano H，Tsuneoka M，et al.Immunohistochemical expressions of Cap-43and mina53proteins in neuroblastoma［J］.J Pediatr Surg，2007，42（11）：1831.

［4］Kazutoshi Komiya，Naoko Sueoka-Aragane，Akemi Sato，et al.Mina53，a novel c-Myc target gene，is frequently expressed in lung cancers and exerts oncogenic property in NIH／3T3cells［J］.Journal of Cancer Research and Clinical Oncology，2010，136（3）：465.

［5］譚小平，何長華，朱燕妮，等.Mina53在結腸癌組織中的表達意義及與腫瘤增殖的關系［J］.世界華人消化雜志，2011，4：421.

1007－4287（2012）02－0310－02

2011－06－20）