超高效液相色譜-串聯質譜法測定水稻基質中阿維菌素殘留量

摘 要 建立了超高效液相色譜串聯質譜法（UPLCMS/MS）測定水稻基質中阿維菌素殘留量，考察了基質效應，并對實際樣品進行了檢測。稻田土、稻殼、糙米和稻桿經乙腈振蕩提取，稻田水經乙酸乙酯液液分配提取后，用C18固相萃取小柱或弗羅里硅土柱凈化，采用UPLCMS/MS正離子掃描測定殘留的阿維菌素。稻田土、稻田水和糙米的3種添加濃度（1.0， 10.0和100

關鍵詞 阿維菌素； 液相色譜串聯質譜； 殘留； 水稻 

1 引 言

阿維菌素屬于大環內酯雙糖類化合物，是從土壤微生物中分離的天然產物，對昆蟲和螨類具有觸殺和胃毒作用，是一種高效廣譜殺蟲劑，在蔬菜、水果、谷物生產中應用較廣。有研究表明，阿維菌素是劇毒農藥，存在較高風險。我國制定了阿維菌素在梨、柑橘、黃瓜、豇豆和葉菜中的最大殘留限量為20～50g/kg，歐盟規定阿維菌素在蔬菜、稻谷中的最大殘留限量為10g/kg。

目前，阿維菌素的殘留檢測多采用高效液相色譜紫外檢測法^[1，2]、高效液相色譜熒光檢測法^[2～9]、高效液相色譜質譜法^[2，9～15]及酶聯免疫法^[16]等。其中關于食品的報道比較多，有蔬菜^{[4～6，14，18]}、水果^{[1，7，11～13]}、茶葉^[10]、稻米^[3]、牛奶^{[9，15]}、牛肝^{[15，16]}等。徐浩然等^[1]采用二氯甲烷或丙酮提取稻田水、土壤和稻米中殘留的阿維菌素，并進行液相色譜紫外檢測；Valenzuela等^[3]比較了液相色譜紫外檢測器、熒光檢測器和質譜檢測器對柑橘中的阿維菌素的檢測能力；章虎等^[4]報道了乙腈提取、氨基固相萃取小柱凈化、柱前衍生后用液相色譜熒光檢測器檢測稻米中的阿維菌素；文獻\\報道了乙腈或乙腈溶液提取，C18固相萃取小柱凈化后用液相色譜熒光檢測器檢測蘋果、梨和西紅柿中的阿維菌素；Giannetti等^[10]采用液液分配提取，超低溫凈化后用液相色譜串聯質譜或熒光檢測器檢測牛奶中的阿維菌素；Pozo等^[13]報道了乙腈勻漿提取，加醋酸鈉后乙腈相直接用液相色譜串聯質譜檢測柑橘中的阿維菌素；Valenzuela等^[14]采用了C18為填料的基質固相分散萃取法，液相色譜一級質譜檢測柑橘中的阿維菌素；Yoshii等^[9]報道了丙酮提取作物中的阿維菌素、C18和氨基柱凈化、衍生后用液相色譜熒光檢測器檢測；Xie等^[18]報道了采用乙腈超聲提取、衍生后用液相色譜熒光檢測器檢測蔬菜水果中的阿維菌素。未見關于高效液相色譜串聯質譜法檢測稻田水、稻田土、稻殼、糙米和稻桿中阿維菌素殘留量的報道。紫外檢測器檢測阿維菌素的靈敏度已不適應殘留分析；熒光檢測器雖然靈敏度較高，但衍生方法繁瑣，而且衍生后的阿維菌素易降解；ELISA方法存在假陽性。故本研究建立了超高效液相色譜串聯質譜法檢測稻田水、稻田土、稻殼、糙米和稻桿等基質中阿維菌素殘留量的方法，前處理中避免使用對人和環境毒性較大的二氯甲烷，針對不同水稻基質樣品采用了不同的提取、凈化方法。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

Waters ACQUITY UPLC、Waters Xevo TQ MS（美國Waters公司）；固相萃取儀（美國Supelco公司）；YP402N電子天平（上海精密科學儀器有限公司）；R201旋轉蒸發器（上海申勝生物技術有限公司）；循環水式多用真空泵（杭州大衛科教儀器有限公司）；HH4 恒溫水浴鍋（江蘇金壇億通電子有限公司）；SHZ82型氣浴恒溫振蕩器（江蘇金壇億通電子有限公司）。

乙腈（分析純，江蘇永華精細化學品有限公司；色譜純，美國Fisher公司）；甲醇（色譜純，美國Fisher公司）；乙酸乙酯（分析純，杭州雙林化學試劑廠）；石油醚（分析純，杭州石化有限責任公司）；甲酸（色譜純，ROE SCIENTIFIC公司）；純凈水（娃哈哈公司）；氯化鈉（分析純，蘭溪市屹達化工試劑有限公司）；無水硫酸鈉（分析純，蘭溪市屹達化工試劑有限公司）；弗羅里硅土（粒徑165～245