不同企業非洛地平片的體外溶出度研究*

朱靜毅，尹 萌，孟月蘭

非洛地平是對血管有較高選擇性作用的二氫吡啶類鈣通道拮抗劑，可通過減少外周血管阻力而降低動脈血壓，在臨床上用于高血壓、心絞痛、充血性心衰的防治，因其療效確切，不良反應較輕，且對各期高血壓均有效，臨床應用十分廣泛，在國外被作為老年高血壓患者的首選藥。目前，全國范圍內非洛地平片的生產企業7家，藥品批準文號11個，各藥廠因生產工藝不同等因素，其產品內在質量水平亦不相同。

溶出度試驗是評價口服固體制劑內在質量的一個重要手段，多種pH值溶出介質中溶出曲線的測定是先進國家藥物評審評價機構評價口服固體制劑內在質量的一個重要環節。由于非洛地平在丙酮、甲醇或乙醇中易溶，在水中幾乎不溶，《中國藥典》2010年版選用0.3%十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質［1］。為了進一步模擬人體內環境，本實驗參照日本“藥品品質再評價”工程在溶出度研究中所擬定的模擬人體消化道內體液的4種基本介質［2］，采用《中國藥典》2010年版方法，對5家藥廠生產的非洛地平片的溶出度進行測定，考察不同藥廠藥品的內在質量，為臨床用藥提供參考。

1 儀器、試劑與試藥

天大天發RCZ-8B型全自動取樣溶出系統;日本島津LC20AB高效液相色譜儀，色譜柱：AlltimaTMC18(150 mm ×4.6 mm，5 μm);AG135 型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)。

甲醇(色譜純)，乙腈(色譜純)，其他試劑均為分析純;水為超純水;對照品：非洛地平(由中國藥品生物制品檢定所提供，批號130452-200902);5家藥廠的非洛地平片均為市售品，見表1。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適應性 依照高效液相色譜法(附錄ⅤD)測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇-乙腈-水(50∶15∶35)為流動相;流速為1.0 ml/min;檢測波長為238 nm;進樣量20 μl。理論板數按非洛地平峰計算不低于3 500，非洛地平與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。

表1 5家不同藥廠的非洛地平片

2.2 測定方法的建立及驗證

2.2.1 溶出介質的配制 溶出介質Ⅰ(水)：超純水(含0.02%吐溫 -80)。溶出介質Ⅱ(pH 1.2鹽酸溶液)：取氯化鈉2.0 g，加水適量使溶解，加鹽酸7 ml，再加水稀釋至1 000 ml，即得(含0.02%吐溫-80)。溶出介質Ⅲ(pH 4.0醋酸鹽緩沖液)：0.05 mol/L醋酸溶液 -0.05 mol/L 醋酸鈉溶液(16.4∶3.6)(含 0.02%吐溫-80)。溶出介質Ⅳ(pH 6.8磷酸鹽緩沖液)：取磷酸二氫鉀3.4 g和無水磷酸氫二鈉3.55 g，加水適量使溶解后，定容至1 000 ml，再用水稀釋1倍，即得(含0.02%吐溫-80)。溶出介質Ⅴ：0.3%十二烷基硫酸鈉溶液(見《中國藥典》2010年版)。

2.2.2 標準曲線的制備 稱取非洛地平對照品約10 mg，精密稱定，用甲醇定量稀釋制成20 μg/ml的對照品儲備液。精密量取一定體積對照品儲備液，分別用上述 5 種溶出介質稀釋制成 0.2、1.0、2.0、5.0、10.0和20.0 μg/ml的標準溶液。按上述色譜條件分別測定，得不同溶出介質下的標準曲線方程，結果在0.2～20.020 μg/ml范圍內線性關系良好。在介質Ⅰ～介質Ⅴ中的回歸方程分別為：A=33 972 C-487.05(r=1.000 0)、A=33 856 C-1 032.19(r=0.999 9)、A=342 58 C-719.42(r=1.000 0)、A=34 737 C-629.53(r=1.000 0)和 A=35 564 C-231.82(r=1.000 0)。

2.2.3 精密度試驗 取“2.2.2”項下各介質制備的濃度為 0.2、5.0 和 20.0 μg/ml的非洛地平對照品溶液，分別重復進樣6次，測定峰面積，RSD均＜1.0%。

2.2.4 穩定性試驗 取“2.2.2”項下各介質制備的濃度為 0.2、5.0 和 20.0 μg/ml的非洛地平對照品溶液，分別在0、1、2、4、8、12 和 24 h 進樣，測定峰面積，結果表明5種溶液在24 h內穩定，RSD均＜2.0%。

2.2.5 回收率試驗 取已知含量的各廠家非洛地平片10片(2.5 mg規格取20片)，精密稱定，研細，精密稱取適量，分別用5種介質溶解并定容成10 μg/ml的樣品溶液。分別取對照品儲備液2.0、2.5和3.0 ml至10 ml量瓶中，各精密加入樣品溶液5 ml，用相應介質稀釋至刻度，制備成低、中、高3種濃度的供試品溶液，每種濃度制備3份。照“2.1”項下方法測定，計算加樣回收率，結果A廠非洛地平回收率均在99.02% ～101.18%，B廠非洛地平回收率均在 98.25% ～101.83%，C廠非洛地平回收率均在 98.57% ～101.69%，D廠非洛地平回收率均在 98.31% ～101.24%，E廠非洛地平回收率均在 98.33% ～101.07%，RSD 均 ＜2.0%。

2.3 溶出度測定及結果 分別取“2.2.1”項下的溶出介質 1 000 ml，采用《中國藥典》方法［1］，轉速為 50 r/min，將5 批樣品隨機取樣 6 片，分別在 5、10、15、30、45、60、90、120、180、240 和 360 min 吸取溶出液 3 ml，同時補充同體積空白溶出介質，其間，當連續兩點溶出率均＞85%，且差值在5%以內時，試驗則可提前結束。照“2.1”項下方法測定，計算不同時間的累積溶出率，溶出曲線見圖1。

2.4 數據處理及分析 采用美國FDA推薦使用的相似因子法［3-5］。從溶出曲線可以看出，A廠家在上述5種介質中均具有較高和較穩定的溶出率，故將其作為參比制劑，評價其余4家藥廠產品的相似性。若供試制劑與參比制劑的溶出曲線間相似因子50≤f2≤100，可判斷為兩者相似。統計分析結果見表2。

表2 其他各藥廠制劑的值

由表2可以看出，C藥廠制劑與A藥廠制劑在5種介質中溶出曲線均相似，D藥廠制劑與A藥廠制劑在參照日本“藥品品質再評價”采用的4種介質方法下均相似，但在《中國藥典》2010年版規定的方法下不相似，B藥廠和E藥廠制劑與A藥廠制劑僅在其中一個溶出介質中相似，其余均不相似，說明A藥廠、C藥廠和D藥廠生產的非洛地平片質量水平相似，但B藥廠和E藥廠與上述3個藥廠制劑的質量水平有顯著差異。

圖1 5家藥廠的非洛地平片在不同溶出介質中的溶出曲線

3 討論

3.1 增溶劑種類及濃度的選擇，參考日本橙皮書，非洛地平在pH 1.2鹽酸溶液、pH 4.0醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液和水中的溶解度(37℃)分別為0.000 72、0.000 79、0.000 68 和 0.000 58 mg/ml，在上述四種溶液分別含 0.5%吐溫 -80中的溶解度(37 ℃)分別為 0.19、0.22、0.21 和 0.22 mg/ml。故本實驗選擇吐溫-80作為增溶劑，同時，分別加入不同濃度吐溫 -80(0.02%、0.05%、0.1%、0.5%)對樣品進行測試，結果表明加入0.02%和0.05%吐溫-80結果相似，所以選擇0.02%吐溫-80作為溶出介質。

3.2 由不同溶出介質的溶出曲線可以看出：按照《中國藥典》2010年版的方法，除D藥廠外，其余藥廠的非洛地平片在45 min時的累積溶出量均超過80%;參照日本“藥品品質再評價”采用的4種介質，各藥廠的非洛地平片在45 min時的累積溶出量僅為30%～60%，遠遠低于國外產品(45min溶出量均達80%以上)的溶出量，說明國外生產的非洛地平片制劑工藝與國產藥品不相同，并不適于作為國產非洛地平片的參比制劑。故本試驗采用國產制劑之間相似度的比較，以A藥廠作為參比制劑，考察各企業產品的相似程度。

3.3 有文獻報道［6］，采用乙腈-甲醇-磷酸鹽緩沖液為流動相分別考察4家不同藥廠非洛地平片在參照日本“藥品品質再評價”采用的4種溶出介質中的體外溶出情況，并與《中國藥典》2005年版規定的非洛地平片溶出方法進行比較，結果4個廠家非洛地平片在《中國藥典》(2005年版)方法下均相似，在其他介質中均不相似。通過實驗比較可以看出，《中國藥典》2010年版規定的非洛地平片溶出方法更為合理，色譜系統更為簡單，且該溶出介質對各企業產品溶出度有較好的區分作用。

3.4 按照《中國藥典》2010年版的方法，D藥廠的非洛地平片在45 min時的累積溶出量僅為55%，主要由于該企業產品檢驗標準為《國家食品藥品監督管理局新藥轉正標準》第三十八冊，溶出度測定以“0.1 mol/L鹽酸溶液-異丙醇(3∶2)”為溶出介質，異丙醇的使用，提高了藥物的溶解度，增加了藥物的溶出速率，但建議該廠家改進生產工藝，按照新版藥典標準檢驗。

3.4 非洛地平口服吸收完全并經歷廣泛的首過代謝，主要由肝臟代謝、消除，這種代謝為一級動力學過程，代謝速率與其血漿濃度成正比。因此，臨床應用非洛地平產品時，應根據不同產品的不同動力學特征結合患者的實際病情選擇應用，包括價格因素，保證用藥的安全、有效、經濟。

1 中國藥典.二部.2010：454，455

2 謝沐風.簡介日本“藥品品質再評價”工程——溶出度研究系列.中國藥品標準，2005，6(6)：42

3 俞慧群，卓開華.6廠家多潘立酮片的溶出度考察.中國藥師，2010，13(1)：74

4 江瑩，江明，胡敏，等.不同廠家艾司唑侖片的體外溶出度比較.醫藥導報，2011，30(3)：358

5 吳啉，李慧義，丁麗霞，等.國產尼莫地平片的溶出度比較.藥物分析雜志，2009，27(3)：195

6 戴幼琴，毛榮榮.4家藥廠的非洛地平片溶出度比較.藥學實踐雜志，2009，27(3)：195