尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管并發癥的相關性研究

宋宇哲 王宏麗

尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管并發癥的相關性研究

宋宇哲 王宏麗

目的研究尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管并發癥的相關性。方法慢性腎衰竭伴冠心病組和慢性腎衰竭不伴冠心病組，采用梯度離心法分離單核細胞法對比。結果各組數據采用均數±標準差(±s)表示，組間數據比較采用t檢驗。各組數據中計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05，為差異有統計學意義。結論尿毒癥血液透析患者血清單個核白細胞TNF-α、AngⅡ表達增加，高血壓等心血管并發癥增加，說明尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管疾病相關。

尿毒癥患者;微炎癥狀態;心血管并發癥

美國、挪威國家的全國性調查顯示慢性腎病(CKD)是常見的慢性疾病，成年人群中 CKD的患病率為 10.2% ～13.0%。中國CKD患病率為10.8%。CKD與心血管疾病存在復雜的交互作用。研究表明，與正常腎功能者相比，腎功能輕中度下降者心血管病事件增加40%，并且隨著腎功能下降，風險呈線性增加趨勢。CKD是心血管疾病(CVD)的獨立危險因素，隨著GFR＜60 ml/min，病死率和心血管事件發生率明顯增高。約50%～60%的CKD患者在進入尿毒癥之前死于CVD［4］，尿毒癥患者CVD病死率約為普通人群的10～20倍，約占尿毒癥患者全因死亡的45%［2］。CVD增加腎損傷危險，CVD是否為CKD的獨立危險因素尚不確定，但防治CVD是延長CKD患者生存時間和改善生存質量的重要環節。糾正CVD危險因素，除傳統因素如血壓、血糖、血脂外，尤其應注意處理CKD相關危險因素，如血鈣磷代謝紊亂、慢性炎癥狀態等［3］。本研究重在尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管并發癥的相關性。

1 資料

1.1 研究對象及分組

1.1.1 慢性腎衰竭不伴冠心病組(CRF組)18例，選擇2011年9月至2012年3月長春市中心醫院門診規律血液透析患者，透析時間2年以上。

1.1.2 慢性腎衰竭伴冠心病組(CRF+CHD組)18例，選擇2011年9月至2012年3月長春市中心醫院門診規律血液透析患者，透析時間2年以上。同時伴有冠狀動脈病變:心絞痛，有臨床癥狀，勞累后的心前區疼痛經服用硝酸甘油或休息后緩解;心肌梗死，有胸痛、呼吸困難癥狀，有心電圖或心肌酶學改變;經冠脈成像或血管造影診斷為冠狀動脈性心臟病。

1.2 分組特點 組間性別、年齡、血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)和血管緊張素II受體拮抗劑(ARB)類藥應用情況相匹配。透析患者組選擇體重指數(BMI)偏小，血白蛋白偏低，C反應蛋白(CRP)偏高的患者。排除急性感染和慢性傳染病患者。

2 方法

2.1 留取標本 Con組為清晨空腹采血10 mL，CRF組和CRF+CVD組為透析日清晨空腹采血10 ml。靜脈血用肝素抗凝，每1 m l全血用0.1 ml 125～250U/ml的肝素。

2.2 采用梯度離心法分離單核細胞:

2.2.1 用PBS等倍稀釋血液;

2.2.2 把血液倒入15 ml離心管內，用吸管把淋巴細胞分離液加到血液底下。每10 ml稀釋血加5 ml分離液;

2.2.3 以2000 r/min離心20 min，取中間灰白色層為單個核細胞;

2.2.4 所得單個核細胞用5倍體積的PBS液洗滌，分別以2000 r/min和1500 r/min離心10 min，進一步除去血小板;

2.2.5 培養基定容細胞;

2.2.6 臺盼蘭記數活細胞。分離后可得單核細胞數約3.5 ×104～7.0×104。

2.3 分離出的單核細胞用1640培養液制成細胞懸液，滴加至24孔培養板上。

2.4 取培養的上清液，用放免法檢測TNF-α(TNF-α)濃度。試劑盒購自北京中國原子能科學研究院，靈敏度6ng/dL。

2.5 取培養的上清液，3000轉離心10 min去除顆粒和聚合物。用ELISA方法測定 AngⅡ。最低檢測濃度小于1.0 pg/mL。

3 結果

3.1 各組間例數、CRF+CHD組例數18人，其中男性9人、女性9人，年齡66～71歲，冠心病例數18人，高血壓例數15人。CRF組例數18人，其中男性10人、女性8人，年齡37～71歲，冠心病例數0人，高血壓例數16人，兩組性別及年齡無差異，伴高血壓例數增多，P＜0.05。

3.2 各組患者血清單個核白細胞AngⅡ和TNF-α表達比較CRF組AngⅡ98.12±13.09#(ng/L);2 cRF+CHD組AngⅡ160.98±39.31#*(ng/L)AnⅡ濃度高于CRF組，P＜0.05。

4 討論

慢性腎臟(CKD)病患者有較高的心血管病的發病危險，有50%左右透析患者是由于上述原因而導致死亡的，本研究結果表明，尿毒癥伴發冠心病的患者，高血壓的發病率也明顯增加。尿毒癥患者都存在不同程度的貧血，導致機體長期處于乏氧狀態，加重了冠心病的癥狀，本研究中血液透析患者的貧血程度沒有統計學意義，分析與促紅細胞生成素的治療有關。

此外，尿毒癥患者的非傳統心血管病危險因素-炎癥開始引起人們的關注。慢性腎衰竭患者呈現持續慢性炎癥反應狀態，稱為微炎癥狀態。與下列因素有關:

4.1 血液透析的影響 首先，透析過程中補體成分活化，促進促炎癥細胞因子活化;其次，透析液中的內毒素或細菌碎片等進入血液循環，刺激炎癥介質的表達與釋放;最后，生物膜的不相容性刺激血液細胞活化及表達促炎癥細胞因子。

4.2 感染 CRF患者存在不同程度的細胞免疫和體液免疫的缺陷，機體抗感染能力降低，此外，臨時血管通路和腹膜透析插管處可能發生潛在感染。

4.3 尿毒癥本身的相關因素 尿毒癥患者腸道黏膜屏障作用受損，導致內毒素經腸道進入體內;慢性腎衰患者晚期糖基化終產物和氧化蛋白產物水平顯著升高，它們作用于炎癥細胞，促進炎癥因子釋放。

尿毒癥炎癥狀態是一個細胞因子驅動的、以促氧化應激過程為特征的慢性炎癥狀態，血管內皮細胞功能紊亂、中性粒細胞和單核細胞髓過氧化物酶激活參與其中［4］。現已證實，慢性腎衰時血循環中炎性標志物質AngⅡ升高。本研究觀察到，尿毒癥合并冠心病患者外周血單個核白細胞分泌的AngII明顯高于不伴有冠心病的患者。因此AngⅡ也可能在腎衰透析患者的炎癥、動脈粥樣硬化中起到重要作用。

總之，尿毒癥透析患者有較高的心血管并發癥危險，而血液透析患者伴有心血管并發癥有其特有的機制，在透析患者中微炎癥狀態、與心血管并發癥有關。尿毒癥血液透析患者血清單個核白細胞AngⅡ表達增加，高血壓等心血管并發癥增加，說明尿毒癥患者的微炎癥狀態與心血管疾病相關。

［1］ National Kidney Foundation.K/DOQI clinical practice guidelines for chronic kidney disease:evaluation，classification，and stratification.Am JKidney Dis，2002，39(2 Suppl1):S1-266．

［2］ Hage FG，Venkataraman R，Zoghbi GJ，et al.The scope of coronary heart disease in patients with chronic kidney disease.J Am Coll Cardior，2009，53:2129-2140．

［3］ 陳楠，史浩，等.慢性腎臟病患者心血管疾病的現狀與思考.中華內科雜志，2012，51:499-450．

［4］ 王喜超，甘華，杜曉剛，等．氧化應激促進維持性血透患者血清體外誘導血管新生．重慶醫科大學學報，2008，33(6):661-664．

吉林省教育廳“十二五”科學技術研究項目(項目編號:吉教科合字2011-421)

130031長春醫學高等專科學校

王宏麗