血細胞分析儀假性血小板減少原因分析及處理

于秀艷，朱 華，高海燕

（吉林省腫瘤醫院，吉林 長春 130012）

血細胞分析儀假性血小板減少原因分析及處理

于秀艷，朱 華，高海燕

（吉林省腫瘤醫院，吉林 長春 130012）

血細胞分析儀因其快速、簡便、重復性好等特點，已被廣泛應用，但其中血小板計數假性減少時有發生。為探討假性血小板減少的影響因素，我們采用LH750全自動血細胞計數儀對血小板計數值異常偏低的患者進行血小板手工計數，血涂片觀察血小板分布情況等方法進行復檢。發現假性血小板減少203例標本，現將結果分析報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料自2009年11月－2010年11月間吉林省腫瘤醫院檢驗科住院及門診患者血小板計數減少共30400例，其中假性血小板減少203例。

1.2 實驗器材美國貝克曼-庫爾特LH750五分類血細胞分析儀，所用溶血劑、稀釋液及清洗液均為貝克曼公司生產，全血質控品由貝克曼公司提供，日本奧林巴斯顯微鏡，BD公司EDTA-K2真空抗凝管，血小板草酸銨稀釋液。

1.3 實驗方法對血小板異常減少的患者（如血小板數量偏低、直方圖及散點圖出現異常、儀器相關的報警提示），依據全國血液學的復檢規則，對血小板數量、形態以及分布進行鏡檢、并計數3次取均值；具體操作嚴格按照衛生部第三版《臨床檢驗操作規程》草酸銨法血小板鏡檢要求進行。

2 結果

假性血小板減少的203例標本經瑞氏染色后，鏡下觀察血小板的數量、分布及形態特點，其中51例標本血小板形態及分布未見異常。86例血小板大小不等聚集團塊。44例“血小板衛星現象”。22例巨大血小板體積。

3 討論

乙二胺四乙酸二鉀（EDTA-K2）與血液中Ca2＋形成螯合物，使Ca2＋失去凝血作用，從而抑制血液凝固，EDTA抗凝劑因其不影響血細胞形態，并且能夠抑制血小板的聚集。國際血液學標準委員會將其認定為血細胞分析的抗凝劑得到廣泛應用，但Onder等學者早在1980年就報道了EDTA可以導致血小板聚集而致假性血小板減少的病例。目前病理機制仍未明確，可能的原因是血小板表面存在某種隱匿性抗原［1］，與EDTA鹽作為抗凝劑時免疫介導的冷抗血小板自身抗體反應所致。

假性血小板減少的203例標本中，61例標本涂片見血小板形態及分布未見異常，多因采血時進針部位組織損傷、組織凝血因子進入血標本中產生凝塊，采血后未充分混勻，采血量過多抗凝劑相對不足，造成血細胞分析儀計數血小板假性減少，抗凝靜脈血標本中的EDTA-K2一定時間內隨著標本放置時間延長可使離體后聚集的血小板逐漸離散，標本室溫放置30min充分混勻后進行血細胞分析可避免血小板假性減少的發生。對于采血不當引起的假性血小板減少，應注意實驗前的質量控制讓采血者了解標本采集的注意事項及標準操作程序，以保證結果的準確性。96例標本涂片見血小板呈大小不等聚集團塊，多見于腫瘤患者、自身免疫病、肝病、高脂血癥［2］等，當血細胞分析儀進行血小板計數利用電阻抗原理，測定血小板的體積范圍在2－30fl，當被測血小板體積超過30fl時，血細胞分析儀將這些凝集團塊當作白細胞或小紅細胞；當血小板體積低于2fl時，儀器默認為噪音不計數，這樣血小板計數結果將假性減少，白細胞數量有所增加；庫爾特LH750血細胞分析儀的散點圖、直方圖異常，在血小板區細胞分布密度向右延伸，提示有血小板凝集。工作中應將這類標本草酸銨法血小板計數再報告。24例標本涂片見“血小板衛星現象”。血小板黏附、圍繞于中性粒細胞或單核細胞，這是由于EDTA依賴的冷抗血小板自身抗體與血小板表面的膜糖蛋白的Ⅱb／Ⅲa作用，自身抗體Fc段同時與淋巴細胞或單核細胞膜上的相應受體結合出現衛星現象。這種現象的血小板會被儀器誤當做白細胞，造成血小板假性減少［3］，應對這類標本手工復檢。魯家才曾報道，氟化鈉可以抑制EDTA依賴的血小板聚集，在臨床上可以用于此類患者的檢測［4］。22例標本涂片見巨大血小板體積，多見于巨核細胞白血病和脾切除術后患者。LH750五分類血細胞分析儀將這樣的血小板誤認為白細胞，出現血小板減少的假象。

綜上所述，血液分析儀血小板計數應將血小板計數范圍、儀器警示、直方圖及散點圖的分布結合起來進行具體分析，血小板聚集及時通知臨床重新采血。當有潛在干擾因素如黃疸、脂血出現時，須手工顯微鏡計數復查，綜合判斷，避免影響臨床診斷及治療。

［1］Yamaguchi M，Mayumi M，Kasuya T.A patient with EDTA dependent pseudo thrombocytopenia who underwent clipping surgery for a ruptured aneurysm［J］.Hematol，1998，68（2）：93.

［2］鐘素萍，馬粵健.Svsmex KX-21型血細胞分析儀計數血小板的影響因素的探討［J］.海南醫學，2007，18（8）：132.

［3］周小棉，鄒 曉.假性血小板減少癥研究進展［J］.中華檢驗醫學雜志，2007，30（9）：1065.

［4］魯家才.兩種藥物對EDTA依賴性血小板聚集的抑制作用［J］.臨床檢驗雜志，2004，22（3）：198.

1007－4287（2012）02－0337－02

2011－01－04）