人教版高中《生物》教材“分子與細胞”中“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”這個實驗在教材中描述的實驗步驟比較復雜,不便于操作。在實際操作過程中出現的結果與理論也有較大的偏差。針對以上問題,筆者對實驗材料和操作方法進行了解析與改進,同時對該實驗的重點、難點和學生容易出現的疑點進行了探討并提出相關建議。
一、該實驗在教材中的地位及作用
“觀察DNA和RNA在細胞中的分布”是《生物》人教版(必修一)中一個很重要的實驗,可以直觀地幫助學生認識細胞中DNA和RNA的分布情況。在實際教學過程中,我們發現該實驗步驟較繁雜,學生難以記清;操作較復雜,學生難以掌握;實驗效果不明顯,學生難以接受等,這些情況促使我們對該實驗作進一步的探索,提出了改進意見。
與以前的舊版人教版教材相比較,新課程中加入這一實驗,目的在于降低對這一知識點的理解難度,同時,幫助學生養成勤于動手,學會探究式學習,這是新課程理念的重要體現,這也體現了新課程面向每個學生的理念。
二、實驗原理與解析
1.真核細胞的DNA主要分布在細胞核內,RNA主要分布在細胞質中。
2.甲基綠和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同,甲基綠對DNA親和力強,使DNA呈現出綠色,而吡羅紅對RNA的親和力強,使RNA呈現出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色,可同時顯示DNA和RNA在細胞中的分布。
3.鹽酸的作用有如下兩方面。
(1) 鹽酸能改變細胞膜的通透性,加速染色劑的跨膜運輸。
(2) 鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質分離,便于DNA與染色劑的結合。
三、材料用具的選擇及改進
1.材料的選擇。
(1)選用的實驗材料既要容易獲得,又要便于觀察。
(2)常用的觀察材料由人的口腔上皮細胞、洋蔥鱗片葉表皮細胞(在選擇實驗用植物細胞時最好選擇洋蔥內表皮細胞,其細胞較大且無色,便于染色與觀察) 。
(3) 本實驗使用的是吡羅紅G 呈綠色,水溶液呈紅色(經過反復實驗證明染色液中甲基綠︰吡羅紅=1.2︰1時,染色效果最好)。
2.取材要點。
(1) 取口腔上皮細胞之前,應先漱口,以避免裝片中出現太多的雜質。
(2) 取洋蔥表皮細胞時,盡量避免材料上帶有葉肉組織細胞。
3.實驗的幾點改進建議。
(1)藥品的選擇和處理。商品的甲基綠中經常混有甲基紫,可能會影響染色效果,所以使用前者首先要提純,除去甲基紫。甲基綠不溶于氯仿(三氯甲烷) ,甲基紫易溶于氯仿,利用該特性可通過萃取的方法用氯仿洗脫甲基紫。
(2)吡羅紅甲基綠染色劑的配制。
本實驗的成功關鍵在于吡羅紅甲基綠染色劑的配制成功,因為該染色劑的配制較為復雜。在配制時,一般的配制方法是: A液+B液,A、B兩液可置于4o C冰箱中,最好現用現配,用時兩液混勻即可使用。(使用時將A液和B液以7∶4的比例混勻即可。)
(3)鹽酸水解處理。在教科書中用的質量分數為8%的鹽酸,經過多次實驗后發現質量分數為8%的鹽酸濃度太高,嚴重影響實驗效果。此外,若處理溫度過高、時間過長,結果細胞核也不呈藍綠色,而是與細胞質一樣呈紅色。后來通過查找資料發現,有人介紹使用質量分數為2%的鹽酸,再參照人體體溫,建議使用37 ℃水浴,又經過多次反復實驗,發現效果較好。
四、實驗注意事項
1.甲基綠吡羅紅染液要現用現配,否則,染料會被氧化,影響染色效果,同時,為避免變質,A液需要使用棕色瓶盛放。
2.實驗中使用生理鹽水的目的是維持細胞的外形,以免細胞在實驗之前破裂,導致DNA、RNA被釋放到細胞外。
3. 用酒精燈烘烤載玻片時,切記不要只集中于材料處,而應將載玻片在火焰上來回移動,使載玻片均勻受熱,以免破裂。
4. 烘烤后的載玻片不要馬上放入盛有稀鹽酸的燒杯中,最好先自然冷卻1分鐘。
5. 換用高倍鏡觀察材料時,只能用細準焦螺旋進行調焦,切不可動粗準焦螺旋。
6.該實驗需要觀察染色情況,所選擇的材料應為白色或無色,例如,教材中選用的植物材料為洋蔥鱗片葉內表皮,而不能使用紫色外表皮。
7.甲基綠吡羅紅染色劑,有的教材也稱為甲基綠派洛寧染色劑。
(作者單位:江西省南昌市第十中學)
責任編輯:周瑜芽