survivin在結(jié)直腸癌組織中的表達及其臨床意義

聶祝青 田小林 朱小寶

（桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院胃腸外科 廣西桂林 541001）

結(jié)直腸癌是常見惡性腫瘤，發(fā)病率以平均每年4.2%的速度上升［1］。研究發(fā)現(xiàn)，凋亡抑制蛋白家族成員中，survivin是最強的凋亡抑制因子［2］，其選擇性表達于癌組織中，且在正常組織中幾乎不表達［3］。國內(nèi)外針對此因子與結(jié)直腸癌物學特性及臨床特點之間的關系的研究較多，絕大部分是運用免疫組織化學方法，其結(jié)論尚不一致。本次實驗旨在通過檢測survivin m RNA在結(jié)直腸癌組織中的表達情況，探討其與結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展及預后的關系。

1 材料與方法

1.1 一般資料 標本取自2010年6月至2011年6月在桂林醫(yī)學院附屬醫(yī)院住院行根治性手術的60例原發(fā)性結(jié)直腸癌患者，所有標本均有明確的病理診斷結(jié)果，術前均未經(jīng)化療、放療或免疫治療。其中男27例，女33例；結(jié)腸癌35例，直腸癌25例；低分化癌24例，中高分化癌36例；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移31例；Dukes A期12例，B期19例，C期26例，D期3例。并取40例患者癌旁正常組織（距腫瘤邊緣10cm以上）各1塊。取下組織后用DEPC水處理，并立即置于液氮中冷凍，再轉(zhuǎn)移至－80℃低溫冰箱中保存。

1.2 試劑 RNA提取試劑盒和反轉(zhuǎn)錄試劑盒購自北京艾德萊生物科技有限公司，RT-PCR檢測試劑盒購自北京康為世紀生物科技有限公司。

1.3 引物的設計及合成 參見表1。

表1 引物序列

1.4 總RNA的提取 從－80℃冰箱取出組織，約50mg，在液氮中快速研磨成粉末狀，再轉(zhuǎn)移至EP管中，按RNA抽提試劑盒說明抽提總RNA。取部分RNA測定OD值，檢測其濃度。并行RNA瓊脂糖凝膠電泳，以檢測RNA純度及完整性。……