S100A8在膀胱移行細胞癌中的表達及其臨床意義

崔延義，石愛平，許 寧＊，金美善，張小軍，汪 巖＊

（吉林大學 白求恩第一醫院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 長春 130021）

S100A8在膀胱移行細胞癌中的表達及其臨床意義

崔延義1，石愛平2，許 寧1＊，金美善3，張小軍1，汪 巖1＊

（吉林大學 白求恩第一醫院1.泌尿外科；2.普外科；3.病理科，吉林 長春 130021）

目的 探討S100A8在膀胱移行細胞癌（BTCC）組織中的表達及其臨床意義。方法應用免疫組織化學方法檢測68例BTCC和10例癌旁正常膀胱組織中S100A8蛋白的表達，并分析其與BTCC臨床病理特征的關系。結果S100A8蛋白在BTCC組織中表達陽性率為55.9%（38／68），10例癌旁正常膀胱組織中表達均為陰性，兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.01）；在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC組織中表達陽性率為29.2%（7／24），高分級BTCC組織中表達陽性率為70.5%（31／44），兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.01）；在pTa-pT1期和pT2－pT4期表達陽性率分別為46.9% （23／49）和78.9%（15／19），兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；在復發性BTCC組織和初發性BTCC組織中表達陽性率分別為72.7%（16／22）和47.8%（22／46），兩組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。結論S100A8蛋白表達陽性率在BTCC組織中明顯高于癌旁正常膀胱組織，其表達與BTCC的病理分期、分級呈正相關，隨病理分期、分級的增高，S100A8蛋白表達陽性率增高，提示S100A8蛋白的表達與BTCC的發生、發展密切相關。檢測S100A8蛋白有助于BTCC預后的評估。

膀胱移行細胞癌；S100A8；免疫組織化學

（ChinJLabDiagn，2012，16：0234）

S100A8蛋白與人類多種腫瘤有關，如乳腺癌、甲狀腺癌、胃癌、結直腸腺癌、胰腺癌、前列腺腺癌，食管 鱗 狀 細 胞 癌、宮 頸 鱗 狀 細 胞 癌 等［1－7］。但S100A8在膀胱移行細胞癌（BTCC）中的表達及其臨床意義的研究，目前國內尚未見報道。我們采用免疫組織化學方法檢測68例膀胱移行細胞癌和10例癌旁正常膀胱組織中S100A8蛋白的表達，并分析其與膀胱移行細胞癌臨床病理特征的關系。

1 材料與方法

1.1 臨床資料選取吉林大學第一醫院在2008年12月－2010年12月期間，手術治療的膀胱移行細胞癌患者68例蠟塊標本，男51例，女17例；年齡35－86歲，平均64歲。其中膀胱全切患者15例，經尿道膀胱腫瘤電切除患者53例。術后均經病理證實為BTCC。入組標準：①腫瘤組織直徑大于1.0cm，②無其它腫瘤病史。68例BTCC病理分級根據WHO 2004分級標準：低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤（papillary urothelial neoplasms of low malignant potential，PUNLMP）6例；低分級18例；高分級44例。病理分期根據國際抗癌協會2009TNM分期標準：pTa 28例；pT121例；pT211例；pT36例；pT42例。非肌層浸潤性（pTa-pT1）49例，肌層浸潤型（pT2－pT4）19例。其中復發性膀胱癌22例。同時選取膀胱全切除標本距腫瘤邊緣2 cm以上，經病理證實為正常膀胱組織10例作為對照組。每個石蠟標本切片3張，4μm厚，備染色。陽性對照為宮頸癌蠟塊標本3例，取自我院病理科。

1.2 試劑兔抗人／小鼠S100A8單克隆抗體購自美國Epitomics公司。UltraSensitive TM S-P超敏試劑盒（鼠／兔）（包含內源性過氧化酶阻斷劑，動物非免疫血清（羊），生物素標記的羊抗鼠／兔IgG，鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶）與DAB顯色試劑盒購自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3 方法采用免疫組織化學SP法檢測，染色步驟按試劑盒說明進行。S100A8抗體稀釋濃度為1∶100。以宮頸癌組織作陽性對照，以PBS液代替一抗作陰性對照。

1.4 判斷標準陽性結果為比較鮮明的棕黃色染色，充滿胞漿，彌散分布。每張切片隨機選取5個高倍視野，每個高倍視野計數100個癌細胞，計數陽性細胞百分數并進行評分：0分（0%），1分（1－25%），2分 （26－50%），3 分 （51－75%），4 分 （76－100%）；根據染色強度評分：0分為未著色，1分為輕度色，2分為中度色，3分為重度著色。染色強度評分與陽性細胞數評分相乘，0－4分為陰性表達，5－12分為陽性表達。

1.5 統計學分析采用SPSS 13.0統計軟件進行統計學分析。采用χ2連續校正檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

免疫組織化學顯示，S100A8蛋白表達陽性染色主要定位于腫瘤細胞質中，為細胞質彌漫性淡黃色或棕黃色，如圖1、2。在癌旁正常膀胱組織中表達陰性，如圖3。S100蛋白表達與BTCC臨床、病理的關系見表1。S100A8蛋白表達陽性率的比較在BTCC組織和癌旁正常膀胱組織比較，在非肌層浸潤性BTCC和肌層浸潤性BTCC組織比較，在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC組織和高分級BTCC組織比較，差異均有統計學意義（P＜0.01或P＜0.05）。隨病理分期、分級增高，S100A8蛋白表達陽性率增高。在復發性BTCC組織和初發性BTCC組織比較，在不同性別間、不同腫瘤數目間比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

圖1 免疫組化方法，S100A8蛋白在BTCC組織中高表達400×

圖2 免疫組化方法，S100A8蛋白在BTCC組織中低表達400×

圖3 免疫組化方法，S100A8蛋白在癌旁正常膀胱組織中表達陰性200×

3 討論

S100A8蛋白是S100蛋白家族成員之一，由93個氨基酸組成，分子質量為10835Da，常以二聚體形式存在。Yao、Tolson等［8，9］研究發現，S100A8蛋白在膀胱癌中表達上調。本實驗結果顯示：S100A8蛋白在BTCC組織中表達陽性率為55.9%，10例癌旁正常膀胱組織中表達均為陰性，兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.01）。與 Yao、Tolson等報道相一致。提示S100A8蛋白表達可能與BTCC發生有關。

Kim 等［10，11］通過研究S100A8在浸潤性膀胱癌和非浸潤性膀胱癌中的表達，發現S100A8高表達與腫瘤的侵襲性有關，提示S100A8高表達是腫瘤向浸潤性進展的分子指標之一。Ha等［12］研究發現非浸潤性膀胱癌患者中有浸潤進展的S100A8mRNA水平明顯高于沒有浸潤進展的膀胱癌患者，S100A8是評價膀胱癌預后的獨立參數。Minami等［13］研究表明S100A8在肌層浸潤性膀胱癌與非肌層浸潤性癌的表達陽性率分別為38.3%、5.9%，兩組比較（P＜0.015），差異有統計學意義。本實驗結果顯示：S100A8蛋白在pTa-pT1期和pT2－pT4期表達陽性率分別為46.9%和78.9%，兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。與文獻報道相一致。提示檢測S100A8蛋白的表達水平對BTCC患者的預后評估有參考價值。

表1 S100A8蛋白表達與BTCC臨床、病理的關系［例（%）］

Minami等［13］研究表明S100A8蛋白在 G1＋G2與G3膀胱癌組織中表達陽性率分別為21.6%、40.0%，兩組比較，差異無統計學意義。本組研究對BTCC的病理分級采用了WHO 2004病理分級標準，在低度惡性傾向尿路上皮乳頭狀瘤＋低分級BTCC與高分級BTCC中S100A8蛋白表達陽性率分別為29.2%、70.5%，兩組比較，差異有統計學意義（P＜0.01）。與Minami等文獻報道結果不一致，目前國內外尚未見更多相關文獻報道，其結果有待進一步研究證實。

本研究結果還顯示：S100A8蛋白表達陽性率在復發性BTCC和初發性BTCC中分別為72.7%、47.8%，在復發性BTCC中表達有升高趨勢，但無統計學意義。目前國內外尚未見相關文獻報道，本實驗結果，尚需進一步研究證實。

膀胱癌的復發與浸潤進展是臨床治療中兩大亟待解決的課題。目前臨床工作中主要依據腫瘤的病理分級和分期預測腫瘤的預后，而病理分級和分期對預測膀胱癌的生物學行為存在一定的局限性。本研究結果提示S100A8蛋白的表達與BTCC的發生、發展密切相關。因此，我們認為，進一步探討S100A8導致BTCC發生、發展的分子機制，有望成為BTCC預后評估新的分子指標，也可能為BTCC的靶向治療提供新的靶點。

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Expression of S100A8protein in human bladder cancer and its clinical significance

CUIYan-yi，SHIAi-ping，XUNing，etal.（TheFirstClinicalCollegeofNormanBethuneMedicalDivision，JilinUniversity，Changchun130021，China）

ObjectiveTo investigate the expression of S100A8protein in transitional cell carcinoma of bladder（BTCC）and analyze its clinical significance.MethodsThe expression of S100A8protein in 68cases of BTCC and 10 cases of adjacent normal bladder tissues was detected by immunohistochemical staining and its correlations to clinic pathologic features was then analyzed.ResultsExpression of S100A8protein was higher in BTCC than in adjacent normal bladder tissues（55.9%versus 0%，P＜0.01）.S100A8protein expression rates were 78.9%and 46.9%in pT2－pT4BTCC and pTa-pT1BTCC（P＜0.05），while 29.2%and 70.5%in PUNLMP plus low-grade BTCC and highgrade BTCC（P＜0.01），respectively.There was no difference between recurrence and non-recurrence （72.7%versus47.8%，P＞0.05）.ConclusionThe expression of S100A8protein was higher in BTCC than in the adjacent normal tissues，which was associated with pathologic grade and Stage of BTCC.The expression level of S100A8protein was getting higher with the increase of tumor pathology grade and stage.We might speculate that S100A8protein was correlated with the currency and progression of BTCC.The detection of the expression of S100A8protein is in favor of prognostic evaluation of bladder cancer.

Bladder cancer；S100A8；Immunohistochemistry

R737.14

A

1007－4287（2012）02－0234－03

＊通訊作者

2010－11－13）